陶柏樺

慢性萎縮性胃炎為消化系統(tǒng)常見病，指胃黏膜上皮和固有腺體萎縮導(dǎo)致黏膜變薄，嚴(yán)重者甚至消失，引起黏膜肌層增厚，且常伴有腸上皮化生、炎癥反應(yīng)及不典型性增生[1]。臨床以胃脘部飽脹不適為主，伴有反酸、惡心嘔吐、燒心嘈雜等癥狀[2]。慢性萎縮性胃炎在我國發(fā)病率較高，且隨年齡增長發(fā)病率升高，WHO 將其列為胃癌前狀態(tài)[3]。西醫(yī)以對癥治療、緩解慢性萎縮性胃炎癥狀為主，中醫(yī)治療慢性萎縮性胃炎具有一定優(yōu)勢。本研究擬觀察健脾益氣方對慢性萎縮性胃炎患者胃黏膜組織的影響并探討其作用機(jī)制，評價(jià)臨床療效。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2017年12月～2018年12月我科收治的經(jīng)胃鏡及病理檢查確診的100 例慢性萎縮性胃炎患者；均符合脾胃虛弱證辨證分型標(biāo)準(zhǔn)[4]；患者神志清楚，具有較好的臨床依從性。本研究經(jīng)本院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)且均簽署知情同意書。排除合并嚴(yán)重心腦肝腎等重要臟器功能障礙者；曾有過相關(guān)治療或正參加其他藥物臨床試驗(yàn)者。采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者隨機(jī)分為兩組，每組50 例。兩組患者基線資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

表1 兩組患者基線資料比較

1.2 治療方法 對照組口服奧美拉唑腸溶膠囊（常州四藥制藥有限公司，批號20160516），20mg/次，2 次/d。觀察組口服自擬健脾益氣方（黨參30g、茯苓20g、廣木香15g、白術(shù)15g、砂仁15g、白芍20g、法半夏15g、大棗10g、陳皮20g、干姜10g、甘草6g，若見煩躁易怒、頭暈、舌紅、脈弦等肝陽上亢癥狀者加菊花10g、熟地黃15g、枸杞子10g、山藥15g；若見神疲乏力、腰膝酸軟、舌質(zhì)淡、脈沉細(xì)等腎精虧虛癥狀者加熟地黃10g、生地黃10g、杜仲15g、麥冬10g、龜甲15g；若默默不語、形體肥胖、舌質(zhì)淡滑、脈濡細(xì)等痰濕蒙閉癥狀者加法半夏8g、膽南星10g、橘紅10g、枳實(shí)10g），1 劑/d，水煎取汁約200ml，分早晚兩次溫服。治療期間停用其他治療藥物。兩組均治療8 周后觀察療效。

1.3 觀察指標(biāo) ①臨床癥狀評分：分別于治療前后進(jìn)行臨床癥狀評分，其中以胃、脅肋脹，隱痛，喜按喜暖為主癥，按其嚴(yán)重程度分為無，輕、中、重度分別計(jì)0、3、6、9分，以大便稀溏、食后脘悶、乏力、飲食減少、反酸、氣短、懶言、胃中嘈雜、嘔吐清水為次要癥狀，按其嚴(yán)重程度分為無，輕、中、重度分別計(jì)0、1、2、3分，分值越高癥狀越重。②蛋白檢測：治療后，取患者胃黏膜組織標(biāo)本，采用ELISA 法檢測胃黏膜增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、Bcl-2、TNF-α。③胃組織PCNA、Bcl-2 mRNA 檢測：治療后，采用RT-qPCR 法檢測胃組織中PCNA、Bcl-2 mRNA；采用Trizol 法檢測總RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA。cDNA 產(chǎn)物稀釋10 倍后用于qPCR。qPCR反應(yīng)體系為20μl，反應(yīng)條件為：95℃，30s；95℃，5s；60℃，30s；共設(shè)置重復(fù)40 個(gè)循環(huán)；95℃ 15s，60℃ 1min，95℃ 15s 熔解曲線；引物序列見表2。

表2 PCNA、Bcl-2 基因的引物序列

1.4 療效判定標(biāo)準(zhǔn) ①臨床療效：依據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則（試行）》中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合癥狀積分改善情況制定。痊愈：主次癥狀均消失，癥狀積分減少＞95%；顯效：主次癥狀基本消失，癥狀積分減少60%～95%；有效：主次癥狀好轉(zhuǎn)，癥狀積分減少30%～59%；無效：主次癥狀無改善甚至加重，癥狀積分減少＜30%。②胃鏡療效：依據(jù)胃鏡檢測結(jié)果制定，痊愈：潰瘍完全消失，局部輕度充血，無明顯水腫；顯效：潰瘍基本消失，仍有明顯炎癥；有效：潰瘍面縮小≥50%；無效：潰瘍面縮?。?0%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以±s表示，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，等級資料用秩和檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較 觀察組總有效率為92.0%（46/50）、對照組為80.0%（40/50），兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=9.623，P=0.031），見表3。

2.2 兩組胃鏡療效比較 對照組總有效率為74.0%（37/50）、觀察組為94.0%（47/50），兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=11.254，P=0.026），見表4。

2.3 兩組治療后胃黏膜組織蛋白檢測結(jié)果比較 治療后，觀察組胃黏膜組織PCNA、Bcl-2、TNF-α 的蛋白水平較對照組明顯降低，見表5。

2.4 兩組治療后胃黏膜組織PCNA、Bcl-2 mRNA 檢測結(jié)果比較 治療后，觀察組PCNAmRNA、Bcl-2 mRNA 表達(dá)顯著低于對照組，見表6。

表3 兩組患者臨床療效比較[n（%）]

表4 兩組患者胃鏡療效比較[n（%）]

表5 兩組患者胃黏膜組織PCNA、Bcl-2、TNF-α 蛋白水平檢測結(jié)果比較（μg/mg，±s）

表5 兩組患者胃黏膜組織PCNA、Bcl-2、TNF-α 蛋白水平檢測結(jié)果比較（μg/mg，±s）

組別 例數(shù) PCNA Bcl-2 TNF-α觀察組 50 4.36±1.95 3.06±1.63 4.13±1.86對照組 50 8.62±2.43 7.54±1.73 7.29±2.14 t 8.465 9.316 9.473 P 0.003 0.025 0.019

表6 兩組患者胃黏膜組織PCNAmRNA、Bcl-2 mRNA檢測結(jié)果比較（±s）

表6 兩組患者胃黏膜組織PCNAmRNA、Bcl-2 mRNA檢測結(jié)果比較（±s）

組別 例數(shù) PCNA mRNA Bcl-2 mRNA觀察組 50 0.053±0.033 0.004±0.003對照組 50 0.074±0.023 0.006±0.002 t 2.316 5.842 P 0.027 0.034

3 討論

慢性萎縮性胃炎為消化系統(tǒng)常見病，也是癌前病變狀態(tài)，其發(fā)病是多個(gè)病因、多種階段、多種基因逐漸變異共同積累的過程[5]，西醫(yī)治療多從痞滿、胃脘痛、胃脹痛等方面著手。慢性萎縮性胃炎依據(jù)其臨床表現(xiàn)屬中醫(yī)“胃脘痛”“脘痞”等范疇[6]，多為感受外邪、內(nèi)傷飲食、情志失調(diào)、體虛等綜合因素長期發(fā)展而成。病機(jī)為氣陰不足、胃腑失養(yǎng)、氣機(jī)失和，治以健脾益氣、養(yǎng)陰和胃。健脾益氣方源于《古今名醫(yī)方論》中“香砂六君湯”，主治脾胃氣虛、痰阻氣滯證。方中黨參味甘、平，健脾補(bǔ)氣；陳皮味苦、辛，利肺金氣；白術(shù)味苦、甘，培養(yǎng)中宮；半夏味辛、微苦，燥濕化痰；茯苓味甘、淡，清理治節(jié)；木香味辛、苦，行滯氣；甘草味甘，調(diào)和五臟；大棗性溫，味甘，健脾和胃；砂仁性溫，味辛，通脾腎氣。諸藥合用，元?dú)獯笳?，相得益彰，可見健脾益氣方之功效?/p>

正常的胃黏膜上皮完整性有賴于細(xì)胞增殖與凋亡的動(dòng)態(tài)平衡，在慢性萎縮性胃炎病變過程中，細(xì)胞的凋亡與增殖及其調(diào)控基因發(fā)揮著重要作用。PCNA、Bcl-2、TNF-α是反映胃黏膜病變趨勢的重要指標(biāo)。PCNA 僅在增殖細(xì)胞中合成，其表達(dá)及合成反映細(xì)胞的增殖能力。Bcl-2 是一種原癌基因，其作用機(jī)理是通過阻斷細(xì)胞凋亡的公共信號傳遞通路，達(dá)到抑制或阻斷多種細(xì)胞、細(xì)胞系的細(xì)胞凋亡過程[4，7，8]。TNF-α為炎性細(xì)胞因子，是調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、代謝過程的多功能性細(xì)胞因子。TNF-α可促炎癥區(qū)的白細(xì)胞積聚，甚至是激活，然后釋放細(xì)胞介質(zhì)[4，8～11]。TNF-α上調(diào)血管內(nèi)皮的黏附分子，造成白細(xì)胞黏附、收縮，引起毛細(xì)血管滲漏，造成組織損害。因而臨床可根據(jù)患者胃黏膜組織中PCNA、Bcl-2、TNF-α 蛋白表達(dá)情況對慢性萎縮性胃炎早期病變作出診斷。

本研究較為客觀地評價(jià)了健脾益氣方對慢性萎縮性胃炎患者的臨床有效性，進(jìn)一步說明了甘平或甘涼濡潤以養(yǎng)胃陰的治療方法適用于慢性萎縮性胃炎的治療。其作用機(jī)制可能是通過抑制PCNA、Bcl-2 蛋白及mRNA 的表達(dá)，降低PCNA、Bcl-2、TNF-α 的蛋白水平發(fā)揮治療作用。