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(臺州市第一人民醫(yī)院 呼吸內(nèi)科，浙江 臺州 318020)

近年來，慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的發(fā)病率和病死率不斷升高，影響患者的生命健康和生活質(zhì)量[1]。目前對于COPD的發(fā)病原因尚不完全清楚，有研究認(rèn)為與慢性支氣管肺炎和阻塞性肺氣腫發(fā)生有關(guān)的因素都可能參與COPD的發(fā)病[2]，也有研究認(rèn)為體內(nèi)的炎癥反應(yīng)介質(zhì)的增加、病原體的侵入、免疫功能的下降等可能參與了COPD的發(fā)病過程[3]。COPD患者每年急性加重的次數(shù)、嚴(yán)重程度以及轉(zhuǎn)歸與患者免疫功能密切相關(guān)，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能可改善COPD急性加重期患者的病情并減少反復(fù)感染[4]。本研究旨在觀察比較不同病情控制水平COPD患者的淋巴細(xì)胞、免疫球蛋白和炎癥細(xì)胞因子水平。

1 資料與方法

1.1 資料選取方法 選取2016年1月—2017年1月在臺州市第一人民醫(yī)院治療的COPD患者60例；納入標(biāo)準(zhǔn)：①均確診為COPD患者，符合2015年COPD全球策略(GOLD2015)中COPD診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②入院前未接受激素、抗生素治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肺部其他疾病患者，如肺癌、哮喘、活動性肺結(jié)核等；②自身免疫性疾病患者，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等；③并發(fā)惡性腫瘤，嚴(yán)重肝腎功能損害，神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病患者；④近3個月使用過任何形式的免疫調(diào)節(jié)劑及激素的患者。COPD急性加重期患者除符合COPD診斷標(biāo)準(zhǔn)外，患者氣短或呼吸困難，并伴有喘息或胸悶[6]。COPD穩(wěn)定期患者除符合COPD診斷標(biāo)準(zhǔn)外，患者病情穩(wěn)定，無氣短或呼吸困難等癥狀[7]。另選取同期在臺州市第一人民醫(yī)院健康體檢的30例志愿者為對照組，既往均無吸煙史，無慢性咳嗽、咳痰、氣短史，近3月無上下呼吸道感染史，肺功能FEV1/FVC>0.70。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，所選研究對象均簽署知情同意書。

1.2 一般資料 所選研究對象中男32例、女28例，年齡50～80歲、平均68.9±10.1歲；急性加重期30例，其中男17例、女13例，平均年齡68.7±10.3歲； COPD穩(wěn)定期30例，其中男15例、女15例，平均年齡69.0±10.0歲。對照組中男16例、女14例，平均年齡68.8±10.4歲。三組研究對象的性別、平均年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.3 觀測指標(biāo)

1.3.1 淋巴細(xì)胞亞群 空腹采集靜脈血和誘導(dǎo)痰液標(biāo)本，采用美國BD公司淋巴細(xì)胞亞群檢測試劑盒、BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群分析，采用熒光標(biāo)記的CD3-FITC、CD8-PE、CD4-APC、CD56-PE、CD19-APC單克隆抗體對單個細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記檢測。

1.3.2 免疫球蛋白 收集血清及誘導(dǎo)痰上清液，采用日立全自動生化儀7600檢測，按照說明書步驟檢測IgG、IgA、IgM水平。

1.3.3 炎癥因子 收集血清及誘導(dǎo)痰上清液，采用eBioScience公司人TNF-α ELISA試劑盒、人IL-2 ELISA 試劑盒、人IL-6 ELISA 試劑盒，按照試劑盒說明書步驟檢測TNF-α、IL-2、IL-6水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件，計量資料兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 淋巴細(xì)胞亞群水平比較 三組研究對象的CD3+(F外周血=12.91，F(xiàn)痰液=11.46)，CD4+(F外周血=9.94，F(xiàn)痰液=8.86)，CD8+(F外周血=8.68，F(xiàn)痰液=8.93)，CD4+/CD8+(F外周血=10.23，F(xiàn)痰液=11.92)，CD56+(F外周血=13.29，F(xiàn)痰液=10.85)比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；對照組外周血和痰液的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及CD56+水平均高于COPD急性加重組和COPD穩(wěn)定組患者，對照組外周血和痰液的CD8+水平低于COPD急性加重組和COPD穩(wěn)定組患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；COPD急性加重組患者的外周血和痰液CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及CD56+水平均低于COPD穩(wěn)定組，COPD急性加重組患者的外周血和痰液CD8+水平高于COPD穩(wěn)定組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；見表1。

表1 淋巴細(xì)胞亞群水平比較

注：*與對照組比較，P<0.05;#與COPD穩(wěn)定組比較，P<0.05；下同。

2.2 免疫球蛋白水平比較 三組研究對象的免疫球蛋白IgG(F外周血=9.13，F(xiàn)痰液=9.80)，IgA(F外周血=12.39，F(xiàn)痰液=13.74)，IgM(F外周血=9.09，F(xiàn)痰液=10.23)水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；對照組外周血和痰液的IgG、IgA以及IgM水平均高于COPD急性加重組和COPD穩(wěn)定組患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；COPD急性加重組患者的外周血和痰液IgG、IgA以及IgM水平均低于COPD穩(wěn)定組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；見表2。

表2 免疫球蛋白水平比較

2.3 炎癥因子水平比較 三組研究對象的炎癥細(xì)胞因子TNF-α(F外周血=13.90，F(xiàn)痰液=14.81)，IL-2(F外周血=11.82，F(xiàn)痰液=12.39)，IL-6(F外周血=14.38，F(xiàn)痰液=15.09)水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；對照組外周血和痰液的TNF-α、IL-2及IL-6水平均低于COPD急性加重組和COPD穩(wěn)定組患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；COPD急性加重組患者的外周血和痰液TNF-α、IL-2及IL-6水平均高于COPD穩(wěn)定組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；見表3。

表3 炎性因子水平比較

3 討論

COPD是一種以氣流受限不完全可逆及進(jìn)行性發(fā)展的疾病，在進(jìn)行性發(fā)展過程中往往伴有全身及呼吸道局部的免疫功能低下[8]。對照組外周血和痰液的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及CD56+水平均明顯高于COPD急性加重組和COPD穩(wěn)定組患者，對照組外周血和痰液的CD8+水平明顯低于COPD急性加重組和COPD穩(wěn)定組患者；COPD急性加重組患者的外周血和痰液CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及CD56+水平均明顯低于COPD穩(wěn)定組，COPD急性加重組患者的外周血和痰液CD8+水平明顯高于COPD穩(wěn)定組，表明COPD患者T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)異常，COPD患者的免疫功能受到一定的影響，且這種免疫功能的下降程度隨著COPD病情的加重而進(jìn)一步降低。

本研究結(jié)果還顯示，對照組外周血和痰液的IgG、IgA以及IgM水平均明顯高于COPD急性加重組和COPD穩(wěn)定組患者， COPD急性加重組患者的外周血和痰液IgG、IgA以及IgM水平均明顯低于COPD穩(wěn)定組，表明COPD急性加重期會對機(jī)體的免疫系統(tǒng)造成一定程度的損害，導(dǎo)致免疫球蛋白水平降低，進(jìn)而引起機(jī)體對呼吸道的局部保護(hù)作用降低，患者的病情加重。

另外，本研究結(jié)果顯示對照組外周血和痰液的TNF-α、IL-2及IL-6水平均明顯低于COPD急性加重組和COPD穩(wěn)定組患者，COPD急性加重組患者的外周血和痰液TNF-α、IL-2及IL-6水平均明顯高于COPD穩(wěn)定組，表明TNF-α、IL-2、IL-6炎癥細(xì)胞因子參與COPD患者的發(fā)生、發(fā)展過程。當(dāng)COPD患者發(fā)生呼吸道感染時，患者的免疫功能低下，病毒或細(xì)菌的某些抗原成分或代謝產(chǎn)物如脂多糖、內(nèi)毒素可激活氣道肺泡巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α、IL-2等細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子又進(jìn)一步促進(jìn)肺泡巨噬細(xì)胞和支氣管上皮細(xì)胞產(chǎn)生IL-6等細(xì)胞因子，局部產(chǎn)生的細(xì)胞因子吸收入血以及內(nèi)毒素引起體內(nèi)單核巨噬細(xì)胞廣泛的激活，從而導(dǎo)致血液中TNF-α、IL-6升高[9-10]。

綜上所述，隨著COPD患者病情的加重，患者的淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白和炎癥因子的水平也隨之發(fā)生改變。