葛明廣

（臨沂市精神衛(wèi)生中心檢驗(yàn)科，山東臨沂 276000）

在曲張靜脈中的細(xì)胞外基質(zhì)以及平滑肌細(xì)胞等等出現(xiàn)結(jié)構(gòu)的改變，則稱之為下肢靜脈曲張血管重塑，這是情況通常是因各種病理狀態(tài)而使得靜脈壁采取補(bǔ)償所引起的[1-2]。在人體內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）以及內(nèi)源性抑制劑基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑（TIMPs）能夠共同協(xié)調(diào)的將所有細(xì)胞外基質(zhì)成分降解掉[3]。因此，可以推測(cè)出在人體內(nèi)TIMPs/MMPs系統(tǒng)能夠在靜脈曲張血管重塑中起著非常重要的作用[4]。目前已經(jīng)清楚MMP-1能夠有效地降解Ⅰ型膠原三螺旋結(jié)構(gòu)，MMP-13能夠有效地降解Ⅲ型膠原三螺旋結(jié)構(gòu)[5]。該研究檢測(cè)在該院（2016年1月—2017年4月）接受治療的下肢靜脈曲張患者的TIMP-1、MMP-1以及MMP-13，并研究TIMPs/MMPs系統(tǒng)在治療靜脈曲張的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇在該院接受治療的下肢靜脈曲張患者（40例）為研究對(duì)象，這些患者中男女比例為1∶1（男性20例女性20例），患者年齡均在25～65歲之間，平均年齡為（39.7±3.2）歲。另外還有因外傷所造成截肢者或者靜脈作供體移植的患者作為對(duì)照組 （共有20例），且無(wú)血管疾病，這些患者中男女比例為1∶1（男性10例，女性10例），年齡均在23～62歲之間，平均年齡為（37.4±2.7）歲。兩組患者的一般資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采用的檢測(cè)方法是免疫組化檢測(cè)法，所用的試劑有DAB顯色劑、兔抗人MMP-1多克隆抗體 BA0568、通用型SP-9000試劑盒以及抗人MMP-13多克隆抗體 BA0574。首先將組織切片再用PBS沖洗，再加非特異性動(dòng)物血清溫室孵育10 min，再加第一抗體[TIMP-1(即用型)、MMP-1（1∶150）以及 MMP-13（1∶150）]，培育過(guò)夜后用PBS沖洗，加入2滴DAB溶液，在顯微鏡下觀察效果較為滿意后用水沖洗。

1.3 結(jié)果判定

陽(yáng)性對(duì)照選擇的是結(jié)腸腺癌切片，陰性對(duì)照組選擇的是PBS。當(dāng)細(xì)胞質(zhì)被染成棕黃色均勻顆粒時(shí)確定為陽(yáng)性染色，計(jì)算在十個(gè)高倍視野下的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，將等級(jí)分為四個(gè) （當(dāng)大于75%時(shí)定義為+++，當(dāng)大于50%小于75%時(shí)定義為++，當(dāng)大于25%小于50%時(shí)定義為+，當(dāng)不大于25%時(shí)定義為-）。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件計(jì)數(shù)資料采用百分率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MMP-1表達(dá)強(qiáng)度對(duì)比

通過(guò)對(duì)比曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率以及MMP-1表達(dá)強(qiáng)度發(fā)現(xiàn)，曲張靜脈萎縮組以及肥大組的MMP-1強(qiáng)度和陽(yáng)性率較正常組均有較大的提高，并且對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳細(xì)情況見表1。

表1 曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率以及MMP-1表達(dá)強(qiáng)度對(duì)比

2.2 MMP-13表達(dá)強(qiáng)度對(duì)比

通過(guò)對(duì)比曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率和MMP-13表達(dá)強(qiáng)度發(fā)現(xiàn)，曲張靜脈萎縮組以及肥大組的MMP-13強(qiáng)度和陽(yáng)性率較正常組均有較大的提高，并且對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳細(xì)情況見表2。

表2 對(duì)比曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率和MMP-13表達(dá)強(qiáng)度

2.3 TIMP-1表達(dá)強(qiáng)度對(duì)比

通過(guò)對(duì)比曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率和TIMP-1表達(dá)強(qiáng)度發(fā)現(xiàn)，曲張靜脈萎縮組以及肥大組的TIMP-1強(qiáng)度和陽(yáng)性率較正常組均有較大的提高，并且對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳細(xì)情況見表3。

3 討論

在曲張靜脈中會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞外基質(zhì)以及平滑肌細(xì)胞等主要成分出現(xiàn)結(jié)構(gòu)上的改變的現(xiàn)象稱為下肢靜脈曲張血管重塑，這種現(xiàn)象是靜脈壁為了適應(yīng)各種各樣的病理狀態(tài)所采取的補(bǔ)償措施所引起的。組織形態(tài)的塑形以及形態(tài)發(fā)生改變主要是由細(xì)胞外基質(zhì)的更新所引起的。MMPs是一種依賴Ca2+和Zn2+的一種酶，這種酶在人體中起著清除細(xì)胞外基質(zhì)的作用，這種酶通常與內(nèi)源性抑制劑TIMPs共同參與細(xì)胞外基質(zhì)的代謝[5]。通過(guò)對(duì)曲張靜脈管壁中MMPs含量改變的監(jiān)測(cè)能夠間接地了解到細(xì)胞外基質(zhì)的重塑，進(jìn)而對(duì)疾病的發(fā)展情況進(jìn)行全面的了解。

表3 對(duì)比曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率和TIMP-1表達(dá)強(qiáng)度

該研究通過(guò)對(duì)比曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率以及MMP-1表達(dá)強(qiáng)度發(fā)現(xiàn)，曲張靜脈萎縮組以及肥大組的MMP-1強(qiáng)度和陽(yáng)性率均有較大的提高，并且對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；通過(guò)對(duì)比曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率和MMP-13表達(dá)強(qiáng)度發(fā)現(xiàn)，曲張靜脈萎縮組以及肥大組的MMP-13強(qiáng)度和陽(yáng)性率均有較大的提高，并且對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；通過(guò)對(duì)比曲張靜脈萎縮組、正常大隱靜脈以及曲張靜脈肥大組的陽(yáng)性率和TIMP-1表達(dá)強(qiáng)度發(fā)現(xiàn)，曲張靜脈萎縮組以及肥大組的TIMP-1強(qiáng)度和陽(yáng)性率均有較大的提高，并且對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，對(duì)下肢靜脈曲張血管中的TIMP-1、MMP-1以及MMP-13進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)具有良好的監(jiān)測(cè)效果，值得推廣。