夏 勇，王海燕，劉 鑫，林 武

攀枝花市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站，四川 攀枝花 617000

黃藥，即黃原酸鹽，按其化學(xué)組成也可稱為烴基二硫代碳酸鹽，結(jié)構(gòu)通式為RO-C-SSMe(R為烴基，Me為Na+或K+)，一般由醇、苛性堿(氫氧化鈉或氫氧化鉀)及二硫化碳合成。因此，按照合成使用的苛性堿不同，黃藥分為鉀黃藥和鈉黃藥兩大類。根據(jù)合成使用的醇不同，黃藥又有不同的品種，常見(jiàn)的有乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、戊基、異戊基黃藥，這些黃藥在國(guó)內(nèi)均有生產(chǎn)和使用。黃藥主要用作金屬硫化物礦石的浮選收集劑，也常用于橡膠的硫化[1]。

黃藥的環(huán)境效應(yīng)不容忽視。黃藥具有惡臭，硫化礦的選礦廢水中即使只殘存極少量的黃藥，仍能使尾礦水及周?chē)諝猱a(chǎn)生異臭。含有黃藥的選礦廢水大量排放時(shí)，還可使受納水體變臭。在水中，黃藥會(huì)抑制多種水生生物的生長(zhǎng)，使魚(yú)類餌料減少，生長(zhǎng)緩慢。另外，黃藥還對(duì)一些魚(yú)類和蛙類具有致畸性和致死性[2]。如丁基黃原酸鈉對(duì)草魚(yú)胚胎具有強(qiáng)烈的致畸作用，畸形的主要癥狀為彎體和體表瘤狀贅生物[3]。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)表明，1 mg/L的戊基鉀黃藥可導(dǎo)致紅鱒死亡[4]。根據(jù)浮選藥劑對(duì)魚(yú)和水蚤類的毒性排名[5]，丁基黃藥、異戊基黃藥屬于中等毒性物質(zhì)，乙基黃藥屬于強(qiáng)毒性物質(zhì)。黃藥對(duì)動(dòng)物和人的危害主要表現(xiàn)為使神經(jīng)系統(tǒng)和肝臟器官受害，且其在微酸條件下能分解出具有神經(jīng)毒性的二硫化碳，二硫化碳可通過(guò)血液進(jìn)入大腦，使神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生病癥，能對(duì)造血系統(tǒng)產(chǎn)生不良影響，還會(huì)引起肌肉痛、情緒不穩(wěn)定、食欲不振、高血壓等[6]。

丁基黃藥的水解產(chǎn)物丁基黃原酸被中國(guó)《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB 3838—2002)列為集中式生活飲用水地表水源地水質(zhì)特定監(jiān)測(cè)項(xiàng)目，限值為0.005 mg/L；也被《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 5749—2006)列為生活飲用水水質(zhì)參考指標(biāo)，限值為0.001 mg/L。然而，丁基黃藥僅是黃藥中的一種，其他黃藥的環(huán)境危害也不容忽視。目前，水質(zhì)丁基黃原酸分析過(guò)程中存在丁基黃原酸及其鹽概念混淆，工業(yè)品中共存黃藥干擾丁基黃原酸測(cè)定，樣品采集及保存階段目標(biāo)物不穩(wěn)定易分解，部分分析方法前處理階段目標(biāo)物易損失，一些分析方法選擇性不好等技術(shù)難點(diǎn)。筆者結(jié)合實(shí)驗(yàn)對(duì)水質(zhì)丁基黃原酸測(cè)定中容易出現(xiàn)的問(wèn)題及應(yīng)該注意的事項(xiàng)進(jìn)行介紹，以期為水質(zhì)丁基黃原酸的準(zhǔn)確測(cè)定提供參考。

1 概念混淆

概念的混淆主要表現(xiàn)在混淆丁基黃原酸及其鹽。丁基黃原酸是丁基黃藥的水解產(chǎn)物，被《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB 3838—2002)和《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 5749—2006)納入了監(jiān)測(cè)范疇。但這2個(gè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中并沒(méi)有明確丁基黃原酸以何種分子式表示?！渡铒嬘盟畼?biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 有機(jī)物指標(biāo)》(GB/T 5750.8—2006)中丁基黃原酸標(biāo)液的配制敘述如下：“丁基黃原酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液〔ρ(C4H9OCSSH)=100 μg/mL〕：稱取0.027 8 g丁基黃原酸鉀(C4H9OCSSK，含量為90%)，置于250 mL容量瓶?jī)?nèi)，加3滴氫氧化鈉溶液，用純水溶解，定容”?？梢?jiàn)，這里的配制過(guò)程明確指出丁基黃原酸是以C4H9OCSSH計(jì)。按照該過(guò)程配制出來(lái)的丁基黃原酸鉀(C4H9OCSSK)濃度為100 μg/mL，而通過(guò)折算丁基黃原酸(C4H9OCSSH)的實(shí)際濃度為79.8 μg/mL。這里便混淆了丁基黃原酸及其鹽。后面出臺(tái)的幾個(gè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)分析方法[7-9]也明確丁基黃原酸是以C4H9OCSSH計(jì)，在配制過(guò)程中區(qū)分了丁基黃原酸及其鹽，并考慮了兩者之間的換算關(guān)系。因此，在使用《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 有機(jī)物指標(biāo)》(GB/T 5750.8—2006)測(cè)定丁基黃原酸時(shí)要注意丁基黃原酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制問(wèn)題。另外，建議《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB 3838—2002)和《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 5749—2006)中明確丁基黃原酸以C4H9OCSSH計(jì)。

2 樣品采集和保存

丁基黃原酸不穩(wěn)定，有效保存樣品是丁基黃原酸監(jiān)測(cè)的重要環(huán)節(jié)之一。目前，USEPA、ISO、歐盟和日本的有關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和排放標(biāo)準(zhǔn)中，沒(méi)有丁基黃原酸這一控制指標(biāo)，也沒(méi)有查到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)分析方法。中國(guó)的丁基黃原酸標(biāo)準(zhǔn)分析方法詳見(jiàn)表1。

表1 國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)分析方法中有關(guān)丁基黃原酸測(cè)定的水樣采集和保存規(guī)定Table 1 Regulations about sample collection and preservation in the determination of butylxanthic acid in water according to the national standard methods

《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 有機(jī)物指標(biāo)》(GB/T 5750.8—2006)并未指明采樣瓶材質(zhì)、保存條件和保存時(shí)間。后來(lái)頒布的幾個(gè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)分析方法[7-9]都逐步完善，明確了樣品采集和保存等細(xì)節(jié)。幾個(gè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)不一致的地方主要集中在采集到的水樣酸堿度調(diào)節(jié)到什么程度以及樣品保存期。僅在調(diào)節(jié)pH、避光冷藏保存條件下，樣品在保存期上的差異可能是由于考察保存期的樣品供試濃度高低差異造成的。對(duì)于一個(gè)未知樣品，在無(wú)法判斷其丁基黃原酸濃度大小的情況下，建議采集后盡快分析，最長(zhǎng)不超過(guò)1 d。針對(duì)樣品保存酸堿度問(wèn)題，包括《水質(zhì) 丁基黃原酸的測(cè)定 吹掃捕集/氣相色譜-質(zhì)譜法》(HJ 896—2017)以及《水質(zhì) 丁基黃原酸的測(cè)定 液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法》(HJ 1002—2018)在內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)[1,10]中都表明弱堿性環(huán)境更有利于丁基黃原酸的保存。

3 樣品前處理

《水質(zhì) 丁基黃原酸的測(cè)定 紫外分光光度法》(HJ 756—2015)樣品前處理過(guò)程中明確指出，采集的待測(cè)樣品混濁或者含有不溶物質(zhì)，需過(guò)孔徑為0.45 μm濾膜，但并未指出使用什么材質(zhì)的濾膜。有研究[11-12]表明，對(duì)于有機(jī)物分析，濾膜材質(zhì)的選擇極其重要，選擇不當(dāng)將會(huì)導(dǎo)致分析結(jié)果呈假陽(yáng)(陰)性。朱紅霞等[13]考察了混合纖維、聚醚砜、尼龍和聚四氟乙烯(PTFE)4種材質(zhì)濾膜對(duì)丁基黃原酸回收率的影響，結(jié)果表明，混合纖維、聚醚砜和PTFE這3種材質(zhì)的濾膜對(duì)丁基黃原酸的測(cè)定影響不大?！端|(zhì) 丁基黃原酸的測(cè)定 液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法》(HJ 1002—2018)[9]起草單位曾考察了聚醚砜、尼龍、玻璃纖維、親水性聚丙烯和PTFE濾膜對(duì)丁基黃原酸測(cè)定的影響，結(jié)果表明，玻璃纖維濾膜、親水性聚丙烯濾膜和PTFE濾膜待測(cè)物通過(guò)率為90%～110%，聚醚砜濾膜待測(cè)物通過(guò)率為70%～80%，而尼龍濾膜待測(cè)物通過(guò)率為10%左右，因此推薦選擇孔徑為0.22 μm的玻璃纖維濾膜、親水性聚丙烯濾膜和PTFE濾膜過(guò)濾樣品。綜合來(lái)看，前述2個(gè)研究均表明PTFE材質(zhì)濾膜對(duì)丁基黃原酸分析影響小，應(yīng)成為過(guò)濾的首選材質(zhì)。

4 物質(zhì)純度

物質(zhì)的純度是準(zhǔn)確定量分析的基礎(chǔ)。黃原酸鹽合成所需的醇中可能含有其他雜質(zhì)醇，最終會(huì)導(dǎo)致合成的這種黃原酸鹽中存在雜質(zhì)黃原酸鹽。BARNES等[14]考察了幾種商品化黃原酸鹽的純度，見(jiàn)圖1。

圖1 部分商品化黃原酸鹽及其雜質(zhì)[14]Fig.1 Impurities in some commercially available butylxanthates[14]

由圖1可見(jiàn)，單一品種的工業(yè)級(jí)黃原酸鹽中仍然含有少量其他共存黃原酸鹽。如所考察的正丁基黃原酸鹽實(shí)際含量為69%，共存有16%的異丁基黃原酸鹽，8%的丙基黃原酸鹽和7%的乙基黃原酸鹽。筆者利用超高效液相色譜三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀對(duì)國(guó)內(nèi)某選礦藥劑廠生產(chǎn)的工業(yè)級(jí)丁基黃藥水解產(chǎn)物及其共存黃原酸進(jìn)行定性分析(圖2)，并與幾種烴基黃原酸的標(biāo)準(zhǔn)譜圖(圖3)進(jìn)行比較。

圖2 工業(yè)丁基黃藥中烴基黃原酸的總離子流Fig.2 TIC chromatograms of alkyl xanthic acid in commercially butyl xanthate

圖3 烴基黃原酸標(biāo)準(zhǔn)液的總離子流Fig.3 TIC chromatograms of alkyl xanthic acid standard samples

實(shí)驗(yàn)所用分離條件如下：色譜柱為Waters ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm，1.7 μm)，流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為氨水溶液(pH約為9.5)，初始比例為5%的A，保持0.5 min，1 min內(nèi)升高到95%，保持0.5 min，0.5 min內(nèi)降為5%，保持1 min，流速為0.3 mL/min，柱溫為35 ℃。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該工業(yè)級(jí)丁基黃藥水解產(chǎn)物中未檢測(cè)到乙基黃原酸、丙基黃原酸、異丙基黃原酸和戊基黃原酸。然而，在丁基黃原酸(保留時(shí)間為0.90 min)的附近出現(xiàn)一個(gè)峰，保留時(shí)間為0.98 min(圖2)，該峰是采用丁基黃原酸的質(zhì)譜分析參數(shù)獲得，并且保留時(shí)間與丁基黃原酸保留時(shí)間(0.90 min)非常接近。筆者利用質(zhì)譜儀分析丙基黃原酸和異丙基黃原酸母離子和子離子的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)兩者具有相同的定性定量離子對(duì)。據(jù)此推測(cè)該工業(yè)品中丁基黃原酸附近出現(xiàn)的峰可能是其同分異構(gòu)體(如異丁基黃原酸)的峰。因此，水質(zhì)丁基黃原酸的監(jiān)測(cè)需要選擇性好的分析方法。

5 丁基黃原酸常用分析方法

5.1 銅試劑亞銅分光光度法

銅試劑亞銅分光光度法是《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 有機(jī)物指標(biāo)》(GB/T 5750.8—2006)及《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB 3838—2002)中指定的分析方法。其原理是在pH為5.2的鹽酸羥胺還原體系中，將銅離子還原成亞銅離子。水中的丁基黃原酸與亞銅離子生成黃原酸亞銅后被環(huán)己烷萃取。黃原酸亞銅再與銅試劑作用，生成橙黃色銅試劑亞銅，于436 nm處定量測(cè)定。筆者通過(guò)實(shí)驗(yàn)考察了該方法的選擇性。具體是分別以乙基黃原酸、丙基黃原酸、異丙基黃原酸和戊基黃原酸代替丁基黃原酸，并按照銅試劑亞銅分光光度法進(jìn)行分析，最后利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在350～500 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描最終產(chǎn)物的吸收光譜，如圖4所示。

圖4 銅試劑亞銅法所得終產(chǎn)物的吸收光譜Fig.4 UV-Vis spectra of end-products formed by sodium diethyldithiocarbamate cuprous method

結(jié)果表明，除乙基黃原酸和丙基黃原酸外，異丙基黃原酸和戊基黃原酸按照銅試劑亞銅分光光度法所得終產(chǎn)物與丁基黃原酸按照銅試劑亞銅分光光度法所得終產(chǎn)物最大吸收波長(zhǎng)均在436 nm處。由此可見(jiàn)，利用銅試劑亞銅分光光度法測(cè)定丁基黃原酸時(shí)，異丙基黃原酸和戊基黃原酸將會(huì)干擾測(cè)定。

5.2 紫外分光光度法

丁基黃原酸在波長(zhǎng)為301 nm處有最大吸收峰。當(dāng)pH<2時(shí)，丁基黃原酸完全分解，同時(shí)吸收峰消失。通過(guò)酸分解前后吸光度之間的差值可以得出丁基黃原酸的濃度。目前，該法也有相應(yīng)的環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)分析方法出臺(tái)[7]。筆者通過(guò)實(shí)驗(yàn)表明，丁基黃原酸、乙基黃原酸、丙基黃原酸、異丙基黃原酸和戊基黃原酸均在301 nm處有最大吸收峰，且酸分解后該吸收峰均消失，見(jiàn)圖5。因此，乙基黃原酸、丙基黃原酸、異丙基黃原酸和戊基黃原酸會(huì)干擾丁基黃原酸的測(cè)定。此外，賀心然等[15]研究表明，亞硫酸鹽、連二硫酸鹽、偏亞硫酸氫鹽在301 nm處沒(méi)有吸收峰，但是在加酸酸化后生成的二氧化硫在301 nm處有吸收峰，也給測(cè)定帶來(lái)干擾。

圖5 烴基黃原酸分解前后紫外吸收光譜Fig.5 UV spectra of alkyl xanthic acid before and after decomposition by acid

5.3 氣相色譜法/氣相色譜質(zhì)譜法

水中丁基黃原酸在酸性條件下分解產(chǎn)生CS2，通過(guò)氣相色譜或氣相色譜質(zhì)譜測(cè)定CS2可間接測(cè)定丁基黃原酸含量。栗穎明等[16]率先利用該性質(zhì)建立了頂部空間氣相色譜測(cè)定水中丁基黃原酸的方法。該法是以注射器為反應(yīng)器，將一定量的水樣注入該注射器，再加入硫酸，接著抽吸一定體積空氣形成頂部空間，用堵頭密封該注射器，搖勻后70 ℃水浴加熱1.5 h，最后吸取該注射器頂部空間的部分平衡蒸汽注入氣相色譜，火焰光度檢測(cè)器檢測(cè)，最低檢測(cè)濃度為0.3 μg/L。楊麗莉等[17]利用頂空-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀間接測(cè)定了水中丁基黃原酸。與傳統(tǒng)的分光光度法相比，該法簡(jiǎn)便、快捷，丁基黃原酸在0.010～1.00 mg/L范圍內(nèi)線性良好，樣品加標(biāo)回收率為95.1%～100.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.1%～6.5%，方法檢出限為0.002 mg/L。該課題組[18]也利用吹掃捕集/氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀間接測(cè)定了丁基黃原酸，該法在0.25～10.0 μg/L范圍內(nèi)線性良好，樣品加標(biāo)回收率為98.3%～105%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.92%～10.7%，方法檢出限為0.07 μg/L，比頂空法靈敏度更高。然而，烴基黃原酸酸分解后均能產(chǎn)生CS2，因此，利用CS2間接測(cè)定是不能區(qū)分烴基黃原酸的。另外，《水質(zhì) 丁基黃原酸的測(cè)定 吹掃捕集/氣相色譜-質(zhì)譜法》(HJ 896—2017)指出，吹掃捕集/氣相色譜-質(zhì)譜法不適合含鹽量高于25 g/L的高鹽工業(yè)廢水及存在代森鋅(錳)類農(nóng)藥或二乙基二硫代氨基甲酸鹽(如銅試劑)等物質(zhì)水樣丁基黃原酸的測(cè)定。

綜上，當(dāng)水樣檢出丁基黃原酸時(shí)，銅試劑亞銅分光光度法、紫外分光光度法、氣相色譜/氣相色譜質(zhì)譜間接測(cè)定法在選擇性方面均難以滿足丁基黃原酸準(zhǔn)確測(cè)定的要求，還需采用其他方法進(jìn)一步確認(rèn)。

5.4 離子色譜法

目前報(bào)道的測(cè)定丁基黃原酸的離子色譜法主要有2種方式，一種是離子色譜電導(dǎo)檢測(cè)法，一種是離子色譜紫外檢測(cè)法。由于《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB 3838—2002)和《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 5749—2006)中對(duì)丁基黃原酸的限值較為嚴(yán)格。因此，在采用離子色譜法測(cè)定水中丁基黃原酸時(shí)通常要采取大體積進(jìn)樣方式來(lái)降低方法檢出限。方黎等[10]以IonPac AS20柱為分離柱，30 mmol/L NaOH為淋洗液，1.0 mL/min流速，電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)丁基黃原酸。當(dāng)進(jìn)樣1 mL時(shí)，丁基黃原酸在5～200 μg/L濃度范圍呈良好線性關(guān)系，方法檢出限為2.0 μg/L。李仁勇[19]采用IonPac AS16柱為分離柱，125 mmol/L NaOH為淋洗液，0.5 mL/min流速，301 nm紫外檢測(cè)丁基黃原酸。當(dāng)進(jìn)樣500 μL時(shí)，丁基黃原酸在0.5～1 000 μg/L寬濃度范圍呈良好線性關(guān)系，方法檢出限為0.1 μg/L，達(dá)到或者優(yōu)于一些色譜質(zhì)譜法[9,17]的檢出限，而且在8 min內(nèi)就可以完成分離，常見(jiàn)共存陰離子并不干擾測(cè)定。然而，這些方法中都沒(méi)有考察其他黃原酸的干擾問(wèn)題。朱紅霞等[20]以IonPac AS20柱為分離柱，采用多步梯度淋洗方式分離了水中乙基黃原酸鉀、異丙基黃原酸鉀、丁基黃原酸鉀、異丁基黃原酸鉀、戊基黃原酸鉀和異戊基黃原酸鉀6種黃原酸鹽。進(jìn)樣500 μL時(shí)，丁基黃原酸鹽的檢出限為0.003 mg/L。但該法中需要淋洗液發(fā)生器能支持多步梯度，而一些水質(zhì)監(jiān)測(cè)部門(mén)配備的離子色譜儀淋洗液發(fā)生器并不支持多步梯度淋洗。筆者嘗試采用等度淋洗方式對(duì)常見(jiàn)烴基黃藥進(jìn)行分離，具體是以IonPac AS20柱為分離柱，40 mmol/L KOH等度淋洗，1.0 mL/min流速，電導(dǎo)檢測(cè)，色譜圖見(jiàn)圖6。結(jié)果表明，所選實(shí)驗(yàn)條件下，常見(jiàn)陰離子(氟離子、氯離子、硫酸根、硝酸根、磷酸根)，乙基黃原酸，丙基黃原酸，異丙基黃原酸，戊基黃原酸并不干擾丁基黃原酸的測(cè)定。特別需要說(shuō)明的是，由于實(shí)驗(yàn)條件限制，并沒(méi)有考察異丁基黃原酸和異戊基黃原酸對(duì)丁基黃原酸的干擾。

注：峰a.異丙基黃原酸；峰b.乙基黃原酸；峰c.丙基黃原酸；峰d.丁基黃原酸；峰e(cuò).戊基黃原酸。圖6 烴基黃原酸離子色譜Fig.6 Ion chromatograms of alkyl xanthic acid

5.5 液相色譜法

黃原酸根極性較強(qiáng)，在非極性色譜柱上保留較弱，有可能會(huì)受基質(zhì)的干擾。為解決黃原酸根保留弱的問(wèn)題，ZHOU等[21]采取柱前衍生的方法將其轉(zhuǎn)化成雙黃原酸或者金屬絡(luò)合物，使其電荷部分屏蔽，極性減弱，疏水性增強(qiáng)，這些分子在常見(jiàn)的反相固定相上就有適中的吸附力。同時(shí)，由于分子基團(tuán)和分子間碳原子數(shù)差別增大而有利于色譜分離。但研究表明，無(wú)論是借助雙黃原酸或金屬絡(luò)化物，所得到的不只是這些黃原酸各自形成的、碳鏈對(duì)稱的色譜峰，而且伴有交錯(cuò)形成的非對(duì)稱碳鏈的色譜峰，致使色譜圖變得很復(fù)雜，需要復(fù)雜的計(jì)算過(guò)程進(jìn)行分析。近年來(lái)，也有利用反相液相色譜直接進(jìn)樣分析丁基黃原酸的報(bào)道。彭濤等[22]采用直接進(jìn)樣-超高效液相色譜分離-紫外吸收檢測(cè)方式測(cè)定了地表水中丁基黃原酸。該法以0.050 mol/L乙酸銨溶液(pH用氨水調(diào)至約9.5)∶乙腈=80∶20等度洗脫，Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱(50 mm×2.1 mm，1.7 μm)分離，301 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，進(jìn)樣10 μL時(shí)，丁基黃原酸在0.5～20.0 μg/L濃度范圍內(nèi)線性良好，方法檢出限為0.8 μg/L，2 min內(nèi)就可以完成一個(gè)樣品分析。張凌云[23]以Agilent ZONREAX Bonus-RP(150 mm×4.6 mm，5 μm)為液相色譜柱，采取與文獻(xiàn)[22]同樣的流動(dòng)相和檢測(cè)波長(zhǎng)，進(jìn)樣30 μL時(shí)，丁基黃原酸在2～100 μg/L濃度范圍內(nèi)線性良好，方法檢出限為0.7 μg/L。圖5表明，烴基黃原酸在301 nm處均有最大吸收波長(zhǎng)，而前述2個(gè)直接進(jìn)樣液相色譜分析方法并沒(méi)有討論在所選色譜分離條件下其他烴基黃原酸對(duì)丁基黃原酸分析的干擾。筆者采用文獻(xiàn)[22]報(bào)道的色譜分離條件，考察該色譜分離條件下烴基黃原酸的分離情況，流動(dòng)相為20%乙腈-80% 0.05 mol/L乙酸銨溶液(pH為9.5)。由于實(shí)驗(yàn)室設(shè)備僅配備了質(zhì)譜檢測(cè)器，沒(méi)有配備紫外檢測(cè)器，于是采用質(zhì)譜檢測(cè)方式，結(jié)果見(jiàn)圖7。

圖7 烴基黃原酸總離子流Fig.7 TIC chromatograms of alkyl xanthic acid

同時(shí)，保持文獻(xiàn)[22]其他色譜分離條件不變，將流動(dòng)相中的乙酸銨溶液換成pH相同的氨水溶液，即流動(dòng)相為20%乙腈-80%氨水溶液(pH為9.5)。并在此條件下采集幾種烴基黃原酸的總離子流圖，見(jiàn)圖8。

圖8 等度洗脫模式下的烴基黃原酸總離子流Fig.8 TIC chromatograms of alkyl xanthic acid achieved by isocratic elution program

將圖7與圖8對(duì)比，可知流動(dòng)相中乙酸銨的加入抑制了烴基黃原酸的質(zhì)譜信號(hào)且峰型不理想，但保留時(shí)間分布還是有較大區(qū)別，可見(jiàn)文獻(xiàn)[22]的分析條件下，乙基黃原酸、丙基黃原酸、異丙基黃原酸和戊基黃原酸并不干擾丁基黃原酸的測(cè)定。但從丙基黃原酸和異丙基黃原酸的保留時(shí)間分布區(qū)域來(lái)看，兩者保留時(shí)間位于同一區(qū)域。而圖8顯示，氨水溶液(pH為9.5)∶乙腈=80∶20等度洗脫模式下，幾種烴基黃原酸的保留時(shí)間都很短，且丙基黃原酸和異丙基黃原酸的保留時(shí)間相同，丁基黃原酸和戊基黃原酸的保留時(shí)間也相同。對(duì)比圖8與圖2可以發(fā)現(xiàn)，圖2中工業(yè)品丁基黃原酸峰旁邊出現(xiàn)的峰(保留時(shí)間為0.98 min)并沒(méi)有在圖8中出現(xiàn)?？梢?jiàn)，氨水溶液(pH為9.5)∶乙腈=80∶20等度洗脫模式下，丁基黃原酸的紫外吸收檢測(cè)會(huì)受到圖2中保留時(shí)間(0.98 min)對(duì)應(yīng)物質(zhì)的干擾以及戊基黃原酸的干擾。

5.6 液相色譜質(zhì)譜法

近年來(lái)，液相色譜質(zhì)譜儀因其靈敏度高、選擇性好等優(yōu)點(diǎn)發(fā)展相當(dāng)迅速，并且隨著環(huán)境監(jiān)測(cè)部門(mén)儀器裝備水平的提高，在環(huán)境監(jiān)測(cè)和分析領(lǐng)域應(yīng)用廣泛[24-26]。楊坪[27]率先將液相色譜-質(zhì)譜應(yīng)用于丁基黃原酸的測(cè)定，該法直接進(jìn)樣20 μL，丁基黃原酸在0.05～100 μg/L范圍內(nèi)線性良好，方法檢出限為0.05 μg/L，加標(biāo)濃度為0.05～100 μg/L時(shí)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<4%，回收率為89%～107%。劉景泰等[28]利用超高效液相色譜質(zhì)譜測(cè)定了地表水中丁基黃原酸。該法以氨水溶液(pH約為9.5)∶乙腈=80∶20等度洗脫，Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱(50 mm×2.1 mm，1.7 μm)分離，三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式分析，當(dāng)直接進(jìn)樣10 μL時(shí)，丁基黃原酸在0.5～50.0 μg/L濃度范圍內(nèi)線性良好，方法檢出限為0.2 μg/L，空白樣品中加標(biāo)2.0 μg/L丁基黃原酸，回收率為90%以上。目前，《水質(zhì) 丁基黃原酸的測(cè)定 液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法》[9]已頒布實(shí)施。該方法中流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為氨水溶液(pH約為9.5)，乙腈初始比例為20%，保持1.5 min，1 min內(nèi)升高到90%，保持1 min，0.5 min內(nèi)降為20%，保持2 min。筆者采用《水質(zhì) 丁基黃原酸的測(cè)定 液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法》[9]中的分離條件考察了幾種烴基黃原酸的分離情況，結(jié)果見(jiàn)圖9。

圖9 梯度洗脫模式下的烴基黃原酸總離子流Fig.9 TIC chromatograms of alkyl xanthic acid achieved by gradient elution program

在此分離條件下，丁基黃原酸、戊基黃原酸色譜行為一致，保留時(shí)間均為0.56 min，出峰較快，事實(shí)上丁基黃原酸和戊基黃原酸色譜峰出完時(shí)，流動(dòng)相還是20%A～80%B等度，即幾種烴基黃原酸色譜分離時(shí)并沒(méi)有發(fā)揮梯度洗脫的作用。筆者對(duì)該方法中的流動(dòng)相梯度進(jìn)行改進(jìn)。在改進(jìn)的流動(dòng)相梯度下，目標(biāo)物丁基黃原酸與乙基黃原酸、丙基黃原酸、異丙基黃原酸和戊基黃原酸得到了很好的分離。對(duì)比圖9與圖2中的丁基黃原酸總離子流圖還可以發(fā)現(xiàn)，圖2中工業(yè)品丁基黃原酸峰旁邊出現(xiàn)的峰(保留時(shí)間0.98 min)并沒(méi)有在圖9中出現(xiàn)，由此看來(lái)，《水質(zhì) 丁基黃原酸的測(cè)定 液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法》[9]中的流動(dòng)相分離條件也不能將圖2中保留時(shí)間為0.98 min對(duì)應(yīng)的物質(zhì)與丁基黃原酸分離開(kāi)。鑒于丁基黃原酸在反相固定相上保留弱，且易受到共存黃原酸干擾等問(wèn)題，筆者推薦采用梯度方法進(jìn)行液相色譜分離，初始流動(dòng)相組成中有機(jī)相比例不宜過(guò)高，以增強(qiáng)丁基黃原酸在反相固定相上的保留。另外，液相色譜質(zhì)譜分析中很容易受到樣品基質(zhì)的干擾，使得待測(cè)物信號(hào)受到抑制或增強(qiáng)。因此，復(fù)雜基體中丁基黃原酸的分析仍是液相色譜質(zhì)譜分析法面臨的難點(diǎn)。

6 總結(jié)及展望

正確區(qū)分丁基黃原酸及其鹽，有效保存樣品，采用低損失的前處理方法以及選擇性好的分析儀器，有利于提高丁基黃原酸測(cè)定的準(zhǔn)確性。建議《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB 3838—2002)和《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 5749—2006)中明確丁基黃原酸以C4H9OCSSH計(jì)。水樣采集后應(yīng)調(diào)節(jié)pH至9～10，并盡快分析，最長(zhǎng)不超過(guò)1 d。水樣過(guò)濾首選PTFE材質(zhì)濾膜。當(dāng)水樣檢出丁基黃原酸時(shí)，銅試劑亞銅分光光度法、紫外分光光度法、氣相色譜/氣相色譜質(zhì)譜間接測(cè)定法在選擇性方面均不能滿足丁基黃原酸準(zhǔn)確測(cè)定的要求，需要借助液相色譜質(zhì)譜法、離子色譜法以及液相色譜法等方法進(jìn)一步確認(rèn)。

通過(guò)對(duì)水質(zhì)丁基黃原酸測(cè)定難點(diǎn)探討，展望未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)如下：

1)高純度丁基黃原酸標(biāo)準(zhǔn)品以及配套內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的研制。

2)標(biāo)準(zhǔn)文件以及標(biāo)準(zhǔn)分析方法本身需再完善，尤其是復(fù)雜基體情況下分析方法選擇性和靈敏度的提升。

3)低損失的丁基黃原酸樣品富集技術(shù)的研究，以滿足水質(zhì)丁基黃原酸監(jiān)測(cè)對(duì)靈敏度的需要。

4)液相色譜質(zhì)譜法、離子色譜法以及液相色譜法操作簡(jiǎn)便、選擇性好、靈敏度高，在水質(zhì)丁基黃原酸測(cè)定方面具有更好的應(yīng)用前景。分光光度法、氣相色譜/氣相色譜質(zhì)譜間接測(cè)定法與液相色譜質(zhì)譜法、離子色譜法、液相色譜法配合使用將是提升水質(zhì)丁基黃原酸監(jiān)測(cè)準(zhǔn)確性的重要途徑之一。

致謝：感謝攀枝花市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站陳美芳教授級(jí)高級(jí)工程師和四川省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)總站趙云芝高級(jí)工程師對(duì)研究工作的指導(dǎo)。