劉 媛
(唐山市植物保護(hù)檢疫站,河北 唐山 063000)
甜菜(Beta vulgaris)是二年生草本塊根植物,具有喜溫涼、耐寒等生物特性[1]。目前是我國重要的糖料作物和經(jīng)濟(jì)作物之一,其生物產(chǎn)量高,需水量大,主要分布在我國東北、西北和華北地區(qū)[2-3]。牻牛兒基焦磷酸合酶 (Geranylgeranyl pyropbosphate svnthase簡稱GGPPS,催化法尼基焦磷酸和異物烯基焦磷酸縮合生成香葉基香葉基焦磷酸,而后參與類胡蘿卜素等物質(zhì)的合成[4]。本研究采用生物信息學(xué)軟件對甜菜GGPPS基因進(jìn)行分析,為甜菜GGPPS基因的后續(xù)功能研究奠定基礎(chǔ)。
從NCBI網(wǎng)下載甜菜GGPPS基因的序列,之后通過ExPASy和NCBI方法研究GGPPS基因相關(guān)特性和保守結(jié)構(gòu)域的預(yù)測。通過DNAStar分析BvGGPPS的二級結(jié)構(gòu)。從NCBI下載來自8個其他物種的GGPPS的氨基酸序列,并使用DNAMAN進(jìn)行多序列比對。
從NCBI下載了甜菜GGPPS基因的序列,基因編號為XM_010682603.2。序列分析表明,BvGGPPS基因含1,170bp的開放閱讀框,蛋白質(zhì)氨基酸編碼389個,等電點(pI)值5.91。GGPPS基因的氨基酸類型和比例如圖1所示,最高氨基酸數(shù)是亮氨酸(Leu),而最低數(shù)量是半胱氨酸(Cys)和酪氨酸(Tyr)。其預(yù)測公式為C1840H2979N503O572S16。其總平均親水指數(shù)為-0.116,脂溶性指數(shù)為91.54,溶液中的不穩(wěn)定指數(shù)為45.91。
圖1 甜菜GGPPS基因的氨基酸類型和比例
使用保守結(jié)構(gòu)域數(shù)據(jù)庫 (CDD)的分析證明,BvGGPPS蛋白的氨基酸序列具有一個異戊二烯甾體生物C1超家族。而蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)分析結(jié)果表明,GGPPS含有14個α-螺旋,12個β-折疊,20個β-轉(zhuǎn)角,而大多數(shù)氨基酸是親水性氨基酸,見圖2。
圖2 甜菜GGPPS蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)分析
同源性分析表明,BvGGPPS蛋白的氨基酸序列與其他高等植物物種的氨基酸序列具有高度同源性。表1顯示BvGGPPS與藜科的幾種GGPPS蛋白具有最高的同一性(如菠菜、藜麥),并且同一性水平分別為87%和84%。有趣的是,BvGGPPS與我們研究中引用的其他物種表現(xiàn)出>68%的同一性,表明GGPPS蛋白在不同物種中高度保守。
表1 其他高等植物物種與甜菜GGPPS蛋白氨基酸序列的同源性
在本研究中,我們對甜菜BvGGPPS基因的序列進(jìn)行了分析,發(fā)現(xiàn)該基因編碼區(qū)全長1,170bp,編碼389個氨基酸,等電點(pI)為5.91,其總平均親水指數(shù)為-0.116,脂溶性指數(shù)為91.54。系統(tǒng)進(jìn)化樹顯示與藜科波菜親緣關(guān)系最近,同源性最高,同時結(jié)果表明GGPPS蛋白在不同物種中高度保守。本研究為進(jìn)一步探究甜菜該基因功能奠定基礎(chǔ)。