殷春雁 劉自單 馬瑞菊 劉超

摘? 要：辣木果胚油來源于辣木籽、翼籽辣木籽，該文通過不同評價方法測定辣木果胚油的體外抗氧化活性。即通過測定ABTS（2，2-聯(lián)氮-二-（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）-二銨鹽）自由基清除能力、DPPH（1，1-二苯基-2-苦肼基）自由基清除能力和二價鐵離子的螯合能力來判斷辣木果胚油的體外抗氧化活性，辣木果胚油的體外抗氧化活性在一定范圍內(nèi)隨濃度的增大而增加。結(jié)果如下：當辣木果胚油的濃度為16 mg/mL時，對ABTS自由基清除能力為78.58%;當辣木果胚油的濃度為20 mg/mL時，對DPPH自由基清除能力為51.18%;當辣木果胚油的濃度為10 mg/mL時，對二價鐵離子的螯合能力為70.03%。

關(guān)鍵詞：辣木果胚油;抗氧化活性;ABTS;1，1-二苯基-2-三硝基苯肼

中圖分類號：Q946? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標志碼：A

辣木（Moringa oleifera）屬于辣木科（Moringaceae）辣木屬（Moringa Adans.）的熱帶落葉木本蔬菜及油料植物，樹齡約為20a，全世界約有13個辣木品種。

辣木（Moringa oleifera）葉片和果莢富含多種礦物質(zhì)、維生油、蛋白質(zhì)、氨基酸、辣木多肽和脂肪等有效成分，脂肪主要集中在種子上，其中含有較高的不飽和脂肪酸。辣木活性成分具有抗氧化和保護肝臟、降血糖、降血脂和血壓、抗菌消炎等保健功效。辣木果胚油是一款來源于辣木籽、翼籽辣木籽提取的精油，具有多種活性成分。該文對辣木果胚油的體外抗氧化活性進行深入探討。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

辣木果胚油，10 mL，紅河谷辣木產(chǎn)業(yè)有限公司;2，2-聯(lián)氮-二-（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）-二銨鹽（ABTS），1 g，上海伊卡生物科技有限公司;1，1-二苯基-2-苦肼基（DPPH），1 g，上海源葉生物科技有限公司;亞鐵嗪，1 g，Sigma;過硫酸鉀，500 g，天津市風船化學試劑科技有限公司;維生素E，100 g，上海伊卡生物科技有限公司;乙二胺四乙酸二鈉，100 g，上海伊卡生物科技有限公司;氯化亞鐵，500 g，天津市風船化學試劑科技有限公司;無水乙醇，500 mL，天津市風船化學試劑科技有限公司。UV-1800 PC型紫外-可見分光光度計，上海美譜達儀器有限公司;FA2004型電子天平，上海舜宇恒平科學儀器有限公司;HH-4型水浴鍋，金壇市雙捷實驗儀器廠;SK-1型快速混勻器，常州丹瑞實驗儀器設備有限公司;實驗室超純水機，重慶圣德利醫(yī)療器械研究有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 ABTS自由基清除能力

7 mM ABTS溶液：稱取38.41 mg ABTS溶解在5 mL去離子水中;2.45 mM過硫酸鉀：稱取6.61 mg過硫酸鉀溶解在5 mL去離子水中;2種溶液混合均勻，避光條件下放置16 h～24 h（讓其充分氧化）。使用時用無水乙醇按1∶80稀釋使用，現(xiàn)配現(xiàn)用。取稀釋好的ABTS溶液4 mL，加入80 μL用無水乙醇溶解的辣木果胚油（MOP）溶液，濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、

8 mg/mL、12 mg/mL、16 mg/mL，混勻在37 ℃水浴放置10 min，測定734 nm處的吸光度。維生素E做陽性對照。平行3次，空白不加樣品，以等量的無水乙醇代替，辣木果胚油抗氧化率計算如下：

其中As代表樣品的吸光度，A代表空白的吸光度。

1.2.2 DPPH自由基清除能力測定

取辣木果胚油（MOP）溶液2 mL，濃度為1.0 mg/mL、2.0 mg/mL、5.0 mg/mL、10.0 mg/mL、20.0 mg/mL，加入1 mL用無水乙醇溶解的0.2 mM的DPPH溶液，混勻放置30 min，測定517 nM處的吸光度。維生素E做陽性對照。平行3次，空白不加樣品，以等量的無水乙醇代替，辣木果胚油抗氧化率計算如下：

其中As代表樣品的吸光度，A代表空白的吸光度。

1.2.3 二價鐵離子的螯合能力測定

配制1.0 mg/mL、2.0 mg/mL、4.0 mg/mL、5.0 mg/mL、10.0 mg/mL的辣木果胚油（MOP）溶液各取1 mL，加入3.7 mL無水乙醇，再加入2.0 mM的FeSO4·7H2O溶液0.1 mL，混勻25 ℃下水浴60 min，加入5 mM的亞鐵嗪溶液0.2 mL，混勻25 ℃下水浴10 min，在562 nm處測定吸光度。EDTA做陽性對照。平行3次，空白不加樣品，以等量的無水乙醇代替，辣木果胚油對二價鐵離子的螯合能力計算如下：

其中As代表樣品的吸光度，A代表空白的吸光度。

2 結(jié)果與討論

2.1 ABTS自由基清除能力

2，2-聯(lián)氮-二-（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）-二銨鹽（ABTS）是以水溶性的自由基引發(fā)劑為顯色劑，ABTS經(jīng)過硫酸鉀氧化生成穩(wěn)定的藍綠色陽離子ABTS自由基，ABTS法是用于體外檢測物質(zhì)總抗氧化能力的方法。

隨著辣木果胚油濃度（2 mg/mL～16 mg/mL）的增加，當濃度達到16 mg/mL時，辣木果胚油對ABTS自由基的清除能力達到78.58%。

2.2 DPPH自由基清除能力

DPPH又稱1，1-二苯基-2-三硝基苯肼，是一種很穩(wěn)定的氮中心的自由基，常用于抗氧化成分的體外抗氧化性評價。DPPH法于1958年提出，依據(jù)是DPPH自由基有單電子，在517 nm處有一強吸收，其醇溶液顯紫色。

辣木果胚油對DPPH自由基的清除能力隨辣木果胚油濃度的增大而增強。當辣木果胚油的濃度達到20 mg/mL時，其清除DPPH自由基的能力達到51.18%。這一結(jié)果說明辣木果胚油具有較強的清除DPPH自由基的能力。

2.3 二價鐵離子的螯合能力

二價鐵離子螯合能力的方法用亞鐵嗪作為顯色劑，亞鐵嗪是測定Fe2+的一種特效顯色劑。原理是抗氧化物質(zhì)被認為具有螯合金屬離子的能力，從而避免發(fā)生芬頓反應產(chǎn)生自由基。當最后加入亞鐵嗪后，未被螯合的二價鐵離子與亞鐵嗪形成紫紅色的顯色團，在562 nm處有強吸收，根據(jù)吸光度的大小可以間接的反映抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力。

辣木果胚油對二價鐵離子的螯合能力隨辣木果胚油濃度的增大而增強。當辣木果胚油的濃度達到10 mg/mL時，其螯合能力達到70.03%。這一結(jié)果說明辣木果胚油具有較強的螯合二價鐵離子的能力。

EDTA是很好的螯合劑，可以被廣泛應用。辣木果胚油螯合能力為70.03%，表明它是一種很好的抗氧化劑，有望在其他方面的應用。

3 結(jié)論

（1）當辣木果胚油的濃度為16 mg/mL時，對ABTS自由基清除能力為78.58%。

（2）當辣木果胚油的濃度為20 mg/mL時，對DPPH自由基清除能力為51.18%。

（3）當辣木果胚油的濃度為10 mg/mL時，對二價鐵離子的螯合能力為70.03%。

參考文獻

[1]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志（第三十四卷第一分冊）[M].北京：科學出版社，1984.

[2]盛軍.現(xiàn)代辣木生物學[M].云南：云南出版集團公司，云南科技出版社，2015.

[3]林玲，何舒瀾.辣木的研究進展[J].海峽藥學，2013，25（11）：60-63.