李天芝，于新友

（山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600）

鉤端螺旋體簡稱鉤體，在世界范圍內(nèi)廣泛存在，尤其是在熱帶、亞熱帶地區(qū)江河、湖泊、沼澤、池塘、水田中長期存活[1]?？煞譃橹虏⌒秃透蛢纱箢怺2]，其中致病型可感染豬、牛、羊、貓、鼠、狗、鴨、鵝、蛙等多種動物，也可以感染人，是一種人獸共患病原體，引起鉤端螺旋體病。該病是一種自然疫源性傳染病[3]。世界衛(wèi)生組織將其列為重點防范的傳染病，我國將其列為法定報告?zhèn)魅静　?800年，首次出現(xiàn)鉤體病記載，1888年得到證實，1916年以后，德國、法國、意大利、英格蘭等相繼發(fā)生過此病，并分離到病原體，我國于1934年首次報道該鉤體病，目前是鉤體病的主要疫區(qū)之一[4]。

豬是鉤體的主要傳染源之一，豬鉤體病感染率高，發(fā)病率低，臨床表現(xiàn)為高熱、貧血、黃疸、血紅蛋白尿、流產(chǎn)及水腫等[5]，一旦傳入豬群，很難根除。鉤體可分為250多種不同血清型，不同血清型對豬致病性不同，各血清型之間交叉保護力弱。一年四季均可發(fā)病，夏秋季節(jié)多發(fā)。各品種和日齡豬均可感染，幼齡仔豬及妊娠母豬受到的危害較嚴重[6]。耐過豬預后不良，生長發(fā)育緩慢，造成飼料報酬下降，給

養(yǎng)豬業(yè)帶來極大的經(jīng)濟損失。流行病學調(diào)查表明，豬鉤體病在我國流行廣泛，危害嚴重，豬鉤體病相關(guān)研究的深入開展，不僅對養(yǎng)豬業(yè)，也對公共衛(wèi)生安全具有重要意義。本文主要介紹了鉤端螺旋體病的病原學、流行病學、臨床癥狀、病理變化、診斷及防控措施，以期為該病的診斷及防控提供參考。

1 病原學

鉤體為細螺旋體科細螺旋體屬，是一種介于細菌和原蟲之間的病原微生物，也是一種廣義上的細菌。鉤體形態(tài)纖細，呈圓柱狀，長約6～20 μm，直徑約1～2 μm[7]，至少有18個致密而規(guī)則的螺旋。鉤體中央為原生質(zhì)柱體，外有2根軸絲纏繞，由與肽聚糖細胞壁緊密結(jié)合的細胞膜包繞，并覆蓋一層主要成分為脂多糖的外膜。鉤體無鞭毛，在液體環(huán)境下，能翻轉(zhuǎn)、屈伸或沿長軸旋轉(zhuǎn)快速前進，使菌體呈“8”字、“丁”字、C、S、O等多種形狀，兩端柔軟，有較強的穿透力[8]。暗視野顯微鏡下觀察，呈細長串珠樣，革蘭氏染色陰性，但很難著色，姬姆薩染色為紅色或藍色，鍍銀染色法染成棕褐色[9]。鉤體可分為兩大類，即有致病性的問號鉤體和無致病性的雙曲鉤體，前者為單鉤，后者為雙鉤。致病型鉤體有25種血清群，190種血清型，我國存在18種血清群，70種血清型，引起豬鉤體病的血清型有波摩娜型、犬型、黃疽出血型、流感傷寒型、哈爾喬型、豬型，我國以波摩娜型和犬型為主。

鉤體對外界環(huán)境有一定抵抗力，在池塘、沼澤、水田、淤泥中能存活數(shù)月，鉤體不能在海水中長期存活，在自來水中能生存5 d。陽光直射和干燥環(huán)境鉤體迅速死亡，對酸堿環(huán)境抵抗力弱[10]。常規(guī)消毒劑70%酒精、2%鹽酸、漂白粉、1%石炭酸、0.25%甲醛溶液可殺滅病原，45℃ 30 min、50℃ 10 min、60℃ 10 s即可致死。

鉤體生長對營養(yǎng)要求不高，需氧，分離培養(yǎng)時可用含10%滅活兔血清的柯氏培養(yǎng)基。最佳生長溫度為28～30℃，最適生長pH為7.2～7.4。液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)1～2周后，可見培養(yǎng)基先出現(xiàn)半透明、云霧狀渾濁，后變?yōu)橥该鳎撞坑谐恋?。固體培養(yǎng)時可見光滑、透明、大小不等、緊貼于瓊脂表面的菲薄菌落。鉤體不發(fā)酵糖類、不分解蛋白質(zhì)，氧化酶和過氧化氫酶均為陽性，某些菌株能產(chǎn)生溶血素。多種抗生素如青霉素、鏈霉素、慶大霉素、土霉素、四環(huán)素、強力霉素、金霉素等都對鉤體具有很好的殺滅作用。

2 流行病學

鉤體廣泛存在于自然界中，氣候溫暖、濕潤的熱帶、亞熱帶地區(qū)尤為常見，能感染豬、牛、羊、馬、狗、貓、兔、鼠、鴨、雞、鵝、麻雀、蛙、蛇、蜥蜴、龜?shù)榷喾N動物，引起發(fā)病，也可感染人，是一種人獸共患病原菌。病豬、帶菌豬及鼠類是主要傳染源[11]。豬帶菌期長達1年以上，鼠類可終生帶菌、排菌。各品種和日齡豬均可感染，妊娠母豬和仔豬受到的危害最嚴重。妊娠母豬主要表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎及產(chǎn)弱仔。該病既能水平傳播，又能垂直傳播，如通過破損的皮膚、黏膜及消化道傳播，也可通過交配、人工授精傳播，菌血癥時期能通過吸血的蚊、蠅、虱等傳播。

該病有明顯的季節(jié)性，7～9月份高發(fā)，一般多散發(fā)，呈地方流行性。該病很少出現(xiàn)全場大范圍暴發(fā)，首次發(fā)病后，會暫時趨于平靜，經(jīng)5～50 d左右再度暴發(fā)流行，一般不會連續(xù)暴發(fā)，流行發(fā)病曲線呈階梯式。此外，很少見到在一個場內(nèi)發(fā)病后，波及到絕大部分或整個畜群的例子。鉤體在宿主體內(nèi)主要存在于腎臟、尿液和脊髓液里。鉤體在急性發(fā)熱期，廣泛存在于血液和各內(nèi)臟器官，通過尿液、糞便等排出，污染飲水、飼料、土壤、圈舍、用具等，感染其它健康動物。人主要通過接觸被污染的疫水而感染。鉤體侵入動物機體后，經(jīng)過約2～20 d的潛伏期，出現(xiàn)7～8 d的菌血癥期，動物出現(xiàn)發(fā)熱，鉤體進入肝、腎、腦脊液、生殖道、眼睛等多種組織器官，在腎臟中大量增殖，隨尿液排出體外，排菌期2～3個月，排菌量大，1 mL尿液中可含菌1億個以上。

3 臨床癥狀

不同血清型鉤體對豬致病性不同，豬只病情的嚴重程度也與其自身抵抗力及侵入機體的鉤體量有一定關(guān)系。總體來說感染率高，發(fā)病率低，大部分癥狀輕。病程短則1～2 d，長的可達2周以上。

急性黃疸型中、大豬，表現(xiàn)為發(fā)熱、黃疸、厭食、皮膚干燥，偶見豬在圈舍或欄桿上摩擦出血，后肢無力，全身震顫，可視黏膜黃染，茶色尿或血尿，常突然驚厥死亡，病死率高，病程1～2 d。亞急性及慢性型斷奶仔豬和保育豬多發(fā)，也常由急性型轉(zhuǎn)化而來，臨床表現(xiàn)為精神不振，被毛粗亂無光澤，食欲減退，飲欲增加，體溫升高，喜離群獨臥，眼結(jié)膜潮紅、腫脹，鼻孔流漿液，呼吸急促，走路后軀搖擺，上下頜、頭、頸部浮腫，指壓凹陷，不易恢復，俗稱“大頭瘟”，尿發(fā)黃或血紅蛋白尿，糞便干稀交替，個別病例病程長達1個月，易繼發(fā)感染，豬舍有特殊腥臭味，康復豬生長緩慢，成為僵豬。

妊娠母豬表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎和產(chǎn)弱仔，妊娠不足1月的母豬，常在鉤體感染后4～7 d發(fā)生流產(chǎn)，流產(chǎn)率高達70%，流產(chǎn)前體溫微升高，鼻鏡干燥，眼屎多，死胎皮膚表面有出血點，剖檢可見內(nèi)臟器官黃染，弱仔不能站立，移動時呈游泳狀，不會吸乳，1～2 d內(nèi)死亡，產(chǎn)后母豬少乳或無乳。

4 病理變化

剖檢可見皮膚、皮下組織、漿膜和黏膜有不同程度黃疸，心包和胸腔有黃色積液，胸肋膜和腹膜黃染，心內(nèi)膜出血，大腸出血，尤以盲腸、結(jié)腸出血嚴重，膀胱出血、積茶色尿，有時見褐色絮狀物，肝臟腫大，黃染，質(zhì)脆、易碎，膽囊腫大、膽汁濃稠，腎臟腫大，腎皮質(zhì)與腎盂周圍出血，皮質(zhì)表面有白色壞死點，頭頸部水腫，膀胱黏膜出血，皮下水腫，腸系膜水腫，胃壁水腫，氣管周圍組織水腫，脾臟腫大、淤血、有紫黑色梗死灶，肺臟黃染或有出血點。

5 診斷

根據(jù)流行情況、臨床癥狀及特征性病變可作出初步診斷，需要注意的是，需和一些類似的疾病作出鑒別診斷，如豬水腫病、豬蛔蟲病、豬黃脂病，黃曲霉毒素中毒、豬附紅細胞體病等。豬水腫病由致病性大腸桿菌產(chǎn)生的毒素引起，有運動失調(diào)、驚厥、麻痹等神經(jīng)癥狀，一般可見眼瞼、頭部皮下及下頜水腫，剖檢可見胃壁、腸系膜等膠凍樣水腫，腸黏膜出血。豬患蛔蟲病，3～6月齡仔豬多發(fā)，生長發(fā)育不良，被毛粗亂，體溫一般不高，咳嗽、嘔吐、流涎，蟲體阻塞膽道，膽汁排出受阻，使全身出現(xiàn)黃疸變化。剖檢膽道、腸道可見蟲體，肝臟出血、壞死，有云霧狀蛔蟲斑，糞便檢查有蟲卵。豬黃脂病多因飼喂含大量易酸敗的魚粉、豆餅、米糠等高脂肪飼料或機體維生素E缺乏引起，皮下及腹腔脂肪尤其是腎周、下腹、耳根脂肪呈黃色或黃褐色，具有魚腥味，骨骼肌、心肌呈灰白色，肝臟呈黃褐色，脂肪變性，淋巴結(jié)腫脹、水腫，腎臟呈灰紅色，胃腸黏膜出血，體溫正常，頭頸部不水腫，尿液中不能檢測到鉤體[12]。黃曲霉毒素中毒因采食被黃曲霉毒素污染的飼料引起，病豬臨床表現(xiàn)為皮膚發(fā)黃、嘔吐、腹瀉、呆立、昏睡、孕豬流產(chǎn)。剖檢有肝臟發(fā)黃、黃疸等病變，但肝臟觸片、鍍銀染色不能檢出鉤體。豬附紅細胞體病皮膚發(fā)紅，毛孔滲血、貧血、黃疸，肛門及眼周圍發(fā)青，茶色尿。剖檢一般血液稀薄、凝固不良，胸、腹、心包積水，心肌蒼白、松弛，肝臟棕黃色，膽囊膨脹，充滿膠樣膽汁，脾臟呈黑色。

如要確診可采用實驗室方法檢測，最常用的實驗室檢測方法有顯微鏡檢、鉤體分離培養(yǎng)、動物接種試驗、血清學檢測及分子生物學檢測等方法。進行鏡檢及鉤體分離培養(yǎng)時一定要選取正確的病料樣本以提高檢出率，選取未經(jīng)抗生素治療的病豬，病豬死前高熱期宜采集血液，中、后期采集中段尿液或腦脊液，病豬死亡后應1 h內(nèi)采集腎臟、肝臟，病料觸片、干燥后，姬姆薩或鍍銀染色法進行檢查，檢測時可采集尿液或血液5 mL，血液中加入10%體積的1%草酸鈉抗凝，當樣品為肝、腎時采集組織1 g，后用滅菌生理鹽水制成1∶5懸液，1 500 r/min離心5 min，取上清液再以4 000 r/min離心1 h進行集菌，取沉淀物涂片、染色、鏡檢。暗視野顯微鏡檢可見串珠樣能運動的鉤體，姬姆薩或鍍銀染色后更易分辨。分離培養(yǎng)時尿液樣品加入100 μg/mL的新霉素除菌，或無菌采集肝、腎等病料組織塊，于培養(yǎng)基管壁上研磨成糊狀，加入培養(yǎng)基中，常選用含10%血清的柯氏培養(yǎng)基，最好現(xiàn)用現(xiàn)配，4℃保存不超過1星期，28～30 ℃溫箱中培養(yǎng)，5～10 d觀察 1次，不同鉤體的生長速度不同，快的7 d即可見培養(yǎng)基渾濁，慢的可能需延長培養(yǎng)基至3個月。動物接種試驗用抗凝血2～3 mL、尿原液15 mL或10%組織懸液2～3 mL，腹腔接種于體重為150～200 g豚鼠，1 mL/只，并設(shè)置對照組，接種24 h后試驗組豚鼠發(fā)熱、厭食、皮膚黏膜及眼結(jié)膜黃染、血紅蛋白尿，一般120 h內(nèi)全部死亡。剖檢可見肝腎腫大，膀胱積茶色尿，肝腎涂片鏡檢可見鉤體。對疑似疫水的檢測可將豚鼠除毛后，浸泡其中30 min，觀察豚鼠發(fā)病者為陽性。

鉤體感染5～10 d后血清中即檢出抗體，21 d達高峰，后下降。血清學檢測是診斷豬只鉤體感染的一種重要方法，主要包括凝集溶解試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）及間接熒光抗體法等。凝集溶解試驗是鉤體血清學檢測的常用方法，也是血清分型方法，待檢血清按一定比例稀釋后，與鉤體標準菌株或當?shù)爻Ｒ娋?7℃作用2 h，暗視野顯微鏡檢，可見“小蜘蛛狀”凝集的鉤體，凝集效價1∶800以上判為陽性，凝集后菌體裂解成碎片，但血清效價高時無溶解現(xiàn)象，1∶400以下者兩周后再次采血檢測，效價增高4倍者判為陽性。ELISA適于大量血清樣品檢測，用于早期診斷，較凝集溶解試驗敏感性高，不能區(qū)分血清型，制備的包被抗原可長期保存，但我國尚無商品化檢測試劑盒。間接熒光抗體法是將鉤體標準株涂片，取待檢血清滴于玻片上，洗滌后，加抗動物球蛋白熒光抗體，鏡檢，有熒光者即為陽性，否則為陰性，但該法無型特異性，較凝集溶解試驗法能更早檢出抗體，對該病早期診斷具有重要意義。

分子生物學檢測尤其是熒光PCR檢測方法目前已經(jīng)廣泛用于多種疾病檢測。臨床應用檢測速度快、敏感性高、特異性好，對臨床病料檢測效果好。LAMP檢測方法適合基層實驗室應用，但檢測敏感性太高，有時可能會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

6 防控措施

實行自繁自養(yǎng)全進全出的飼養(yǎng)模式，減少引種，引種時隔離1個月以上，并進行相關(guān)檢測，合格后，方可并入大群飼養(yǎng)。飼喂優(yōu)質(zhì)全價配合飼料，不飼喂霉變飼料，提供干凈飲水，水線定期消毒，飲水中添加葡萄糖、維生素C等以提高豬只抵抗力。豬舍衛(wèi)生保持清潔衛(wèi)生，糞尿及墊料集中發(fā)酵處理，定期通風，降低氨氣濃度，采取一定防暑降溫及保暖措施，每周消毒2次，豬舍保持干燥，減少外來人員進場次數(shù)，進場前根據(jù)不同情況做一定時期的隔離，并按流程進行洗澡、換衣等。飼養(yǎng)管理人員嚴禁串舍，豬場清除雜草，清除積水，做好防蚊蠅等工作。鼠類在鉤體傳播過程中起著非常關(guān)鍵的作用，嚴防鼠類污染豬場水源，可在豬場周圍鋪設(shè)1 m寬尖石子路，防止鼠類進入豬場，豬場投放1%安妥、2%鼠敵等滅鼠藥或請一些專業(yè)滅鼠公司[13]。豬場內(nèi)禁養(yǎng)貓、狗等，防范外來狗和貓等進入豬場，豬場遠離牛、羊飼養(yǎng)場，設(shè)防鳥網(wǎng)或做安裝超聲波驅(qū)鳥設(shè)備。做好豬瘟等疾病的疫苗免疫接種工作提高豬群抵抗力和抗應激能力。

豬場發(fā)病后，病死豬、流產(chǎn)胎兒及墊料、糞尿等做好焚燒、深埋等無害化處理，病豬隔離、淘汰，場地、用具、設(shè)備嚴格消毒。發(fā)病早期可選用青霉素和鏈霉素進行治療，堅持連續(xù)用藥1周以消除腎臟中的鉤體。鉤體血清型眾多，康復豬對同型鉤體具有持久免疫保護作用，但能長期帶菌排菌。國外有商品化豬鉤體多聯(lián)滅活疫苗，包含犬型、感冒傷寒型、哈爾喬型、黃疸出血型、波摩娜型、伯拉弟斯拉瓦等不同血清型，免疫后能對各種不同型鉤體發(fā)揮良好免疫作用，鉤體的體液免疫起主要作用，目前尚無鉤體活疫苗。我國無商品化鉤體疫苗，進口產(chǎn)品中有犬用鉤體滅活疫苗，但只包括犬型和黃疸出血型兩種，無豬用進口鉤體疫苗。

由于鉤體是一種人獸共患病原體，也可以感染人，因此，生豬飼養(yǎng)管理人員及相關(guān)從業(yè)工作者一定要做好自身防護，避免眼、嘴唇等黏膜以及破損的皮膚接觸豬尿液，防止被感染。水田、水塘等受污染疫水在人鉤體傳播過程中也起著非常重要的作用，人們接觸疫水時一定要做好自身防護。

7 小結(jié)

鉤體廣泛存在于自然界中，種類繁多，能感染豬等多種動物，康復豬能長期帶菌排菌。在潮濕外界環(huán)境中尤其是水中長期存活，也能感染人，是一種人獸共患病原菌，因此具有重要的公共衛(wèi)生學意義。豬場飼養(yǎng)員及相關(guān)技術(shù)人員一定要重視該病的危害，做好自身防控，減少或避免與污水接觸的機會，避免被感染。

我國尚雖無豬鉤體病預防用疫苗，但鉤體對青霉素、鏈霉素等多種抗生素敏感，尤其是發(fā)病初期堅持連續(xù)用藥1周，治療效果較好。但因豬鉤體感染率高、發(fā)病率低，臨床上報道少，長期不被重視，即使發(fā)病也不能早期診斷、對癥治療，貽誤最佳治療時機，給養(yǎng)殖場造成大的損失。平時應加強豬群飼養(yǎng)管理，搞好環(huán)境衛(wèi)生，做好豬場生物安全措施，做好常規(guī)消毒，降低豬鉤體病發(fā)病概率。