張 芳（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)信息學(xué)院，山西太谷 030800）

青蘋果竹芋，又叫蘋果竹芋、圓葉竹芋。是竹芋科肖竹芋屬植物，其葉色清新宜人，其上排列有整齊的條紋，是很受人們喜愛的室內(nèi)觀葉植物，并有清肺止咳、清熱利尿的藥用功效。

青蘋果竹芋原產(chǎn)美洲的熱帶地區(qū)，屬多年生常綠宿根草本植物，喜溫暖濕潤和光線明亮的環(huán)境，不耐寒、不耐旱，怕烈日曝曬，對水分反應(yīng)較為敏感，對空氣要求較高，不易成活。青蘋果竹芋的繁育主要采用分株繁殖，繁殖速度慢且影響母體的長勢，不利于擴大生產(chǎn)

[1]。自2000年以來，我國開始對青蘋果竹芋進行組織培養(yǎng)研究。到目前為止，對青蘋果竹芋繼代培養(yǎng)的研究較少，本試驗針對影響青蘋果竹芋繼代培養(yǎng)的因素進行分析，按照不同種類的生長調(diào)節(jié)劑濃度對青蘋果竹芋莖的分化、增殖等影響，篩選出最為適合莖生長的生長調(diào)節(jié)劑濃度，從而獲得品質(zhì)優(yōu)良的青蘋果竹芋，并對實現(xiàn)青蘋果竹芋的工廠化快速繁殖具有重要的研究意義。

1 材料與方法

1.1 材料

青蘋果竹芋外植體、蔗糖、瓊脂、HgCl2、高錳酸鉀、新潔爾滅、無菌水、6-BA、IBA、NAA。

1.2 儀器設(shè)備

高壓滅菌設(shè)備1套，超凈工作臺1臺，500mL搪瓷杯 1個，罐頭瓶多個，燒杯 50、100、250mL各 3個，容量瓶25、50、100mL各5個，移液管（不同規(guī)格）3個，手術(shù)剪1把，長柄剪子1把，解剖刀l個，酒精燈1個，pH試紙，封口塑料膜若干,線繩若干[2]。

1.3 試驗設(shè)計

1.3.1 外植體消毒。從生長健壯的青蘋果竹芋上，選取帶節(jié)的莖段,除去根狀物，用自來水沖洗20min，用濾紙吸干水分，放入500倍高錳酸鉀溶液中浸泡消毒40min后，放入500倍新潔爾滅溶液中浸泡消毒30min。完成后，將材料放在超凈工作臺上，用75%酒精浸泡消毒30s，用無菌水沖洗2～3遍，再用0.1%HgCl2浸泡消毒12min，其間不斷搖晃滅菌瓶讓材料充分消毒，最后用無菌水沖洗4～5次后，用無菌濾紙吸干表面水分，切成小段接種[3]。

1.3.2 培養(yǎng)過程。以MS為基本培養(yǎng)基，添加蔗糖30g/L、瓊脂 7g/L，pH 值 5.6～5.8[4]，并按照表1所示的實驗設(shè)計來誘導(dǎo)不定芽。接種完畢之后，將培養(yǎng)物放在無菌恒溫室里培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度20～25℃，光照14h/d(光照強度 2000Lx)，并分別按照 10d、20d、50d 的周期，對青蘋果竹芋的芽的數(shù)目以及生長情況進行統(tǒng)一計數(shù)。本試驗中的激素參數(shù)設(shè)計如下：

表1 不同激素對青蘋果竹芋莖的繼代培養(yǎng)的影響的試驗設(shè)計

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度6-BA與IBA配比對青蘋果竹芋幼芽增值的影響

不定芽誘導(dǎo)結(jié)果：將青蘋果竹芋外植體接種到不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基中30d后，可觀察到外植體顏色逐漸變?yōu)樽睾稚?，在接種50d后發(fā)現(xiàn)有綠色新芽長出，且隨著培養(yǎng)時間的延長，不定芽逐漸粗壯。

表2 不同激素對青蘋果竹芋莖的繼代培養(yǎng)的影響

由表2可知，以青蘋果的莖為外植體，在MS中加入 6-BA 2.0～4.0mg/L，IBA 0.2～0.5mg/L 的培養(yǎng)基中均能長出不定芽。其中，以MS+6-BA 4.0mg/L+IBA 0.5mg/L的實驗設(shè)計誘導(dǎo)不定芽的效果最好，不定芽的分化率較高，芽的生長快。

2.2 不同濃度6-BA與NAA配比對青蘋果竹芋幼芽增殖的影響

不定芽誘導(dǎo)結(jié)果：將青蘋果竹芋外植體接種到不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基中30d后，可觀察到外植體顏色逐漸變?yōu)樽睾稚?，在接種50d后發(fā)現(xiàn)有綠色新芽長出，且隨著培養(yǎng)時間的延長，不定芽逐漸粗壯。

表3 不同激素對青蘋果竹芋莖的繼代培養(yǎng)的影響

由表3可知，以青蘋果的莖為外植體，在MS中加入 6-BA 2.0～4.0mg/L，NAA 0.2～0.5mg/L 的培養(yǎng)基中均能長出不定芽。其中，以MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L的實驗設(shè)計誘導(dǎo)不定芽的效果最好，不定芽的分化率較高，芽的生長快。

3 結(jié)論

從表2和表3中可以看出，適宜誘導(dǎo)青蘋果竹芋莖的繼代培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L；MS+6-BA 4.0mg/L+IBA 0.5mg/L。

在青蘋果竹芋莖的繼代增殖培養(yǎng)基中，當NAA的添加量一定時，隨著6-BA濃度的降低，青蘋果竹芋莖的增殖效果越好，當IBA的添加量一定時，隨著6-BA濃度的增高，青蘋果竹芋莖的增殖效果越好。與此同時，NAA（或IBA）的濃度不能超過0.5mg/L。此外，在繼代增殖培養(yǎng)中，青蘋果竹芋試管苗生長后期，其芽的生長速率相對較慢，60～70d后觀察發(fā)現(xiàn)，相對于前30～50d的苗高而言，僅增長了1～2cm。因此，在青蘋果竹芋組織培養(yǎng)過程中，如何獲得較高的增殖率和長勢明顯的試管苗仍有待于進一步研究和探索。