李智慧 蔡春江 李鈺慧*

［1 解放軍第960醫(yī)院（淄博院區(qū)）檢驗科，山東 淄博 255300；2 河北省人民醫(yī)院中醫(yī)科，河北 石家莊 050000］

乙肝病毒感染可激活細胞內(nèi)免疫系統(tǒng)的信號通路，進而引起這些信號通路的異常表達調(diào)控。NF-κB、Wnt/β-catenin、PI3K/AKT等信號通路都被發(fā)現(xiàn)與肝癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關，由這些信號通路引起的級聯(lián)反應可導致抑癌基因表達下調(diào)及癌基因的表達上調(diào)［1］。下文將展開闡述各個信號通路與乙肝肝癌的相互關系。

1 NF-κB

NF-κB是一種存在于多種細胞內(nèi)，具有多向性調(diào)節(jié)作用的核轉錄因子，參與炎癥、免疫、細胞增殖和細胞凋亡等多種生理、病理過程的基因調(diào)控，還參與腫瘤生成及其生物學行為，與肝癌發(fā)生發(fā)展密切相關，是促進肝癌生成和耐藥的中心環(huán)節(jié)。

NF-κB信號通路是一條在進化上高度保守的通路，在調(diào)節(jié)機體免疫和炎癥反應中發(fā)揮了關鍵的作用。NF-κB家族包含了5種細胞DNA-結合亞基，在靜息狀態(tài)下，NF-κB和IκB蛋白家族的抑制性亞基相結合，活性受到抑制。當受到外界病原體及炎性細胞因子刺激時，下游信號分子被激活，導致原本和NF-κB結合的IκBα發(fā)生磷酸化、泛素化而降解，使NF-κB呈游離狀態(tài)，繼而進入細胞核內(nèi)和DNA結合，促進基因轉錄［2-4］。

乙肝病毒X蛋白（HBx） 通過活化IKKα和IKKβ使IκB（NF-κB的抑制因子） 磷酸化，進而使NF-κB從胞質(zhì)復合體中釋放出來，移位到胞核，恢復其轉錄激活活性，進而轉錄激活相應靶基因。乙肝病毒X抗原通過選擇性激活信號轉導途徑NF-κB，從而在慢性乙型肝炎病毒感染期間的纖維化和肝硬化進程中起重要作用［5］。乙肝病毒X蛋白可通過激活不同的轉錄信號通路分子來增強NF-κB在細胞核的定位表達，最終可導致肝癌的發(fā)生［6］。

幾乎所有的慢性肝臟疾病，包括酒精性肝病、脂肪性肝病以及病毒性肝炎等都可見NF-κB信號通路的激活［7］。在肝臟中，NF-κB可調(diào)節(jié)肝細胞、枯否細胞及肝星狀細胞的多種重要功能。該通路的缺陷可導致肝臟的自發(fā)性損傷、肝纖維化甚至細胞惡性轉化，說明NF-κB信號通路在維持肝臟內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定及損傷修復中具有不可或缺的作用［8-9］。

2 Wnt/β-catenin

隨著對肝臟疾病的不斷深入研究，Wnt信號通路的重要性逐步被證實：涉及到肝臟發(fā)育、生長、再生、代謝、氧化應激、肝炎向肝癌的轉變、肝癌侵襲轉移等一系列的生物學行為。

β-catenin在細胞與細胞之間粘附作用以及Wnt信號通路中起著關鍵作用［10］。在正常穩(wěn)定狀態(tài)下，β-catenin通過酪蛋白激酶1α及糖原合成激酶3β（GSK3β）對絲、蘇氨酸殘基發(fā)揮磷酸化降解作用［11］；這些蛋白與軸蛋白、轉換素、APC構成了更大的復合物，并將在βcatenin的翻譯修飾中發(fā)揮重要作用，負責轉導蛋白的識別及泛素化。當Wnt信號與其受體結合時，Wnt/β-catenin信號通路被激活，進而導致GSK3β失活，這會引發(fā)βcatenin去磷酸化而從β-catenin蛋白復合體中釋放，βcatenin隨后發(fā)生核易位與HMG盒包含的DNA結合蛋白TCF/LEF家族成員結合，從而控制多種靶基因的轉錄［12］。

細胞遷移和侵襲是腫瘤轉移的關鍵步驟，而復發(fā)和轉移是肝癌患者死亡的主要原因。研究顯示W(wǎng)nt/βcatenin信號通路表達上調(diào)可促進肝癌發(fā)生并增強肝癌細胞侵襲性［13］；而相反，抑制Wnt/β-catenin信號通路的表達會抑制肝癌細胞株的遷移能力［14］。MMP7是Wnt/β-catenin信號通路中β-catenin的最重要的靶基因，MMP7對腫瘤細胞的侵襲及轉移起了關鍵性的作用，最近的多個不同研究結果均顯示MMP7在肝細胞癌的細胞及組織中均呈過表達。越來越多的研究證據(jù)表明抑制Wnt/β-catenin信號通路將是肝癌治療的一個重要分子靶點［15］。

3 IFN （interferon， IFN）

IFN大約是在60多年前被發(fā)現(xiàn)的，它被認為是先天免疫中最關鍵的抵御病毒感染的細胞因子。在很多年以來，IFN作為治療HBV的重要原因就在于它激活了抗病毒基因的表達，而這些抗病毒基因在病毒復制的每個階段中都發(fā)揮著重要的作用。

START通過調(diào)JAK-START信號通路和干擾素刺激基因（ISG）的表達來調(diào)節(jié)IFN介導的對乙肝病毒的抗病毒活性［16］。IFN產(chǎn)生并分泌到細胞外后，通過各自對應的受體進一步發(fā)揮各自相應的功能。當IFN與受體相結合后，會招募酪氨酸激酶（JAK）磷酸化干擾素受體，磷酸化的干擾素受體進一步招募并磷酸化STATs，STATs磷酸化后形成異源二聚體并與IFR9—起組成ISG3入核后通過ISRE（IFN stimulated response elements）調(diào)控ISGs的表達；或者磷酸化的STATs以同源二聚體的形式形成干擾素活化因子（IFNγ activation factor）通過GAS啟動子元件調(diào)控ISGs的表達。干擾素通過干擾素受體激活下游STATs從而激活幾百種干擾素刺激基因（ISGs）的表達。有研究表明STAT的異常激活是參與肝癌浸潤轉移的一條重要的信號傳導通道，可能成為肝癌侵犯轉移和預后的有效靶標［17］。因此，抑制該信號通路的信號轉導可能成為防治肝癌的潛在途徑。

4 PI3K-AKT

PI3K是磷脂激酶家族中的一個重要成員，具有脂類激酶活性和蛋白激酶活性，PI3K活化后可調(diào)控許多跟細胞代謝、凋亡、增殖和分化的相關蛋白，與腫瘤的生長、患者的預后及治療關系密切。PI3K一旦被激活，其活化底物作為第二信使，結合并激活多種細胞內(nèi)的靶蛋白，通過磷酸化激活Akt，最終調(diào)節(jié)細胞的增殖、分化及遷移等。

mTOR是Akt信號分子下游雷帕霉素作用的靶點，活化的Akt可以直接磷酸化激活mTOR［18］。激活的磷酸化mTOR可以有效的調(diào)控其兩個下游分子，核糖體S6蛋白激酶（S6K）和真核生物啟動因子4E結合蛋白1（4EBP1）。PI3K/Akt/mTOR信號受到抑癌基因抑PTEN的負反饋調(diào)節(jié)，其通過促進PIP3去磷酸化生成PIP2，從而實現(xiàn)對PI3K/Akt/mTOR信號通路的作用，達到抑制細胞增殖和促進細胞凋亡的目的［19］。有研究表明慢性乙型肝炎患者存PI3K信號通路受抑制現(xiàn)象［20］，流行病學調(diào)查顯示，約40% 的肝癌患者存在Akt的突變現(xiàn)象［21］。Liu等［22］研究表明，肝癌細胞中Akt的表達明顯高于正常肝臟組織。研究表明lncRNA NR027113能夠通過PTEN/PI3K/AKT信號途徑來促進肝癌細胞的增殖侵襲和轉移［23］。因此，PI3K/AKT信號通路可能為肝癌的治療提供新的靶點。

5 Notch

Notch受體是一種單通道跨膜蛋白，進化上都具有高度保守性。所有的同源Notch受體均由胞外區(qū)（NEC）、跨膜區(qū)（NTM）和胞內(nèi)區(qū)（NICD/ICN） 組成。

成熟Notch受體與配體結合后，被ADAM金屬蛋白酶家族的蛋白切割為2個片段，釋放部分胞外片段，跨膜區(qū)（NTM） 被早老素依賴性的γ-分泌酶水解，形成可溶性胞內(nèi)區(qū)（NICD）并轉移至核內(nèi)。進入細胞核后與轉錄因子CSL結合，形成NICD/CSL轉錄激活復合體，激活HERP、HES、HEY等，轉錄抑制因子家族的靶基因，從而發(fā)揮作用［24］。

同時，Notch信號通路還受到泛素化相關蛋白及自我反饋的調(diào)節(jié)。Notch信號通路在調(diào)節(jié)多細胞機體細胞凋亡和增殖方面也發(fā)揮重要作用，研究表明，TNF信號能夠激活Notch2并使其表達上調(diào)，然后通過對控制凋亡的關鍵調(diào)節(jié)劑進行調(diào)節(jié)從而誘發(fā)細胞凋亡。Fan等［25］研究表明在肝細胞肝癌中Notch-1的表達明顯上調(diào)。Gao等［26］把肝細胞癌組織細胞與癌旁組織相比，發(fā)現(xiàn)癌組織胞質(zhì)Notch1和胞核Notch4高表達。研究［27］發(fā)現(xiàn)在晚期肝癌階段，與DNA復制、修復和細胞周期相關的基因表達上調(diào)，而Notch信號通路在調(diào)節(jié)細胞周期進展中有重要作用［28］。Notch信號通路是少數(shù)反復調(diào)節(jié)細胞增殖和凋亡的信號傳導系統(tǒng)，Notch信號通路與細胞的分化、增殖、凋亡、粘附及表皮細胞向間質(zhì)轉化有密切聯(lián)系，對大多數(shù)組織的正常發(fā)育至關重要。

6 展望

我國是乙肝病毒感染大國，乙肝及肝癌的發(fā)病率一直居高不下。細胞因子失衡造成眾多信號通路的激活可進一步促進細胞的增殖、侵犯和轉移，促進乙肝的惡性轉化。因此，深入研究乙肝及肝硬化發(fā)生癌變的機制對的早期診斷和臨床治療具有重要意義，而針對乙肝相關疾病發(fā)生的信號通路中重要分子的靴向治療將是未來肝病治療的發(fā)展方向。