□ 胡曉楠 天津市食品安全檢測技術(shù)研究院 赫云燦 天津市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢測技術(shù)研究院 郭文麗 天津市食品安全檢測技術(shù)研究院

1 引言

針對玉米赤霉烯酮的檢測已經(jīng)開發(fā)出了多種檢查方法，但是從作用效果來看，各類檢測方法都存在一定的檢測精度問題和檢測效率問題，基于此開發(fā)出了高效液相色譜-熒光法。在具體的檢測中需要通過對各類樣本的高質(zhì)量處理，并且讓各類設(shè)備都處于高效運(yùn)行狀態(tài)，確保最終結(jié)果的科學(xué)性與精確性。

2 高效液相色譜-熒光法在糧食中玉米赤霉烯酮檢測中的使用

2.1 使用原料與設(shè)備

本文選用的原料為當(dāng)前市場中常見的玉米面，以探測其中是否存在被檢測的有毒物質(zhì)。選用的設(shè)備包括玻璃纖維濾紙、石油醚、氯化鈉等各類藥品，使用的設(shè)備有高效液相色譜儀、熒光檢測儀以及色譜柱等，通過對這些儀器的應(yīng)用可以完成玉米赤霉烯酮的檢測工作，并在此基礎(chǔ)上分析玉米面是否符合當(dāng)前相關(guān)規(guī)定的要求，并在具體分析的情況下，提高對這一樣本的整體研究質(zhì)量[1]。

2.2 原料的檢測過程

原料檢測工作的第一步為玉米赤霉烯酮儲備液的制備工作，要精確轉(zhuǎn)移一定量的標(biāo)準(zhǔn)液，并且將其與乙醇溶液融合，制作成毒素儲備液，并且將其儲備在-20 ℃的冰箱中。之后稱取足量的玉米，放置在250 mL的具塞錐形瓶中，最后加入0.2 g氯化鈉，并用乙腈水溶液浸泡，將混合物震蕩5 min，之后對其進(jìn)行離心處理，并且需要對玉米溶液中的不溶性物質(zhì)進(jìn)行過濾，將獲取的溶液稀釋后，分析不同體積比對玉米赤霉烯酮的提取效率，最終通過檢測了解玉米面中的毒素含量。對于存放的干燥玉米來說，檢測中通常要對玉米進(jìn)行研磨，之后通過處理工作濾除雜物，以提高對有毒物質(zhì)的檢測精準(zhǔn)度[2]。

2.3 檢測因素的確立

檢測因素的確立需要探索不同環(huán)境以及藥品對檢測精度的影響，其中需要落實(shí)的工作為檢測過程的條件優(yōu)化工作，分析的內(nèi)容包括玉米溶解溶液的體積配比、過濾以及浸泡過程中的流速、熒光檢測過程中的條件等，通過對所有這些參數(shù)的控制和調(diào)整，以及與標(biāo)準(zhǔn)液的樣本對比，可以了解當(dāng)前的玉米質(zhì)量。

在完成具體的對比和顯色工作后，需要對相關(guān)的曲線進(jìn)行繪制和描述，在此基礎(chǔ)上了解當(dāng)前玉米是否符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。就實(shí)際的作用效果來看，該項(xiàng)工作需要從中選擇最為高效科學(xué)的檢測方法，要求所有工作人員都能對當(dāng)前的相關(guān)要求和理論體系有所了解，方能夠得到相關(guān)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)論。

3 糧食中的玉米赤霉烯酮檢測試驗(yàn)

3.1 試驗(yàn)設(shè)計

將玉米赤霉烯酮（F-2）標(biāo)準(zhǔn)品毒素、玻璃纖維濾紙、硅鎂吸附劑、石油醚與F-2免疫親和柱等作為試驗(yàn)材料，采用高效液相色譜儀、熒光檢測器、氮?dú)獯蹈蓛x和有譜超純水機(jī)等開展試驗(yàn)。其中，F(xiàn)-2標(biāo)準(zhǔn)品毒素的純度在98%以上，硅鎂吸附劑在120 ℃條件下活化2 h后使用。試驗(yàn)中采用的甲醇和乙腈材料為色譜純，其余試劑為分析純。

3.2 試驗(yàn)過程

在檢測過程中，首先制備F-2儲備液，將100 μL的F-2標(biāo)準(zhǔn)品毒素溶于1 mL的甲醇中，然后將儲備液在冰箱-20 ℃條件下儲存。在樣品處理過程中，首先從空白樣品提取2.0 g試樣，加入0.2 g氧化鈉、30 mL乙腈-水溶液，經(jīng)過振蕩和超聲提取后，過3次折疊定性濾紙和2次玻璃纖維濾紙，然后加入60 mL石油醚脫脂，在層析柱上除雜，經(jīng)過10 min離心處理后提取3 mL上層清液。將清液加入到超純水中稀釋，然后取6 mL稀釋液通過免疫親和柱，經(jīng)過5 min后收集洗脫液。脫洗液在50 ℃水浴條件下用氮?dú)獯蹈桑ㄈ莸? mL，經(jīng)過注射器濾膜后上樣檢測。此外，還要比較不同提取溶液對F-2毒素的提取效果。在高效液相色譜法檢測過程中，要對檢測條件進(jìn)行優(yōu)化。其中，流動相為乙腈-水-甲醇溶液（體積比為46∶46∶8，流速為0.6 mL/s）、乙腈-水-甲醇溶液（體積比為44∶46∶10,流速為0.8 mL/s）和水-甲醇溶液（體積比為8∶2，流速為1.0 mL/s）。熒光檢測條件分別為激發(fā)波長280 nm、發(fā)射波長為460 nm，激發(fā)波長274 nm、發(fā)射波長440 nm，激發(fā)波長23 6nm、發(fā)生波長418 nm。經(jīng)過抽濾和超聲波處理后確定的檢測條件為：流動相乙腈-水-甲醇溶液（體積比為44∶46∶10），流速為0.6 mL/s,熒光檢測條件的激發(fā)波長為274 nm、發(fā)射波長為440 nm。

3.3 試驗(yàn)結(jié)果

從試驗(yàn)檢測結(jié)果來看，得到的線性方程為y=1 416 362.246x+2 771.577（R2=1.000）。該檢測方法的檢測限為 5.7 μg/L，定量限為 19 μg/kg。從樣品回收率檢測結(jié)果來看，回收率分別為83.91%、85.21%、88.74%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.33%、4.01%、1.4%。通過對46份樣品開展檢測，得出呈陽性的樣品為44分，檢出率為95.65%，且F-2毒素含量最大值和最小值分別為 1 478 μg/kg、122 μg/kg，含量平均值為348.38 μg/kg。

4 高效液相色譜-熒光法在糧食中玉米赤霉烯酮的應(yīng)用結(jié)果

4.1 標(biāo)準(zhǔn)方程和檢測曲線

在標(biāo)準(zhǔn)方程和檢測曲線的確立與分析工作過程中，需要完成對相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，而該標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制需要使用到已經(jīng)配制完成的標(biāo)準(zhǔn)毒素樣本，通過對其的使用可以最大限度的排除由檢測環(huán)境等因素造成的干擾，并且通過對相關(guān)玉米分析結(jié)果的獲取，可以更好的了解當(dāng)前這類玉米樣本的整體質(zhì)量。

從最終的作用效果上來看，加入溶劑的體積比會對最終的結(jié)果造成一定影響，但是對于這一影響過程中的不同體積比來說，也可以從中找到與標(biāo)準(zhǔn)樣本檢測成果最為相似的內(nèi)容，本文從中選擇到的最佳檢測方案為，乙腈-水-甲醇的體積比為44∶46∶10，對樣本的檢測波長為274 nm，440 nm，檢測流動相的流速為0.6 mL/min。

4.2 回收率與精密度分析

在這一研究中需要完成對回收率的分析工作，從中選擇出最為高效優(yōu)質(zhì)的方案。在具體的研究中可以發(fā)現(xiàn)，分別向檢測的樣本玉米面中添加不同質(zhì)量的玉米赤霉烯酮毒素時，其最終的結(jié)果和檢測標(biāo)準(zhǔn)液的回收率結(jié)果有所差異，但是回收率整體較為接近，但相應(yīng)的差異值有很大區(qū)別，檢測過程中可發(fā)現(xiàn)某樣本回收率與回收理論值之間差異越小，則代表著最終檢測結(jié)果和實(shí)際的毒素含量越接近。

4.3 實(shí)驗(yàn)成果分析

通過對具體檢測結(jié)果的分析可以發(fā)現(xiàn)，在當(dāng)前市場中的各類糧食制品中，存在一定數(shù)量的玉米赤霉烯酮含量過高的現(xiàn)象，當(dāng)前和今后糧食生產(chǎn)廠家以及相應(yīng)的檢測檢疫部門要提高對這類玉米面的檢測水平和檢測深度，從而讓相應(yīng)的糧食制品可以更好的確保安全性與健康性。

5 結(jié)論

綜上所述，玉米赤霉烯酮的檢測過程中，需要采用的設(shè)備包括高效液相色譜、熒光檢測儀以及相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)材料等，材料的檢測方法為在制備好標(biāo)準(zhǔn)液的情況下，通過向被檢測玉米面中滴加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液，并對比滴加標(biāo)準(zhǔn)液后的玉米回收率和原本的玉米毒素回收率，從中選擇最為精確的結(jié)果。