李 彬，黃略略*，宋保靚

（1.深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東 深圳518055；2.深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局工業(yè)品檢測(cè)技術(shù)中心，廣東 深圳518045）

五氯苯酚（Pentachlorophenol，PCP），也稱為五氯酚，是木制品及竹藤草制品中常用的防腐劑，具有防腐、殺真菌和殺蟲(chóng)的作用[1]，由于其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、殘留時(shí)間長(zhǎng)，在人體內(nèi)產(chǎn)生生物儲(chǔ)積而導(dǎo)致癌癥．許多國(guó)家和地區(qū)已禁止或限制與人體接觸的物品包括木竹藤草制品使用五氯酚作為防腐劑：歐盟2003/02/EC規(guī)定五氯苯酚最大殘留量為5 mg/kg；美國(guó)EPA規(guī)定禁止使用五氯苯酚[2]．因此，有必要建立高靈敏的測(cè)定木制品及其它竹藤草制品中五氯酚的方法，以適應(yīng)不同法規(guī)中檢測(cè)限量的需要．

目前，測(cè)定木竹藤草制品中五氯苯酚的方法有高效液相色譜法[3-4]、氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定法[5-7]、氣質(zhì)聯(lián)用法[8]和液質(zhì)聯(lián)用法[9-10]．高效液相色譜法靈敏度較低，樣品需濃縮后，方可達(dá)到法規(guī)限量要求；液質(zhì)聯(lián)用儀成本較高，維護(hù)較為麻煩，不易推廣．氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定法靈敏度雖高，但和高效液相色譜法一樣，遇到樣品中五氯苯酚假陽(yáng)性問(wèn)題時(shí)，無(wú)法進(jìn)行確證．目前氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法也用于五氯苯酚的測(cè)定，但僅限于煙草、涂料、土壤等樣品[11-13]，且大部分采用的是EI電離源．EI電離源在測(cè)定電負(fù)性較強(qiáng)的五氯苯酚時(shí)靈敏度有限，而CI化學(xué)電離源在檢出強(qiáng)電負(fù)性物質(zhì)上靈敏度更具優(yōu)勢(shì)，尤其CI源的負(fù)化學(xué)電離模式（NCI）-MS，電離碎片較少，準(zhǔn)分子離子峰比較強(qiáng)，譜圖比較干凈，適用于復(fù)雜基體樣品中五氯苯酚的測(cè)定．目前已有氣相色譜-負(fù)化學(xué)源質(zhì)譜法測(cè)定河蟹中五氯苯酚的報(bào)道[14]，但是文獻(xiàn)采用的是負(fù)化學(xué)源一級(jí)質(zhì)譜，背景干擾較嚴(yán)重．本研究使用甲醇提取樣品，乙酸酐衍生，使用負(fù)化學(xué)電離源作為離子源，利用氣相色譜-負(fù)化學(xué)電離源（NCI）-二級(jí)質(zhì)譜法測(cè)定木制品及其它竹藤草制品中的五氯苯酚．

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

瓦里安450 GC-320 MS/MS 氣相色譜儀-質(zhì)譜聯(lián)用儀（配置EI 和CI 電離源，美國(guó)瓦里安公司）；超聲波發(fā)生器；AE200 分析天平（感量0.0001g，瑞士梅特勒公司）；金屬篩：孔徑1.0 mm．

甲醇和正己烷為色譜純（美國(guó)Tedia 公司）；碳酸鉀、無(wú)水乙酸酐和無(wú)水硫酸鈉均為分析純（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司，上海），無(wú)水硫酸鈉（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司，上海）經(jīng)600 ℃灼燒4 h，冷卻后貯存于干燥器中備用；五氯苯酚（PCP）（Dr.Ehrenstorfer 公司，純度≥99%）．

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

本文前處理過(guò)程參考CEN/TR 14823:2003[15]進(jìn)行．

1.2.1 樣品前處理過(guò)程

1.2.1.1 樣品的制備

隨機(jī)抽取有代表性木竹藤草樣品．用木刨刨取試料，或用空心鉆鉆取待測(cè)樣品，將試料加以粉碎，過(guò)金屬篩，充分混合．稱取適量樣品在（103±2）℃條件下干燥至質(zhì)量恒定，干燥后的試樣應(yīng)立即置于干燥器內(nèi)冷卻，作為待測(cè)試樣．

1.2.2.2 五氯苯酚的提取

稱取適量試樣加入到錐形瓶中，加入30～40 mL甲醇至瓶中，搖動(dòng)，確保所有試樣被浸泡．將錐形瓶置于超聲波中超聲約半小時(shí)．樣品沉降并冷卻后，取上清液轉(zhuǎn)移溶液至50 mL 容量瓶，并用甲醇清洗殘?jiān)喜⒁陨蠟V液，用甲醇定容到50 mL．

1.2.2.3 五氯苯酚的乙酰化

將30 mL 0.1 mol/mL 碳酸鉀溶液加入到分液漏斗中，移取上述提取液1 mL 到分液漏斗中，充分振蕩，加入2mL 的無(wú)水乙酸酐，搖動(dòng)幾分鐘反應(yīng)完畢后，再加入10 mL 正已烷，充分振蕩，靜置分層后，移取上層正已烷相溶液，通過(guò)內(nèi)置有無(wú)水硫酸鈉的漏斗到一個(gè)25 mL 容量瓶中；用10 mL 正已烷重復(fù)以上步驟，合并濾液．用正已烷定容至刻度，取正已烷溶液供氣相色譜-質(zhì)譜分析．

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.002～1mg/L）的衍生化過(guò)程參見(jiàn)1.2.2.3 節(jié)方法步驟．

1.3 分析條件

1）色譜條件：DB-5MS 色譜柱（30 m×0.25 mm i.d.×0.25μm）；柱溫采用程序升溫，初溫50 ℃，以15 ℃/min 升至200 ℃，保溫5 min；然后以30 ℃/min 升至280℃，保溫2.3min；柱流速1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度：250℃．

2）質(zhì)譜條件：負(fù)化學(xué)（NCI）離子源：-70eV；反應(yīng)氣：甲烷（純度＞99.999%），壓力6.0 Torr；碰撞氣體：高純氬氣（純度＞99.999%），壓力1.8 mTorr；載氣：高純氦（純度＞99.999%）；離子源溫度：150℃；傳輸線溫度：250℃；脈沖不分流進(jìn)樣，3.0 min 后開(kāi)閥．

2 結(jié)果與討論

2.1 離子源的選擇

分別使用EI和CI 2種離子源對(duì)樣品進(jìn)行試驗(yàn)．實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：EI 源對(duì)電負(fù)性較強(qiáng)的五氯苯酚衍生物的響應(yīng)靈敏度較差，只能做到10-6級(jí)，樣品必須經(jīng)過(guò)濃縮才能上機(jī)檢測(cè)，且譜圖中干擾峰較多（見(jiàn)圖1）．CI 源的二級(jí)質(zhì)譜靈敏度比EI 源高出約30 倍，樣品不經(jīng)濃縮就可以直接上機(jī)定性和定量，圖2為GC-CI-MSMS 測(cè)定的未經(jīng)濃縮的陽(yáng)性樣品A 的一級(jí)和二級(jí)色譜圖．1）五氯苯酚含有5 個(gè)氯原子和一個(gè)羥基，故容易失去質(zhì)子帶負(fù)電荷．故采用負(fù)化學(xué)電離源模式靈敏度會(huì)有很大優(yōu)勢(shì)；2）采用EI 離子源時(shí)，電離能量較強(qiáng)，碎片較多，導(dǎo)致樣品中背景值較高，影響了檢測(cè)靈敏度．而CI 是比EI 弱的軟電離模式，背景信號(hào)低，雖然在一級(jí)質(zhì)譜中電離碎片較少，定性準(zhǔn)確度不高，但結(jié)合二級(jí)質(zhì)譜進(jìn)行二級(jí)電離后，相比于EI 源，即能降低背景干擾，同時(shí)又提高了檢測(cè)靈敏度．所以，本方法采用負(fù)CI 電離源作為離子源，并使用二級(jí)質(zhì)譜進(jìn)行定性定量分析．

2.2 質(zhì)譜條件的選擇

首先通過(guò)全掃描方式得到一級(jí)質(zhì)譜總離子流圖和質(zhì)譜圖（見(jiàn)圖3a和3b），選擇m/z308作為母離子作二級(jí)質(zhì)譜．根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜的結(jié)果，選擇豐度相對(duì)較高、分子質(zhì)量較大的3對(duì)碎片離子（m/z308/265，m/z308/231，m/z308/202）同時(shí)監(jiān)測(cè)（見(jiàn)圖3c），進(jìn)行定性確證．選擇豐度較高的離子對(duì)m/z308/265作為為五氯苯酚衍生物的定量離子對(duì)進(jìn)行定量分析（見(jiàn)圖3c）．

圖1 濃縮50倍后的樣品GC-EI-MS總離子流圖（a）和選擇離子流圖（監(jiān)控離子:308amu）（b）

圖2 GC-CI-MS離子流圖

圖3 乙?；迓缺椒訕?biāo)準(zhǔn)溶液典型GC-CI-MS一級(jí)質(zhì)譜

2.3 方法驗(yàn)證

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線和檢出限

在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，對(duì)一定濃度范圍內(nèi)（0.002～1mg/L）的五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行衍生后測(cè)定，發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣濃度（X，10-9）與衍生產(chǎn)物峰面積（Y）有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)γ分別為0.9992，線性相關(guān)方程為Y=2748456X+3121239．采用在空白樣品中加入標(biāo)樣進(jìn)行實(shí)測(cè)的方法來(lái)測(cè)定其檢測(cè)限，在S/N=3的條件下，確定五氯苯酚的檢測(cè)低限為0.001mg/L．

2.3.2 精密度和回收率實(shí)驗(yàn)

在測(cè)定的空白木材樣品中加入濃度分別為0.002、0.05 和1.0 mg/L 的五氯苯酚標(biāo)樣，按1.2樣品處理步驟操作，進(jìn)行回收率和精密度實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表1．

2.4 實(shí)際樣品檢測(cè)

隨機(jī)選取16 個(gè)進(jìn)出口木竹藤草制品（木碗、木筷、藤制儲(chǔ)物筐、竹制擺件等），按照文中樣品前處理步驟和優(yōu)化的儀器試驗(yàn)條件進(jìn)行測(cè)定（檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2），由結(jié)果可知：16 個(gè)樣品中藤制儲(chǔ)物筐、竹制擺件中五氯苯酚檢出陽(yáng)性樣品居多，共有8 個(gè)陽(yáng)性樣品，其中超出法規(guī)限量值的樣品有3 個(gè)．木碗、木筷中僅有一個(gè)陽(yáng)性樣品，且不超標(biāo)．

表1 回收率和精密度（n=9）

表2 實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果（n=3）

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：通過(guò)帶有負(fù)化學(xué)電離源（NCI）的氣相色譜二級(jí)質(zhì)譜儀測(cè)定，檢測(cè)靈敏度高，干擾小，可操作性強(qiáng)，能夠很好的滿足木竹藤草制品中五氯苯酚的定性定量檢測(cè)要求．