薛劍春

【摘要】目的：探討3M紙片法在水質(zhì)檢驗(yàn)工作中的應(yīng)用效果。方法：隨機(jī)選取本地區(qū)集中式供水、二次供水樣品200份進(jìn)行研究，并隨即將他們分為兩組進(jìn)行水質(zhì)檢驗(yàn)：3M紙片組和平皿計(jì)數(shù)組，比較兩種檢驗(yàn)方法檢測(cè)水中細(xì)菌準(zhǔn)確度和標(biāo)準(zhǔn)菌株總數(shù)。結(jié)果：3M紙片法檢測(cè)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的結(jié)果明顯優(yōu)于平皿計(jì)數(shù)法組，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;水質(zhì)檢驗(yàn)中3M紙片法準(zhǔn)確度明顯優(yōu)于平皿計(jì)數(shù)法，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：3M紙片法在水質(zhì)檢驗(yàn)中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，檢出率高、操作簡(jiǎn)便，值得在推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】3M紙片;水質(zhì)檢驗(yàn);效果

水是人們賴以生存的主要物質(zhì)之一，水質(zhì)好壞直接關(guān)系著人們身體健康狀況，所以必須要保障人們?nèi)粘Ｉ钏|(zhì)安全。但是，隨著工業(yè)社會(huì)的發(fā)展和人類文明的進(jìn)步，環(huán)境污染成為困擾人類發(fā)展的重要問題，水質(zhì)安全問題也引起人們高度關(guān)注。因此要要做好水質(zhì)檢驗(yàn)工作，過去人們往往采用平皿計(jì)數(shù)法進(jìn)行水質(zhì)檢驗(yàn)，這種檢驗(yàn)方法雖然有一定效果，但是操作復(fù)雜、結(jié)果出錯(cuò)率高。為了提高水質(zhì)檢驗(yàn)準(zhǔn)確率，人們研制了3M紙片檢驗(yàn)法，這種檢驗(yàn)方法通過在細(xì)菌生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)成分中附加著色劑，操作簡(jiǎn)單，容易判讀，應(yīng)用價(jià)值較高。本次研究特對(duì)這兩種水質(zhì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行分析，并作如下報(bào)告：

1資料和方法

1.1檢驗(yàn)材料

隨機(jī)抽取本地區(qū)集中式供水、二次供水樣品200份最為研究對(duì)象，其中二次供水樣品110份，集中式供水90份。平皿計(jì)數(shù)法采用一次性無菌培養(yǎng)皿（生產(chǎn)廠家：青島金典生活器材有限公司）進(jìn)行檢驗(yàn)，營(yíng)養(yǎng)瓊脂（生產(chǎn)廠家：青島高科園海博生物有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20090707）;3M紙片法的材料由3M有限公司提供，生產(chǎn)批號(hào)：20100219，標(biāo)準(zhǔn)菌株（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌）由北京路橋技術(shù)有限責(zé)任公司提供。

1.2方法

首先將培養(yǎng)好的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌制作成菌懸液，其濃度為：10（9）/ml，然后將菌懸液依次10倍稀釋至10（1）/ml、10（2）/ml，兩種檢驗(yàn)方法的標(biāo)準(zhǔn)菌株均做8個(gè)、6個(gè)平行樣，水樣檢測(cè)每種方法均做兩個(gè)平行樣，并取其平均數(shù)。將樣本分別接種于3M紙片中和平皿中，在37攝氏度下有氧培養(yǎng)1d。

3M紙片法檢驗(yàn)：這種檢驗(yàn)方法的全過程均需要在嚴(yán)格無菌條件下操作，首先使用試管抽取充分?jǐn)嚢璧?ml水樣，然后將其滴注于紙片中央?yún)^(qū)，將上層膜直接滴注落下，以防氣泡的產(chǎn)生，然后將壓板凹面朝下放置于上層膜中央位置，再將其輕柔的按下，將標(biāo)本液均勻的滴注在圓形培養(yǎng)基表面，將壓板太高，并放置1min，然后將其放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。

平皿法檢驗(yàn)：這種檢驗(yàn)方法的全過程也是嚴(yán)格在無菌操作環(huán)境下進(jìn)行，同樣利用吸管抽取充分?jǐn)嚢璧?ml水樣，并將其滴注于平皿中，然后將其注入融化、冷卻到45攝氏度左右的15ml營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，而后旋轉(zhuǎn)搖均平皿中的溶液，將水樣與營(yíng)養(yǎng)液充分混合。另外再選用一只平皿單獨(dú)豬肚營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并將其作為空白對(duì)照組，將它們放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本次研究采用SPSS.20軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，樣品菌落數(shù)總均采用平均值表好似，用t檢驗(yàn)，如果有P<0.05，則表示兩組數(shù)據(jù)比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1標(biāo)準(zhǔn)菌株檢測(cè)結(jié)果比較

將稀釋至10（1）/ml、10（2）/ml的菌懸液利用兩組不同的方法檢測(cè)后，發(fā)現(xiàn)3M紙片法檢測(cè)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的結(jié)果明顯優(yōu)于平皿計(jì)數(shù)法組，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;相見表1。

2.2兩種檢驗(yàn)方法準(zhǔn)確度比較

經(jīng)過檢測(cè)和分析，發(fā)現(xiàn)在水質(zhì)檢驗(yàn)中3M紙片法準(zhǔn)確度明顯優(yōu)于平皿計(jì)數(shù)法，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;相見表2。

3討論

生活飲用水菌落總數(shù)檢測(cè)能比較直觀的檢測(cè)水樣是否被微生物污染，能夠評(píng)估人類引用后是否為危機(jī)身體健康，其在水質(zhì)檢驗(yàn)中是一項(xiàng)重要檢測(cè)指標(biāo)。過去人們采用平皿計(jì)數(shù)法進(jìn)行水質(zhì)檢驗(yàn)，雖然能檢測(cè)出生活飲用水細(xì)菌總數(shù)，但是這種檢測(cè)方法有明顯的缺陷，首先操作繁瑣，消毒清潔和配置營(yíng)養(yǎng)基工作量比較大，而且營(yíng)養(yǎng)基不耐高溫，細(xì)菌容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果等;另外，這種檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)報(bào)告精確度有待提高，這對(duì)衛(wèi)生監(jiān)督工作來說不能按需提供相應(yīng)的服務(wù)。所以，必須要探究出一種更為靈敏、簡(jiǎn)便的水質(zhì)檢驗(yàn)方法。

3M紙片法近幾年在水質(zhì)檢驗(yàn)中的應(yīng)用比較廣泛，這種方法是由美國(guó)3M公司研制，將細(xì)菌生長(zhǎng)過程中所需要的營(yíng)養(yǎng)成分固定于紙片上，便于隨時(shí)使用，操作比較簡(jiǎn)便;同時(shí)通過將營(yíng)養(yǎng)成分中附加著色劑將菌落染成紅色，所以比較容易判讀，增加其實(shí)用性。3M紙片法與平皿計(jì)數(shù)法相比主要優(yōu)勢(shì)：操作簡(jiǎn)便，平皿計(jì)數(shù)法需要制作培養(yǎng)基，而且需要控制冷凝溫度，操作繁瑣。而3M紙片法僅僅需要接種水樣和壓片就可以，省去制作培養(yǎng)基和滅菌等操作，檢驗(yàn)效果更高;其次，3M紙片法便于結(jié)果統(tǒng)計(jì)，平皿計(jì)數(shù)法培養(yǎng)結(jié)果一般是菌落形狀、大小形狀，且顏色與培養(yǎng)液的背景色相近，辨識(shí)度不高;平皿計(jì)數(shù)法看到的是大面積片狀菌落，有礙觀察和計(jì)數(shù)。而3M紙片法菌落大小、形狀比較均勻，菌落顏色為紅色，辨識(shí)度比較高;且菌落數(shù)量分布比較均勻，能利用紙片上的小方格進(jìn)行計(jì)算，計(jì)數(shù)即方便又準(zhǔn)確。此外，減少被污染的可能性，平皿計(jì)數(shù)法檢測(cè)時(shí)檢測(cè)結(jié)果受營(yíng)養(yǎng)基成分和性能的影響比較大，影響檢測(cè)準(zhǔn)確度。而3M紙片法檢測(cè)時(shí)菌落總數(shù)測(cè)試片在冷藏環(huán)境下有效期為3年，開袋后測(cè)試片取用方便，相互之間不受影響。

據(jù)有關(guān)研究顯示，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌是導(dǎo)致食物和水質(zhì)污染的主要致病菌，美國(guó)3M公司所生產(chǎn)的測(cè)試片對(duì)這兩種菌株具有很強(qiáng)的選擇性，檢測(cè)迅速，準(zhǔn)確率高。本次研究結(jié)果顯示：3M紙片法檢測(cè)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的結(jié)果明顯優(yōu)于平皿計(jì)數(shù)法組，且水質(zhì)檢驗(yàn)中3M紙片法準(zhǔn)確度明顯優(yōu)于平皿計(jì)數(shù)法，P均<0.05，提示3M紙片法在水質(zhì)檢驗(yàn)中應(yīng)用準(zhǔn)確度更高，對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌更加敏感。

綜上所述，目前，水質(zhì)檢驗(yàn)方法比較多，不同的檢測(cè)到的和測(cè)試儀器也存在一些差異，實(shí)際操作中一般選擇操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度和靈敏性高的檢測(cè)方法，確保水質(zhì)檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確度的提高。通過本次研究，發(fā)現(xiàn)3M紙片法在水質(zhì)檢驗(yàn)應(yīng)用價(jià)值比較高，不僅操作簡(jiǎn)便，而且檢測(cè)準(zhǔn)確度比較高，值得大力推廣應(yīng)用。