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基于宏條碼技術(shù)對(duì)校園足球運(yùn)動(dòng)員鞋腔內(nèi)真菌組成的多樣性分析

2019-03-14 02:11:02梁樺梁竹張芝元鄭歡韓燕峰梁宗琦
關(guān)鍵詞:足球隊(duì)酵母群落

梁樺 梁竹 張芝元 鄭歡 韓燕峰 梁宗琦

1 貴州大學(xué)體育學(xué)院(貴陽 550025)

2 成都體育學(xué)院(成都 610041)

3 貴州大學(xué)真菌資源研究所(貴陽 550025)

近些年來,由于城市化加速和體育健身設(shè)施的廣泛使用,以及肥胖和人口老年化,廣譜抗生素、免疫抑制劑、化療、放療的應(yīng)用等原因,由紅色毛癬菌Trichophytonrubrum,指/趾間毛癬菌T.interdigitale和絮狀表皮癬菌Epidermophyton floccosum引起的普通人群皮膚真菌病上升,各種引起深部感染的機(jī)會(huì)性真菌病原所致的發(fā)病率也增高[1-3]。此外,在青少年學(xué)生中皮膚感染的發(fā)生及流行,以及一些接觸性的體育運(yùn)動(dòng)項(xiàng)目及設(shè)施真菌病原的存在及擴(kuò)散也受到了廣泛關(guān)注[4-6]。D?gen調(diào)查了土耳其年齡在16~18歲男女學(xué)生參加的15個(gè)體育項(xiàng)目的皮膚真菌感染情況,結(jié)果表明不少男孩都檢查出了皮膚病原真菌,紅色毛癬菌Trichophyton rubrum、斷發(fā)毛癬菌T.tonsurans和指間毛癬菌T.interdigitale[1]。美國在國家層面上曾對(duì)100所高中,參與9種體育運(yùn)動(dòng)(包括男、女足球)學(xué)生的皮膚真菌感染進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查,為提高對(duì)學(xué)校體育衛(wèi)生工作的認(rèn)識(shí)和采取預(yù)防措施提供科學(xué)根據(jù)[7]。

近幾年來,我國青少年校園足球運(yùn)動(dòng)有了長(zhǎng)足的發(fā)展。為了保障校園足球運(yùn)動(dòng)持久、安全和健康發(fā)展,有少數(shù)研究者已關(guān)注到了運(yùn)動(dòng)員微生物感染的安全問題,但其研究多是針對(duì)鞋墊及鞋面鞋材的篩選,以提高對(duì)病原菌的抑制作用[8-9]。關(guān)于我國校園足球運(yùn)動(dòng)員鞋腔內(nèi)富集真菌物種的多樣性及致病性風(fēng)險(xiǎn)則未見報(bào)道。

宏條碼技術(shù)(metabarcoding)是使用通用引物對(duì)環(huán)境樣品或生物混合樣品中生物總DNA中一段具有鑒定信息的基因片段進(jìn)行規(guī)?;瘮U(kuò)增、高通量測(cè)序、獲得可操作分類單元(operational Taxonomic Unit,OTU),再通過與公認(rèn)分類DNA條形碼數(shù)據(jù)庫比對(duì),從而快速實(shí)現(xiàn)物種鑒定的系統(tǒng)分析技術(shù)。此技術(shù)已在物種監(jiān)測(cè)、生物多樣性分析等生態(tài)學(xué)領(lǐng)域中得到很好的應(yīng)用[10-11]。應(yīng)用這種方法分析校園足球隊(duì)運(yùn)動(dòng)員鞋腔內(nèi)真菌群落組成情況,有利于揭示足球鞋鞋腔內(nèi)真菌群落組成的多樣性,以及可能存在的人類潛在真菌病原,為改善校園足球運(yùn)動(dòng)的衛(wèi)生教育和管理提供科學(xué)依據(jù)。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 樣本的采集

為觀察了解不同地區(qū)和不同年齡段青少年校園足球隊(duì)運(yùn)動(dòng)員足球鞋鞋腔內(nèi)存在的真菌物種多樣性及衛(wèi)生風(fēng)險(xiǎn)性上的差異,我們分別選取貴州省黔北地區(qū)某縣的2所中學(xué),黔中地區(qū)的1所中學(xué)和貴陽地區(qū)1所大學(xué)的校園足球隊(duì)隊(duì)員,對(duì)其鞋腔進(jìn)行采樣。球隊(duì)代碼分別是:

Qc:對(duì)照組:黔北某縣A、B兩中學(xué)未參加校園足球隊(duì)的一般學(xué)生,每校采樣15人。

Q1:黔北某縣A中學(xué)校園足球隊(duì)(以下簡(jiǎn)稱Q1隊(duì))。隊(duì)員年齡為16~18歲,高中生,21人,足球訓(xùn)練時(shí)間2~3年,每周2~3次,每次一般在1.5個(gè)小時(shí)左右。采樣地區(qū)為亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候,年平均氣溫為13.1~13.5℃,年平均相對(duì)濕度為85%。

Q2:黔北某縣B中學(xué)校園足球隊(duì)。年齡及訓(xùn)練時(shí)間與Q1隊(duì)基本相同,15人。

Q3:黔中地區(qū)某中學(xué)的14~16歲初中生和17~19歲高中生組成的混合樣(30人)。這些學(xué)生訓(xùn)練時(shí)間都在5年以上,每周5次左右,每次訓(xùn)練時(shí)間不少于1.5個(gè)小時(shí),現(xiàn)為校隊(duì)主力隊(duì)員。

Q4:貴陽地區(qū)某大學(xué)足球?qū)_x班學(xué)生(24人),平均年齡20歲,每周專選課3次,每次2小時(shí),此外平時(shí)還參加課外踢球2次左右。采樣地區(qū)年平均氣溫為15.3°C,年平均相對(duì)濕度為78%。

采樣方法:用無菌水將醫(yī)用脫脂棉棒濕潤(rùn),擦洗被選球隊(duì)隊(duì)員及對(duì)照組學(xué)生球鞋鞋腔前部數(shù)次。將獲得的取樣棉棒分別裝入無菌的塑料袋中,每支校園足球隊(duì)及對(duì)照組分別裝袋。取樣袋帶回實(shí)驗(yàn)室后,無菌操作剝離出采樣的脫脂棉,剪碎混合成混合樣,4°C冰箱保存,送檢。

1.2 樣品總DNA提取

使用常用于土壤中總DNA提取的試劑盒(FastDNA?SPIN Kit for Soil),按說明書操作程序進(jìn)行真菌菌絲體裂解、裂解液均質(zhì)化及蛋白質(zhì)增溶、總DNA的純化。不同樣品純化后的DNA濃度經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),其檢測(cè)參數(shù)為:濃度1%,電壓5 v/cm,時(shí)間30 min。

1.3 PCR擴(kuò)增及測(cè)序

PCR試驗(yàn)采用TaKaRa rTaq DNA 多聚酶,20 μl反應(yīng)體系:10×Buffer 2 μl,2.5 mM dNTPs 2 μl,正向 引 物ITS1F,CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA(5 μM)0.8 μl,反向引物2043R,GCTGCGTTC TTCATCGATGC(5 μM) 0.8 μl,rTaq 多聚酶 0.2 μl,BSA 0.2 μl,模板DNA 10 ng,而后補(bǔ)ddH2O至20 μl。PCR儀:ABI GeneAmp?9700型。PCR反應(yīng)參數(shù):a.1×(3 mins,95°C);b.35×(30 s,95°C;30 s 55°C;45 s 72°C);c.10 mins 72°C,10°C保存?zhèn)溆谩?/p>

PCR產(chǎn)物經(jīng)上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司(www.majorbio.com),Illumina Hiseq平臺(tái)進(jìn)行高通量測(cè)序,而后進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和生物多樣性分析[12]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

1.4.1 原始數(shù)據(jù)處理

經(jīng)Miseq測(cè)序得到的雙端序列數(shù)據(jù),根據(jù)PE reads之間的overlap關(guān)系,將成對(duì)的reads拼接成一條序列,同時(shí)對(duì)reads的質(zhì)量和拼接效果進(jìn)行質(zhì)控過濾,再根據(jù)序列首尾兩端的barcode和引物序列區(qū)分樣品得到的有效序列,并校正序列方向。全部原始序列數(shù)據(jù)經(jīng)過濾處理優(yōu)化,然后去除嵌合體序列后,進(jìn)行OTU聚類分析,其代表序列作分類學(xué)分析。

1.4.2OTU聚類及注釋

用Qiime平臺(tái)(http://qiime.org/scripts/assign_taxonomy.html)將序列按相似度0.97的序列聚類為OTU,選取每個(gè)OTU最長(zhǎng)的序列作為代表序列。將ITS-rDNA基因的OTU代表序列與Unite(Release 7.0 http://unite.ut.ee/index.php)真菌數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對(duì),獲得每個(gè)OTU的分類學(xué)信息?;趖axsummarya文件夾中的數(shù)據(jù)表,利用R語言工具,或在EXCEL中繪制不同水平上的物種組成百分比堆積圖及Venn圖。

1.4.3 α 多樣性分析

用 mothur version v.1.30.1(http://www.mothur.org/wiki/SchlossSOP#Alphadiversity)指數(shù)分析程序包對(duì)各樣本的Shannor-Wiener和Simpson多樣性指數(shù)進(jìn)行計(jì)算。

1.4.4 聚類分析

根據(jù)物種列表,使用R軟件R-3.0.3 for Windows程序包,將屬-水平上的分類信息進(jìn)行聚類分析并繪制Heatmap圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同校園足球隊(duì)員與非隊(duì)員間運(yùn)動(dòng)鞋內(nèi)真菌數(shù)量的差異

瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果顯示:Q1和Q2兩支球隊(duì)總DNA濃度分別為17.8 ng/μg和10.4ng/μg,而對(duì)照組Qc僅分別為7.1 ng/μg和2.9 ng/μg,在電泳圖中不能清楚顯示(圖1),表明對(duì)照組Qc鞋腔內(nèi)存在的真菌DNA量很低,以致不能做后續(xù)分析。Q1至Q4四支球隊(duì)則共獲得了有效序列133302條,它們分別的序列數(shù)及相對(duì)豐度表明4支校園足球隊(duì)球鞋內(nèi)存在真菌物種的多樣性(圖2)。

圖1 校園足球隊(duì)與對(duì)照組鞋腔真菌總DNA電泳圖

圖2 不同足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌總序列數(shù)及其百分?jǐn)?shù)

2.2 不同校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌群落組成的差異分析

從4個(gè)校園足球隊(duì)隊(duì)員球鞋鞋腔內(nèi)共獲得子囊菌門(Ascomycota)、擔(dān)子菌門(Basidiomycota)和類原生動(dòng)物門(Rozellomycota)的12綱,16目,28科,40屬。在目的水平上可歸類為10群(相對(duì)豐度較低的目歸入other之中)(圖3)。Q1、Q2、Q3和Q4四支校園足球隊(duì)中這些類群的組成及相對(duì)豐度差異明顯。在Q4大學(xué)生球隊(duì)中,絲孢酵母目Trichosporonales是優(yōu)勢(shì)類群,相對(duì)豐度在95%以上。此目中的絲孢酵母屬Trichosporon廣泛分布于自然界,雖有的成員能通過累積油脂而凈化環(huán)境,但有的成員侵襲人類[13-14]。而Q3足球隊(duì)的第一優(yōu)勢(shì)類群則是鎖擲酵母目Sporidiobolales。已知此目?jī)?nèi)的一些成員,如赭色擲孢酵母Sporobolomyces salmonicolor能引起皮膚感染、眼內(nèi)炎、哮喘、過敏性肺泡炎和鼻炎等多種疾?。╤ttps://en.wikipedia.org/wiki/)。次優(yōu)勢(shì)類群銀耳綱的囊擔(dān)菌目Cystobasidiales,也包含有人類的機(jī)會(huì)病原,一些隱球酵母Cryptococcusspp.也包含在此目中。隨后的優(yōu)勢(shì)類群依次是銀耳目和酵母菌目。在Q3球隊(duì)中絲孢酵母目所占比例很低。在球隊(duì)Q1和Q2中,酵母菌目占主要優(yōu)勢(shì),相對(duì)豐度分別達(dá)到約83%和28.5%,隨后的優(yōu)勢(shì)類群目在兩個(gè)隊(duì)中明顯有別,前者是座囊菌綱Dothideomycetes中一個(gè)未定目和散囊菌目Eurotiales,其相對(duì)豐度分別為23%和20%,而后者的優(yōu)勢(shì)目則分別是座囊菌綱中一個(gè)未定目和絲孢酵母目,但相對(duì)豐度均未達(dá)到5%。可見,四所學(xué)校足球隊(duì)員鞋腔內(nèi)真菌物種在目水平上組成的多樣性有明顯差異。Q4大學(xué)生球隊(duì)鞋腔內(nèi)的優(yōu)勢(shì)類群?jiǎn)我弧?/p>

圖3 不同球隊(duì)隊(duì)員鞋腔內(nèi)真菌在目水平上的群落組成及其相對(duì)豐度

各球隊(duì)在屬的水平上,真菌的組成和相對(duì)豐度上均表現(xiàn)出明顯差異(圖4)。黔北地區(qū)的兩個(gè)中學(xué)校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌組成,相對(duì)豐度>1%的都有6個(gè)屬,但兩隊(duì)的優(yōu)勢(shì)類群則明顯不同。Q1隊(duì)的優(yōu)勢(shì)屬依次是邁耶爾霉Meyerozyma、一個(gè)座囊菌綱的未定屬、曲霉屬Aspergillus、交鏈孢屬Alternaria、隱球酵母屬Cryptococcus和絲孢酵母屬Trichsporon。Q2隊(duì)的真菌組成與Q1隊(duì)一致,但優(yōu)勢(shì)屬邁耶爾霉Meyerozyma的相對(duì)豐度卻高達(dá)81.82%,其它的屬相對(duì)豐度較接近,均未達(dá)到10%。黔中地區(qū)混合隊(duì)Q3在屬水平上的真菌組成,占優(yōu)勢(shì)的為紅酵母屬Rhodotorula、谷氏酵母屬Guehomyces、隱球酵母,其它相對(duì)豐度較低的還有銀耳目Tremellales中的一個(gè)屬和邁耶爾酵母屬。這些分屬于各球隊(duì)中的真菌大多數(shù)能引起人類的疾病[15-17]。大學(xué)生球隊(duì)Q4的真菌組成較單一,其最顯著的優(yōu)勢(shì)屬是絲孢酵母屬Trichsporon,相對(duì)豐度高達(dá)97.1%。這個(gè)屬的一些成員近年被報(bào)道存在于人類的微生物組(microbiome)中,能從糞便、健康皮膚和過敏性皮炎患者中分離到,它們所引起的皮膚病的發(fā)病率顯著上升[13]。Q4球隊(duì)的第二優(yōu)勢(shì)屬也是與人類皮膚感染有關(guān)的邁耶爾屬[14,16]。大學(xué)生足球隊(duì)成員罹患足部癬菌病的風(fēng)險(xiǎn)明顯。

圖4 不同球隊(duì)隊(duì)員鞋腔內(nèi)真菌在屬水平上的群落組成及其相對(duì)豐度

2.3 各校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌群落的α 多樣性分析

α多樣性分析能展示群落或樣本中物種的多樣性,其涵義一是物種的數(shù)目和豐富度,二是種的均勻度,即全部物種個(gè)體數(shù)的分配狀況。Shannon和Simpson是兩個(gè)描述多樣性的常用指數(shù)。Shannon指數(shù)越高說明生物多樣性越豐富,而Simpson指數(shù)越高則側(cè)重表明群落中物種個(gè)體數(shù)的均勻度越差。圖5顯示,混合組建的Q3球隊(duì)生物多樣性最豐富,Q1球隊(duì)次之,大學(xué)生球隊(duì)Q4的物種多樣性最低。球隊(duì)Q4的Simpson指數(shù)最高,說明其群落的組成單一,均勻度差。球隊(duì)Q2次之,球隊(duì)Q1和Q3的Simpson指數(shù)相近。

圖5 不同校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌群落的α多樣性差異

2.4 各校園足球隊(duì)球鞋腔內(nèi)真菌群落組成的Venn圖分析

Venn圖可用于展現(xiàn)各球隊(duì)共有和獨(dú)有的物種數(shù)目,直觀顯示物種組成相似性及重疊情況。四支校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌組成的Venn圖結(jié)構(gòu)顯示,在屬的水平上它們自身特有的類群有相當(dāng)差異(圖6)。他們有6個(gè)共有屬(圖7):分別是邁耶爾屬M(fèi)eyerozyma(相對(duì)豐度40.07%),絲孢酵母屬Trichosporon(29.48%),紅酵母屬Rhodotorula(11.75%),座囊菌綱Dothideomycetes中一未定屬(10.93%),隱球酵母屬Cryptococcus(6.53%),小大衛(wèi)霉科Davidiellaceae中一未定屬(1.42%)。這些共有屬中的多數(shù)成員也都是人類的病原真菌[13,18]。

圖6 不同球隊(duì)球鞋內(nèi)真菌群落的Venn圖

圖7 不同球隊(duì)球鞋內(nèi)共有真菌屬在屬水平上的相對(duì)豐度

各球隊(duì)的特有種各不相同。Q1和Q2足球隊(duì)的特有屬較少,多是來自土壤和植物,僅布勒擔(dān)孢酵母屬

Bulleromyces可能與人類感染有關(guān)。Q3和Q4的特有種多數(shù)也是土壤與植物內(nèi)生真菌,其中的紅酵母屬Rhodosporidium和馬拉色菌目Malasseziales中的一些成員對(duì)人類有潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)[19]。

2.5 各校園足球隊(duì)球鞋鞋腔內(nèi)真菌群落組成的相似性

Heatmap圖可對(duì)球隊(duì)鞋腔內(nèi)物種組成進(jìn)行相似性比較。從圖8可看出,球隊(duì)Q1和Q2首先聚類,顯示了它們明顯的相似性,而后它們?cè)倥c球隊(duì)Q3相聚,最后是球隊(duì)Q4。Heatmap圖表明,在真菌屬的水平上,大學(xué)生年齡段球隊(duì)(Q4)與其它3個(gè)中學(xué)生年齡段球隊(duì)(Q1,Q2和Q3)間真菌群落組成的相似性較低,具有明顯的差異性。

圖8 不同校園足球隊(duì)球鞋腔內(nèi)屬水平上的Heatm ap圖

3 討論

足球運(yùn)動(dòng)是一項(xiàng)競(jìng)技性和運(yùn)動(dòng)量較大的體育活動(dòng)。在活動(dòng)過程中,運(yùn)動(dòng)者的腳掌在足球鞋腔內(nèi)能分泌大量汗液,這為真菌的生長(zhǎng)不僅提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),同時(shí)也創(chuàng)造了適宜生長(zhǎng)的濕度條件。我們的調(diào)查研究已發(fā)現(xiàn),在未參加校園足球運(yùn)動(dòng)的對(duì)照組學(xué)生中,他們的鞋腔內(nèi)真菌的DNA極少,而被測(cè)試的幾支校園足球隊(duì)的隊(duì)員鞋腔內(nèi)則能提取相當(dāng)量的真菌總DNA及序列數(shù)。進(jìn)一步的深入分析顯示,這些來自不同地區(qū)和年齡段的青少年校園足球隊(duì)員的鞋腔內(nèi),其真菌群落組成多樣,且相對(duì)豐度也各不相同。

特別值得關(guān)注的是,Venn圖分析顯示,全部4個(gè)被檢測(cè)球隊(duì)的鞋腔內(nèi)的共有物種中,皆存在一些人類潛在的病原真菌。人類致病真菌通常可分為淺部真菌和深部真菌。前者多侵染皮膚、毛發(fā)等表淺部位,全世界有20%~25%的人群深受其苦[2];后者侵犯皮下組織、內(nèi)臟器官等,可經(jīng)血液、淋巴傳播引起播散性真菌感染[17,20]。淺部致病真菌最常見的有:(1)毛癬菌屬Trichophyton。如與人類的頭癬、甲癬和皮膚癬有關(guān)的紅色毛癬菌T.rubrum,它是全球最常見皮膚真菌病的病原。斷發(fā)毛癬菌T.tonsurans則在競(jìng)技運(yùn)動(dòng)員中引起頭癬和體癬[1,19]。(2)小孢子菌屬M(fèi)icrosporum。如犬小孢子菌M.canis和石膏樣小孢子菌M.gypseum,它們常與人類的皮膚和毛發(fā)感染有關(guān)。(3)皮癬菌屬Epidermophyton。如能引起股癬、足癬、體癬和甲癬的絮狀皮癬菌E.floccosum[1-2]。我們的分析揭示了4支校園足球隊(duì)球鞋鞋腔內(nèi)共存的6屬真菌與上述常見的淺部致病性真菌不完全相同。它們?cè)谛粌?nèi)的豐度依次是,邁耶氏酵母屬M(fèi)eyerozyma>絲孢酵母屬(毛孢子菌)Trichosporon>紅酵母菌屬Rhodotorula>座囊菌綱Dothideomycetes中一未定屬>隱球酵母屬Cryptococcus>和大衛(wèi)霉科Davidiellaceae中一未定屬。其中,邁耶氏酵母屬M(fèi)eyerozyma近些年在臨床上被分離出的幾率明顯增加。它造成的淺部感染可出現(xiàn)膿包、肉芽腫和甲真菌?。簧畈扛腥究汕忠u有基礎(chǔ)性疾病的易感者內(nèi)臟[16,21,22]。長(zhǎng)期以來,絲孢酵母屬Trichosporon常被誤認(rèn)為是污染菌。事實(shí)上,人類淺表感染病原的10%~40%可能是由此菌所引起,其實(shí)它們是人類微生物組的成員之一[13,22]。研究發(fā)現(xiàn),座囊菌綱Dothideomycetes中的一些屬,如Cladophialophora,Ochroconis和香港霉屬Hongkongmyces的成員,紅酵母、隱球酵母也都是能感染人類和動(dòng)物的機(jī)會(huì)病原。它們能引起淺表感染、過敏性肺炎和侵入性疾病等[13,18,23]。這些在球隊(duì)運(yùn)動(dòng)員鞋腔內(nèi)隱藏的潛在病原真菌,對(duì)運(yùn)動(dòng)者所造成的運(yùn)動(dòng)安全風(fēng)險(xiǎn)和公共衛(wèi)生風(fēng)險(xiǎn)值得關(guān)注。

皮膚真菌病原菌可通過兩種途徑感染和傳播:其一,通過人與人或與動(dòng)物、土壤直接接觸;其二,間接地通過媒介,如被污染的設(shè)施、設(shè)備(如泳池、摔跤墊、體操床墊,足球鞋等)接觸被感染[2,5,24]。研究已發(fā)現(xiàn),不同年齡段的個(gè)體對(duì)病原感染的敏感性不完全相同,在31~60歲的成人腳癬中皮膚真菌的檢出率最高,小孩很少發(fā)病;男士通常比女士發(fā)病高;礦工、士兵以及摔跤和柔道、馬拉松、及足球運(yùn)動(dòng)員發(fā)病檢出率高于普通人群。在地區(qū)差別上,市區(qū)比郊區(qū)高,基于全球的尺度上,在亞洲和美國須癬毛癬菌T.mentagrophytes是引起腳癬和灰指甲的最常見病原,但在非洲卻很少發(fā)現(xiàn)[2,5,25]。我們的研究觀察到,黔中中心城市的Q3球隊(duì),鞋腔內(nèi)真菌物種的多樣性明顯高于黔北某縣城的2個(gè)球隊(duì)。Heatmap圖的進(jìn)一步比較分析表明,黔北地區(qū)的Q1和Q2兩支球隊(duì)的相似性大于黔中地區(qū)的Q3足球隊(duì)。這在一定程度上也顯示了地域的差異。Heatmap圖也展示了大學(xué)生年齡段的Q4足球隊(duì)與黔北地區(qū)以及黔中地區(qū)的中學(xué)生年齡段足球隊(duì)的相似性小,其差異性更明顯。Nenoff等研究報(bào)道[19],水解酶和角蛋白酶是紅色毛癬菌的主要毒力因子。黔中地區(qū)Q4大學(xué)生球隊(duì)成員鞋腔內(nèi)絲孢酵母Trichosporon相對(duì)豐度高達(dá)97.1%,其原因可能與這些隊(duì)員年齡比中學(xué)生大,腳部的角質(zhì)化程度相對(duì)高,進(jìn)而有選擇性地富集了嗜角蛋白類真菌,從而提高了人體微生物組中絲孢酵母成員的相對(duì)豐度[13,26]。

本研究基于高通量測(cè)序及生物信息學(xué)云平臺(tái)分析,揭示了校園足球隊(duì)隊(duì)員球鞋腔內(nèi)真菌群落組成的多樣性較豐富,且其中不少是可感染人體的潛在真菌病原。這些研究結(jié)果將有助于監(jiān)測(cè)青少年校園足球隊(duì)隊(duì)員及相關(guān)人群中可能發(fā)生的真菌感染及擴(kuò)散,為支持和推動(dòng)我國校園足球運(yùn)動(dòng)持續(xù)、健康發(fā)展,為有關(guān)主管部門和學(xué)校在進(jìn)行衛(wèi)生安全教育、管理及制定控制真菌性疾病感染、傳播的措施方面提供了科學(xué)依據(jù)。

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