成偉華，郭飛虎，鄧雪松，秦祥宇，樊紅強，胡 驥

(原子高科股份有限公司，北京 102413)

正電子發(fā)射型計算機斷層掃描顯像(positron emission tomography，PET)，由于其靈敏度高，特異性好，安全性好，并且可以進行全身顯像，已廣泛用于多種疾病的診斷與鑒別診斷、療效評價和新藥開發(fā)等[1]。左旋多巴(3,4-二羥基-L-苯丙氨酸)是中樞神經遞質多巴胺的前體物質，用于治療帕金森病，18F標記的左旋多巴類似物6-[18F]氟-3,4-二羥基-L-苯丙氨酸([18F]F-DOPA,1)是研究大腦多巴胺功能的正電子顯像劑，用于早期診斷帕金森病[2]和腫瘤的診斷與鑒別[3]。目前，[18F]F-DOPA的合成方法主要有親電取代法和親核取代法。親電取代法是目前制備[18F]F-DOPA較常用的方法，用標記前體2與[18F]F2進行親電取代得到[18F]F-DOPA (1)[4-5](圖1)，RCY為(6.4±1.7)%。

圖1 親電合成[18F]F-DOPA (1)

由于生產[18F]F2時必須用穩(wěn)定F2作為載氣以減少[18F]F2的吸附，因此最終產品為有載體[18F]F-DOPA，同時此方法的RCY低，比活度低。已報道的親電取代自動化合成方法中[6-8]，[18F]F-DOPA的比活度都不高(>100 MBq/μmol)。Forsback 等[9]改變反應溶劑發(fā)現(xiàn)，氘代二氯甲烷(RCY=7.8%),氘代三氯甲烷(RCY=7.5%)和氘代丙酮(RCY=8.5%)都比三氯氟甲烷(RCY=6.0%)RCY高，在反應中加入醋酸可以提高RCY，且產品質量不受改變溶劑的影響。近期研究發(fā)現(xiàn)[10]，通過Ag前體化合物4親電合成[18F]F-DOPA (1)(圖2)，RCY為(19±12)%，此法比前述的親電合成方法效率高。

圖2 通過含銀化合物親電合成[18F]F-DOPA (1)

親核取代合成[18F]F-DOPA，以無載體的[18F]F-作為親核進攻試劑，并且親核氟化反應具有好的選擇性，可以得到單一對映體[18F]-DOPA，且不需要高效液相進行分離純化，可得到高比活度的[18F]F-DOPA。本文對近幾年通過親核取代合成[18F]F-DOPA的方法進行綜述。

1 通過含Ni前體化合物合成

Lee等[11]報道了通過氧化親核取代反應快速制備得到含保護基團[18F]F-DOPA前體化合物7(圖3)。此方法首先合成含鎳的化合物6，這個化合物在空氣、水和硅膠中都很穩(wěn)定。然后，在高價碘化合物存在下，18F-與含鎳的化合物6反應1min就可以得到高比活度無載體的[18F]F-DOPA前體化合物7，RCY為15%。此方法特別之處是無需用共沸的方法來進行除水處理，直接反應，可節(jié)省總的反應時間，缺點是化合物(高價碘)不穩(wěn)定且合成比較復雜。Zlatopolskiy等[12]運用這個方法優(yōu)化了反應條件，合成了[18F]F-DOPA、[18F]FMT和[18F]FDA，其中合成得到的[18F]F-DOPA總的合成時間50 min，RCY約7%，比活度為175 GBq/μmol(通過親電取代的方法比活度為30 MBq/μmol)。作者同時還觀察了另外兩種含碘氧化劑1-亞碘酰苯和2-亞碘酰-1,3,5-三甲基苯對反應的影響，結果用這兩種氧化劑時反應不能發(fā)生，說明此反應碘氧化劑具有專一性。

圖3通過含鎳化合親核合成[18F]F-DOPA 前體化合物7

2 通過碘鎓鹽前體化合物合成

DiMagno等[13]報道三氟磺酸二芳基碘鎓鹽8在干燥的乙腈中，可以通過陰離子交換得到碘鎓鹽[18F]氟化物9，在非極性溶劑中脫去碘鎓成功氟化得到含保護基團的[18F]F-DOPA10，經氫溴酸脫保護得到[18F]F-DOPA (1)(圖4)。由于這是一篇專利文獻，具體細節(jié)沒有詳細闡述。

圖4 通過碘鎓鹽前體化合物親核合成[18F]F-DOPA (1)

Wang等[14]發(fā)現(xiàn)通過碘鎓鹽可以提高氟化反應效率。Edwards等[15]用Boc保護基團的碘鎓鹽來合成[18F]F-DOPA (1)，此方法不用金屬催化，合成前體化合物11穩(wěn)定且無毒，優(yōu)化了反應條件，分別進行了“冷”和“熱”的氟化反應，可得到高比活度的[18F]F-DOPA前體化合物12(圖5)。在優(yōu)化反應條件時發(fā)現(xiàn)，用二甲基亞砜和乙腈做為混合溶劑，反應可以進行，而單獨以二甲基亞砜作為溶劑時，反應不發(fā)生。用N,N-二甲基甲酰胺或者乙腈作為溶劑時，會出現(xiàn)很多不能確定的標記副產物。在各種反應條件下，RCY小于1%，表明如此低的RCY并不適用于常規(guī)生產[18F]F-DOPA。

圖5 通過二芳基碘鎓鹽化合物親核合成[18F]F-DOPA 前體化合物12

Ichiishi等[16]發(fā)現(xiàn)三甲苯基取代碘鎓鹽(四氟化硼)13在銅-催化下氟取代，空間選擇性很好，最后得到[18F]F-DOPA前體化合物14(圖6)。標記率為(31±3)%。到目前為止，在臨床上沒有自動化合成[18F]F-DOPA的路線，為了證實運用此方法自動化合成[18F]F-DOPA的可能性，同時作者用三甲苯基取代的碘鎓鹽(甲苯磺?；?自動化合成[18F]F-DOPA前體化合物14，標記率(17±5)%，比活度(4 000±2 000)Ci/mmol(用13-BF4作為起始原料，得到化合物14，RCY為1.1%，比活度為290 Ci/mmol)。

圖6 通過二芳基碘鎓鹽化合物親核合成[18F]F-DOPA 前體化合物14

3 通過碘?；绑w化合物合成

之前報道用碘?；衔飦磉M行18F標記的方法比較少，Rotstein等[17]報道了用碘?；衔镞M行18F 標記的方法。Satyamurthy等[18]也運用碘葉立德合成含保護基團的[18F]F-DOPA前體化合物16，但是具體細節(jié)未闡述。作者還用此方法進行18F標記化合物15b，RCY尚可接受(5%～ 10%)，但標記前體化合物15b不穩(wěn)定限制了此方法的應用[19](圖7)。

圖7 運用碘葉立德和碘酰基化合物親核合成[18F]F-DOPA前體化合物16

4 銅-催化合成

Tredwell等[20]在銅催化下，利用前體化合物硼酸酯17，合成[18F]F-DOPA前體化合物18(圖8)，RCY為(55±23)%，通過HI脫保護后得到單一對映體的[18F]F-DOPA(ee>99%)。此方法前體化合物硼酸酯易于合成，毒性比較低，并且Cu催化要比Ni或Pd更安全，反應在空氣環(huán)境下就可進行。當前親電合成方法得到[18F]F-DOPA劑量范圍是300～1 200 MBq/mmol[4-5]，運用銅催化合成方法生產可以得到609 MBq/mmol[18F]F-DOPA，并且產品達到歐洲藥典的質量要求，可見該法可用于[18F]F-DOPA的常規(guī)生產。

圖8 銅催化親核合成[18F]F-DOPA前體化合物18

Makaravage等[21]在銅催化條件下，以N,N-二甲基苯胺和吡啶溶劑中，進行前體化合物19的18F標記，得到含保護基團的[18F]F-DOPA20(標記率為56%±12%)(圖9)，與近幾年報道的親核取代標記方法相比，該標記率是比較高的。另外，標記前體化合物19是親電取代生產[18F]F-DOPA的標記前體衍生物，并已經商業(yè)化了，表明此方法有望成為親核取代生產[18F]F-DOPA最具潛力的方法。

圖9 銅催化親核合成[18F]F-DOPA前體化合物20

5 同位素交換合成

2001年Tierlinq等[22]通過離子交換的方法，通過19F化合物21得到[18F]F-DOPA前體化合物22，經Baeyer-Villiger氧化、水解可得到[18F]F-DOPA (2)(圖10)，RCY(未校正)8%～10%，反應時間70 min，單一對映體約70%。結果表明，有合適離去基團，此法可得到高比活度的[18F]F-DOPA。

此后Wagner等[23]繼續(xù)研究通過離子交換法合成[18F]F-DOPA，采用了新的離去基團化合物23，在相轉移催化劑碳酸氫四丁銨存在下經離子交換得到標記化合物24，再氧化、水解得到[18F]F-DOPA (1)(圖11)，此方法得到的單一對映體大于96%，RCY約22%，合成時間105 min，比親電合成法得到[18F]F-DOPA的比活度高(2 GBq/μmol)，并且此方法很適合自動化合成。

圖10 利用同位素交換合成[18F]F-DOPA (1)

圖11 通過同位素交換合成[18F]F-DOPA (1)

6 手性相轉移催化合成

通過手性相轉移催化劑合成[18F]F-DOPA也是一有效的方法[24]，Lemaire課題組報道了一種芳環(huán)多步合成[18F]F-DOPA的方法[25-27]，首先含硝基化合物25進行18F標記得到化合物26，經過還原取代得到碘取代的化合物28，然后在手性催化劑(29或30)的條件下，與希夫堿31區(qū)域選擇性加成，經過水解和HPLC純化得到單一對映體[18F]F-DOPA(1，97%ee)，反應時間63 min，RCY為(36±3)%，比活度超過753 GBq/mmol(圖12)。此方法已運用到GE公司FASTlab合成儀上。

圖12 手性相轉移催化合成[18F]F-DOPA (1)

7 結 語

[18F]F-DOPA作為腫瘤和中樞神經系統(tǒng)疾病的顯像診斷試劑，已應用多年。利用親電合成的[18F]F-DOPA，存在有載體、比活度比較低等缺點，盡管親電取代也一直在研究發(fā)展，但是親核取代合成[18F]F-DOPA具有無載體(除同位素交換法)、比活度高等優(yōu)勢。所以近年來親核取代方法受到了廣泛的關注和研究，近年來親核取代方法優(yōu)劣比較見表1。

表1 親核合成[18F]F-DOPA的方法優(yōu)缺點

方法優(yōu)點缺點商業(yè)應用參考文獻Ni介導標記反應只需1min,產物比活度高反應化合物(存在高價碘)不穩(wěn)定且合成比較復雜否[11-12]碘鎓鹽不使用金屬催化劑RCY<1.1%否[16]碘?；獦擞浨绑w化合物不穩(wěn)定否[18-19]銅-硼酸酯前體化合物易合成,反應溫和比活度較低是[20]銅-錫取代基標記率比較高,標記前體已商業(yè)化—有潛力[21]離子交換適合自動化合成存在載體否[23]手性相轉移催化反應時間較短,RCY高,產物高比活度—是[26]

從表1可見，采用金屬催化、手性相轉移催化或碘鎓鹽合成等方法，不僅克服了以上的缺點，而且其中的一些方法已在國內實現(xiàn)了自動化。例如，最近中國人民解放軍總醫(yī)院核醫(yī)學科付華平等[28]應用了Tredwell等[20]的方法，進行了國產化氟多巴功能模塊合成，[18F]F-DOPA合成耗時60 min；不校正合成效率為(10.0±2.3)%(n=6)，放化純度大于99%，產量大于7.4 GBq。人體PET結果顯示良好，產品質量符合臨床要求。中山大學文富華等[29]應用Lemaire等[26]報道的方法，使用進口多功能ALLINONE合成儀及其配套卡套和試劑盒得到[18F]F-DOPA注射液，實現(xiàn)[18F]F-DOPA自動化生產，并對獲得的[18F]F-DOPA注射液進行質量檢測與分析，合成時間約80 min，校正RCY為(63.1±3.8)%(n=10)，放化純度大于98%，產品質量達到動物和人體PET顯像要求。相信在不久的將來，通過親核取代法合成高比活度的[18F]F-DOPA將會廣泛應用于常規(guī)生產中。