吳 帆 宋力雯 成佳景 丘 瑾 周健紅

同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院(上海，200072)

人乳頭瘤狀病毒(HPV)是引起人類(lèi)宮頸病變的常見(jiàn)病毒，有70多種亞型，HPV-6、-11、-40、-42與宮頸炎相關(guān)，HPV-16，-18，-31，-33，-45與宮頸上皮內(nèi)瘤變相關(guān)，HPV-16和HPV-18是引起宮頸癌的高危型HPV[1-2]。宮頸局部發(fā)生病變后，不給予積極治療容易引起癌變[3]。辛復(fù)寧，又稱(chēng)重組人干擾素-2b陰道泡騰膠囊，可用于緩解HPV感染的臨床癥狀[4]，但對(duì)患者免疫影響報(bào)道甚少。因此，本文對(duì)收治的HPV感染相關(guān)宮頸疾病患者臨床療效及免疫影響進(jìn)行分析，為辛復(fù)寧臨床治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2016年5月—2017年5月接收治療的HPV感染相關(guān)的宮頸疾病患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)婦科陰道窺探器檢查，符合國(guó)家《婦產(chǎn)科學(xué)》關(guān)于HPV感染標(biāo)準(zhǔn)，宮頸部檢查陽(yáng)性；②有性生活史，在感染病毒期間無(wú)妊娠期及生育哺乳期；③在就診前3～4月未接受任何相關(guān)治療措施且依從性較好，能主動(dòng)配合醫(yī)護(hù)人員工作。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肝、腎、心及神經(jīng)功能?chē)?yán)重障礙；②近半年內(nèi)有生育計(jì)劃；③對(duì)治療病毒感染過(guò)程中所使用藥物存在過(guò)敏史或禁忌證。所有治療過(guò)程均符合醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的相關(guān)規(guī)定，并經(jīng)過(guò)患者及家屬知情同意，并簽訂同意書(shū)。

1.2 治療

根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和觀察組。對(duì)照組均接受高頻電刀治療，術(shù)后多臥床休息，給予金霉素眼膏外用1周，再給予合咪喹莫特(艾達(dá)樂(lè)，進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)20160079，12.5mg)治療，睡前擦于患處，隔日再擦，共計(jì)20d。觀察組在上述基礎(chǔ)上給予辛復(fù)寧(上海華新生物高技術(shù)有限公司，80萬(wàn)IU/粒)，月經(jīng)干凈后第3天，將1粒辛復(fù)寧膠囊置于陰道后穹窿處，每晚睡前1粒，10d為1個(gè)療程[5]，共2個(gè)療程，根據(jù)患者的不同感染程度適當(dāng)延長(zhǎng)1個(gè)療程。兩組治療過(guò)程中嚴(yán)格養(yǎng)成良好的生活習(xí)慣，注意衛(wèi)生，治療期間避免性行為接觸。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)

治療前及治療結(jié)束后1個(gè)月內(nèi)，檢測(cè)兩組對(duì)象：①宮頸局部T細(xì)胞亞群，暴露宮頸，用棉簽拭去宮頸口及周?chē)恼骋汉头置谝?，再用PBS液沖洗宮頸表面和陰道上段，再在后穹窿吸出PBS 4ml離心取上清，采用流式細(xì)胞儀三色檢測(cè)法檢測(cè)CD3+T 細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD4+CD25+細(xì)胞以及Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)；②免疫球蛋白，取空腹外周血清，免疫散射比濁法測(cè)定血清IgA、IgG和IgM；③炎癥因子，取空腹外周血清，采用ELISA法檢測(cè)血清的C-反應(yīng)蛋白(CRP)、腫瘤壞死因子-(TNF-)、干擾素(IFN-)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)。

1.4 療效觀察

治療結(jié)束后1個(gè)月評(píng)估療效：①顯效， HPV病毒檢測(cè)陰性，宮頸部無(wú)任何病變；②有效， HPV病毒檢測(cè)部分陽(yáng)性，宮頸局部有明顯的病變，T細(xì)胞亞群的數(shù)目較正常降低；③無(wú)效，感染HPV嚴(yán)重，宮頸局部惡化有早期宮頸癌的征兆，臨床表現(xiàn)為陰道流血， HPV病毒檢測(cè)陽(yáng)性。總有效率=(顯效+有效)/總例數(shù)100%。隨訪(fǎng)6個(gè)月后統(tǒng)計(jì)HPV感染復(fù)發(fā)情況。

1.5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS18.0進(jìn)行分析，其中宮頸病變分布和療效等計(jì)數(shù)資料分別采用χ2和RIDIT檢驗(yàn)，年齡，體質(zhì)量指數(shù)等計(jì)量資料行t檢驗(yàn)，P<0.05提示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料對(duì)比

對(duì)照組45例，年齡(50.2±4.7)歲(45～62歲)，體質(zhì)量指數(shù)(22.5±1.2)kg/m2；觀察組45例，年齡(52.0±4.8)歲(49～65歲)，體質(zhì)量指數(shù)(22.3±1.4)kg/m2。兩組一般資料比較無(wú)差異(P>0.05)。

2.2 兩組治療前后宮頸局部T細(xì)胞亞群比較

宮頸局部CD3+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD4+CD25+T細(xì)胞以及Foxp3+Tregs，治療前兩組無(wú)差異(P>0.05)；治療后兩組均有不同程度增加，且觀察組增高幅度大于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.3 兩組治療前后外周血免疫球蛋白水平比較

外周血IgA、IgG和IgM水平，治療前兩組無(wú)差異(P>0.05)；治療后兩組均有不同程度增加，且觀察組增高幅度大于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.4 兩組治療前后外周血炎癥因子水平比較

外周血CRP、TNF-、IFN-和IL-6，治療前兩組無(wú)差異(P>0.05)；治療后兩組均有不同程度降低，且觀察組降低幅度大于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表1 兩組治療前后宮頸局部T細(xì)胞亞群水平比較

*與對(duì)照組比較P<0.05

表2 兩組治療前后外周血免疫球蛋白水平比較

*與對(duì)照組比較P<0.05

表3 兩組治療前后外周血炎癥因子水平比較

*與對(duì)照組比較P<0.05

2.5 兩組臨床治療效果對(duì)比

對(duì)照組有效及總有效低于觀察組(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 兩組臨床治療效果比較[例(%)]

2.6 兩組治療6個(gè)月后復(fù)發(fā)率對(duì)比

治療6個(gè)月后，對(duì)照組7例(15.6%)HPV感染復(fù)發(fā)，觀察組1例(2.2%)HPV感染復(fù)發(fā)，觀察組復(fù)發(fā)率低于對(duì)照組(χ2=4.939，P=0.026)。

3 討論

HPV是一種高度特異性的嗜上皮性病毒，[5-6]。HPV感染相關(guān)的宮頸疾病臨床表現(xiàn)為白帶增多，性交后出血，絕經(jīng)后陰道出血等，或以外陰贅生物而就診，臨床治療HPV感染相關(guān)的宮頸疾病方法較多，藥物治療最為常見(jiàn)。

辛復(fù)寧是一類(lèi)由體細(xì)胞合成分泌的蛋白多肽，在治療HPV感染相關(guān)的宮頸疾病具有明確效果[7]。本文觀察組給予辛復(fù)寧連續(xù)治療，顯著提高療效并降低6個(gè)月內(nèi)HPV復(fù)發(fā)幾率，這與辛復(fù)寧可促進(jìn)宮頸上皮儲(chǔ)備細(xì)胞加快修復(fù)，阻止異型增生，抑制細(xì)菌、原蟲(chóng)及衣原體相關(guān)[8]。正常狀況下，宮頸具有多重防御，任何一道免疫防線(xiàn)出現(xiàn)問(wèn)題，宮頸就可以發(fā)生病變。

成熟的T淋巴細(xì)胞主要以CD+3分子為主。T淋巴細(xì)胞又可細(xì)分為CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞，CD4+T細(xì)胞是一種輔助性T細(xì)胞，將外源性抗原肽提呈給T細(xì)胞；CD8+T細(xì)胞是一種特異性細(xì)胞毒性細(xì)胞，能夠殺死病毒，當(dāng)感染HPV時(shí)患者T淋巴細(xì)胞數(shù)目減少，患病風(fēng)險(xiǎn)增加[9-10]。Foxp3+Tregs是一種專(zhuān)職性調(diào)節(jié)細(xì)胞，能夠發(fā)揮免疫抑制功能，若患者外周血中Foxp3+Tregs數(shù)目減少會(huì)導(dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂，免疫功能處于亢進(jìn)狀態(tài)，增加癌變風(fēng)險(xiǎn)。免疫球蛋白對(duì)病原菌具有抑制作用，當(dāng)菌群失調(diào)發(fā)生時(shí)，機(jī)體需借助球蛋白清除病原菌，當(dāng)免疫球蛋白降低時(shí)，機(jī)體清除病原菌的能力隨之降低[11-12]。宮頸因病原菌侵入，宮頸局部及粘膜系統(tǒng)被激活，大量釋放炎癥因子，如CRP、TNF-、IFN-和IL-6等，這些炎癥因子起到免疫應(yīng)答作用，在免疫反應(yīng)發(fā)揮關(guān)鍵作用，炎癥因子水平有助于反映宮頸病變程度[13]。本文中給予辛復(fù)寧組可提高感染者宮頸的T淋巴細(xì)胞亞群，提高外周血免疫球蛋白水平，降低外周血的炎癥因子表達(dá)。提示辛復(fù)寧具有多重免疫調(diào)節(jié)作用，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，增強(qiáng)淋巴細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的特異性細(xì)胞毒，促進(jìn)機(jī)體的免疫監(jiān)視及免疫防護(hù)，與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果相似[14-17]。

辛復(fù)寧治療HPV感染時(shí)雖可以發(fā)揮療效，但治療時(shí)需注意：①病情緩解后即可停藥，不可長(zhǎng)期使用，因?yàn)樾翉?fù)寧同時(shí)也可會(huì)導(dǎo)致腰腹酸痛；②處于妊娠期和哺乳期感染孕婦要避免接觸此類(lèi)藥物[8]。

綜上所述，采用辛復(fù)寧治療HPV感染相關(guān)的宮頸疾病臨床療效顯著，治療后HPV感染復(fù)發(fā)幾率大大降低，與改善T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白和炎癥因子相關(guān)，值得臨床應(yīng)用。