鄭梅 孫雅娜 方燕錕 趙曉萌 黃偉 李勝?gòu)?qiáng)

摘要：目的? 對(duì)天津市津南區(qū)2015～2018年兒童流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)資料進(jìn)行分析，為兒童流感的預(yù)防提供依據(jù)。方法? 采集2015～2018年津南區(qū)流感監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院流感樣病例（ILI）患兒的咽拭子標(biāo)本，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行流感病毒檢測(cè)，對(duì)不同流感病毒的流行進(jìn)行型別和年齡分布的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果? 共采集1783份0～14歲ILI患兒咽拭子標(biāo)本，核酸陽(yáng)性549份，陽(yáng)性率為30.79%。季節(jié)性甲型H1N1、季節(jié)性H3型、B（Victoria）系（BV）、B（Yamaga-ta）系（BY）病毒交替流行。不同年齡組病毒陽(yáng)性率呈顯著上升又下降趨勢(shì)，以6～8歲年齡組陽(yáng)性率最高數(shù)（41.90%），其次為3～5歲年齡組（35.37%）。結(jié)論? 天津市津南區(qū)2015～2018年兒童流感流行高峰主要在冬春季節(jié)，優(yōu)勢(shì)毒株交替流行出現(xiàn)。應(yīng)重視季節(jié)性甲型H1N1流感病毒對(duì)兒童健康的影響，加強(qiáng)對(duì)學(xué)齡兒童的流感防控工作。

關(guān)鍵詞：兒童;流感病毒;病原學(xué)監(jiān)測(cè);實(shí)時(shí)熒光定量PCR

中圖分類號(hào)：R725.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.13.039

文章編號(hào)：1006-1959（2019）13-0131-02

Abstract：Objective? To analyze the data of childhood influenza pathogens in Jinnan District of Tianjin from 2015 to 2018， and to provide evidence for prevention of childhood influenza. Methods? The throat swab specimens of children with influenza-like illness （ILI） in Jinnan District Influenza Surveillance Sentinel Hospital from 2015 to 2018 were collected. Real-time quantitative PCR was used for influenza virus detection. The influenza type and age distribution of different influenza viruses were collected statistical analysis. Results? A total of 1783 samples of throat swabs from 0 to 14 years old children with ILI were collected. The positive rate of nucleic acid was 549， and the positive rate was 30.79%. Seasonal H1N1， seasonal H3， B （Victoria） （BV）， and B （Yamaga-ta） （BY） viruses alternate. The positive rate of virus in different age groups showed a significant increase and decrease trend， with the highest positive rate in the 6～8 years old group （41.90%）， followed by the 3～5 years old age group （35.37%）. Conclusion? The peak of childhood influenza in Jinnan District of Tianjin from 2015 to 2018 is mainly in winter and spring， and dominant strains appear alternately. Attention should be paid to the impact of seasonal influenza A H1N1 influenza virus on children's health and the prevention and control of influenza in school-age children.

Key words：Children;Influenza virus;Pathogen monitoring;Real-time PCR

流行性感冒（influenza），簡(jiǎn)稱流感，是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病，主要通過(guò)呼吸道飛沫傳播，具有潛伏期短、發(fā)病迅速、呈季節(jié)性流行的特點(diǎn)，是第一個(gè)實(shí)行全球性監(jiān)測(cè)的傳染病[1]。兒童是流感最主要的易感人群，在流感流行早期，35%～50%的感染者是學(xué)齡兒童[2]，兒童感染率是成人的1.5～3倍，且危害性更大。為了解天津市津南區(qū)兒童流感病毒的流行特點(diǎn)，本文對(duì)津南區(qū)2015～2018年流感樣病例患兒進(jìn)行了流感病毒病原學(xué)監(jiān)測(cè)分析。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象? 在2015年4月1日～2018年3月31日天津市津南區(qū)1所國(guó)家級(jí)流感監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院（天津市津南區(qū)咸水沽醫(yī)院）隨機(jī)選擇0～14歲，發(fā)熱體溫≥38℃，同時(shí)伴有咳嗽或者咽痛癥狀之一的流感樣病例（influence-like illness，ILI）作為研究對(duì)象。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集? 由流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一培訓(xùn)的醫(yī)務(wù)人員，采集發(fā)病3 d內(nèi)ILI患兒的咽拭子標(biāo)本，標(biāo)本采集后放入含有采集液的采樣管中，在4℃條件下24 h內(nèi)冷藏送至天津市津南區(qū)疾病預(yù)防控制中心國(guó)家流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。未能及時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本于-70℃或以下條件下保存，避免反復(fù)凍融，并于1周內(nèi)送檢。

1.2.2病毒檢測(cè)? 病原學(xué)監(jiān)測(cè)按照《全國(guó)流感監(jiān)測(cè)方案（2010年版）》，采用 RNeasy Mini kit RNA提取試劑盒（QIAGEN）公司，批號(hào)：151042932），從咽拭子標(biāo)本采樣液中提取總核酸。采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法進(jìn)行流感病毒核酸檢測(cè)，使用試劑為AB公司，批號(hào)：1709108），使用儀器為7500FAST實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀（美國(guó)ABI公司）。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)和儀器操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和結(jié)果判定。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 建立 Excel 2013數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和分析，計(jì)數(shù)資料采用？字2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1一般情況? 2015～2018年實(shí)驗(yàn)室共檢測(cè)0～14歲ILI患兒咽拭子標(biāo)本共1783份，其中男性951例，女性832例，男、女性別比為1.14∶1，共檢出流感病毒核酸陽(yáng)性549份，陽(yáng)性率為30.80%。陽(yáng)性標(biāo)本中季節(jié)性H3為165份，占30.35%;季節(jié)性甲型H1N1為177份，占32.24%;BV型為96份，占17.49%;BY型為187份，占34.06%。

2.2流感病毒核酸陽(yáng)性率? 2015～2018年津南區(qū)兒童流感病毒核酸陽(yáng)性率為30.80%，各年度流感病毒陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（？字2=0.779，P>0.05）。各年度病毒譜及優(yōu)勢(shì)毒株各不相同。2015年冬～2016年春以BV型為主，占陽(yáng)性總數(shù)的47.46%;2016年冬～2017年春則未檢測(cè)到B型流感病毒，季節(jié)性H3和季節(jié)性甲型H1N1交替流行，陽(yáng)性占有率分別為57.40%和35.50%，2017年冬～2018年春，BY型流感病毒為優(yōu)勢(shì)病毒，陽(yáng)性占有率為43.84%，季節(jié)性H3流行趨勢(shì)減弱，新甲型H1N1流行趨勢(shì)有所增強(qiáng)，見(jiàn)表1。

2.3流感病毒核酸型別的時(shí)間分布? 流感的流行高峰有明顯的季節(jié)性，2015～2018年津南區(qū)各年度兒童流感的流行峰均為單峰流行，型別特征變化較大。2016年3月出現(xiàn)高峰，陽(yáng)性率為69.42%，隨后減弱;2017年3月出現(xiàn)高峰，陽(yáng)性率為51.52%;2017年12月出現(xiàn)峰值，比前兩年有所提前，陽(yáng)性率為71.43%，為近3年最高峰。

2.4分型結(jié)果? 2015～2018年津南區(qū)兒童流感病毒流行的型別特征變化較大。2016年1～3月，BV型流感病毒陽(yáng)性率最高;2017年1月～3月，季節(jié)性H3則成為優(yōu)勢(shì)病毒;2017年11月～2018年2月高峰中，BY型流感病毒為主要病毒株;而每年均有季節(jié)性甲型H1N1小高峰出現(xiàn)。

2.5流感病毒核酸陽(yáng)性率及型別的年齡和性別分布? 不同年齡段兒童流感病毒構(gòu)成比和陽(yáng)性率有所不同。3歲以下和3～5歲年齡段兒童流感病毒陽(yáng)性數(shù)最多，但陽(yáng)性率不是最高，分別為15.47%和35.37%;6～8歲年齡段采樣數(shù)位居第3位，但陽(yáng)性率最高，達(dá)到41.90%。隨著兒童年齡的增加，流感病毒陽(yáng)性率呈顯著上升又下降趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（？字2=12.898，P<0.05）。男性陽(yáng)性率為29.02%（276/951），女性為30.71%（273/889），兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（？字2=0.047，P>0.05）。

3討論

流行性感冒是一種常見(jiàn)的呼吸道傳染病，其基因易發(fā)生突變或重組，尤其是甲型流感病毒抗原變異頻繁，常引起暴發(fā)和大規(guī)模流行[3，4]。本文對(duì)2015～2018年天津市津南區(qū)國(guó)家級(jí)流感監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院0～14歲ILI患兒進(jìn)行病原學(xué)監(jiān)測(cè)與分析，流行峰主要出現(xiàn)在冬季和春季，流感病毒陽(yáng)性率為30.79%，高于周邊地區(qū)[5，6]。

幼托兒童與學(xué)生是流感易感群體。3歲以下年齡段兒童ILI數(shù)量較大，但流感陽(yáng)性率較低，提示流感病毒在散居兒童間傳播能力較弱;3～8歲年齡組流感病毒陽(yáng)性率一直保持較高水平，提示流感病毒在幼托兒童與學(xué)齡兒童間傳播能力強(qiáng)，可能與該群體常處于相對(duì)密閉的空間，通風(fēng)較差，人流量和密集度較大有關(guān)。本文監(jiān)測(cè)結(jié)果提示天津市津南區(qū)在流感流行主要在冬春季節(jié)，優(yōu)勢(shì)毒株交替流行，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)兒童流感疫苗接種率，提高幼托機(jī)構(gòu)和學(xué)校的衛(wèi)生水平和流感預(yù)防意識(shí)，減少和控制流感的暴發(fā)和流行。

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收稿日期：2019-2-27;修回日期：2019-3-10

編輯/馮清亮