張華文，王潤(rùn)豐，徐夢(mèng)平，劉賓，陳二影，黃瑞冬，周宇飛，王海蓮

根際鹽分差異性分布對(duì)高粱幼苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響

張華文1,3，王潤(rùn)豐1,3，徐夢(mèng)平1,3，劉賓1,3，陳二影1,3，黃瑞冬2，周宇飛2，王海蓮1,3

（1山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所，濟(jì)南 250100；2沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，沈陽(yáng) 110866；3山東省特色作物工程實(shí)驗(yàn)室，濟(jì)南 250100）

【】鹽堿地鹽分含量在土壤表層的分布通常是不均勻的，研究不均勻鹽脅迫條件下高粱幼苗生長(zhǎng)發(fā)育和生理生化指標(biāo)的變化，可為鹽堿地高粱栽培和鹽堿地高效開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。利用分根法將高粱根系均勻分成2部分，并分別置于不同濃度（mmol·L-1）NaCl中，設(shè)置對(duì)照為無(wú)鹽脅迫（記作0/0，下同）、不均勻鹽處理（0/200、50/150）和均勻鹽處理（100/100），在人工氣候室培養(yǎng)14 d后取樣，測(cè)量生物量、葉面積、SPAD值、根系形態(tài)、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)、抗氧化酶活性和光合參數(shù)等性狀，研究分根鹽脅迫條件下高粱生長(zhǎng)發(fā)育的變化規(guī)律。不均勻鹽脅迫和均勻鹽脅迫均嚴(yán)重影響了高粱幼苗的生長(zhǎng)發(fā)育，顯著降低了高粱幼苗鮮重、干重和葉面積，對(duì)葉片的光合能力、抗氧化酶活性和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)均有一定程度的影響。然而，不均勻鹽處理50/150和0/200的單株干重比均勻鹽處理提高了21.19%和62.71%，單株鮮重提高了35.39%和86.44%，葉面積提高了13.22%和88.66%；50/150處理低鹽一側(cè)根系鮮重和干重分別是高鹽一側(cè)的1.90倍和2.10倍，0/200處理無(wú)鹽一側(cè)根系鮮重和干重分別是鹽脅迫一側(cè)的3.02倍和3.75倍。同樣，不均勻鹽處理對(duì)局部根系形態(tài)影響顯著，低鹽或無(wú)鹽一側(cè)根系生長(zhǎng)明顯增加，50/150和0/200處理低鹽一側(cè)的根系長(zhǎng)度、根系體積、根尖數(shù)和分支數(shù)顯著高于高鹽或有鹽脅迫一側(cè)根系，進(jìn)而不均勻鹽脅迫條件下整個(gè)根系的根系長(zhǎng)度、根系體積、根尖數(shù)和分支數(shù)都高于均勻鹽脅迫處理，其中0/200處理的各項(xiàng)指標(biāo)與均勻鹽處理差異均達(dá)到顯著性水平（＜0.05）。葉片超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）和過(guò)氧化物酶（POD）活性在不均勻鹽脅迫條件下顯著升高（＜0.05）；不均勻鹽處理的葉片滲透調(diào)節(jié)性物質(zhì)脯氨酸（PRO）和可溶性糖（SS）含量顯著高于均勻鹽處理，丙二醛（MDA）含量顯著下降（＜0.05）。不均勻鹽處理?xiàng)l件下植株光合能力相對(duì)于均勻鹽處理也得到顯著改善，主要體現(xiàn)在顯著升高的光合速率（n）、氣孔導(dǎo)度（s）和蒸騰速率（r）；相較于均勻鹽處理，在不均勻鹽處理?xiàng)l件下50/150、0/200的熒光參數(shù)實(shí)際光化學(xué)效率（ΦPSⅡ）、最大光化學(xué)效率（Fv/Fm）和電子傳遞效率（ETR）分別提高了5.64%和19.00%、9.25%和18.89%、1.93%和6.89%，其中0/200處理的ΦPSⅡ和Fv/Fm與100/100處理的差異達(dá)到顯著性水平（＜0.05）。不均勻鹽處理和均勻鹽處理對(duì)高粱幼苗生長(zhǎng)均產(chǎn)生抑制，但在不均勻鹽脅迫條件下，由于低鹽或無(wú)鹽一側(cè)根系補(bǔ)償性增長(zhǎng)，整個(gè)根系形態(tài)得到改善，葉片抗氧化酶活性、滲透調(diào)節(jié)能力和光合能力均有一定程度提高，因而緩解鹽脅迫對(duì)高粱幼苗的危害。

高粱；分根；不均勻鹽處理；光合參數(shù)；熒光參數(shù)

0 引言

【研究意義】高粱（(L.) Moench）是世界上最重要的谷類糧食作物之一，也是中國(guó)的重要糧食作物、飼用作物和能源作物，具有耐鹽堿、耐旱、耐澇、耐貧瘠等多重抗性。目前，高粱主要分布于鹽堿、干旱等邊際性土地，在鹽堿地區(qū)種植高粱，有利于鹽堿土壤的利用和改良，對(duì)擴(kuò)大耕地面積、增加農(nóng)民收入、保障糧食安全具有重要意義。由于鹽漬土的形成受多種自然因素和人為因素的影響，鹽堿地鹽分在土壤表層的分布通常是不均勻的[1]，這種土壤表層的不均勻分布造成同一單株的根系分布在不同鹽分濃度的土壤環(huán)境中，不僅影響地上部的生長(zhǎng)發(fā)育，而且顯著地影響根系的生長(zhǎng)發(fā)育和生理特性，進(jìn)而影響作物的產(chǎn)量和品質(zhì)[2-3]。因此，研究根際鹽分差異性分布對(duì)高粱生長(zhǎng)的影響，探索高粱耐鹽機(jī)理，對(duì)改善局部鹽脅迫程度的高粱種植模式具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】鹽脅迫對(duì)植物影響的報(bào)道主要在鹽分均勻條件下進(jìn)行的[4-5]，研究發(fā)現(xiàn)鹽脅迫對(duì)植物的影響主要包括滲透脅迫、離子毒害、活性氧增加和Na+/K+失調(diào)，進(jìn)而導(dǎo)致新陳代謝失調(diào)、生長(zhǎng)緩慢、甚至死亡[6-8]。也有部分作物（如番茄、黃瓜、苜蓿、葡萄、棉花等）通過(guò)分根鹽處理研究鹽分差異性分布對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育的影響[9-16]，發(fā)現(xiàn)不均勻鹽脅迫下，植物的生物量高于均勻鹽脅迫下植物的生物量，植物主要是通過(guò)低鹽一側(cè)大量吸收水分來(lái)緩解鹽脅迫造成的生理干旱[16-18]；也有研究表明，根系在非脅迫區(qū)域大量的增殖，特別是細(xì)根在無(wú)鹽脅迫區(qū)的增加，可以促進(jìn)水分吸收，緩解鹽脅迫[19]。鹽脅迫通常會(huì)破壞植物代謝過(guò)程，降低植物光合效率[20]，但不均勻鹽脅迫提高了植物的氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率[18,21-22]。不均勻鹽脅迫比均勻鹽脅迫可明顯減少Na＋在棉花、葡萄體內(nèi)的積累，增加對(duì)Ｋ＋的吸收，有效緩解鹽害[2,16,23-24]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】近年來(lái)，通過(guò)不均勻鹽脅迫研究植物耐鹽性已經(jīng)成為一種重要手段[1,25]，雖然國(guó)內(nèi)外對(duì)高粱耐鹽性開(kāi)展了大量研究，但無(wú)論是從耐鹽種質(zhì)的篩選和鑒定，還是遺傳改良及耐鹽栽培生理等研究，都是在鹽分均勻條件下進(jìn)行的[26]，鹽分差異性分布對(duì)高粱耐鹽性影響的研究還鮮見(jiàn)報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本研究通過(guò)分根試驗(yàn)將根系處于不同鹽濃度條件下研究鹽分差異分布對(duì)高粱幼苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響，并通過(guò)分析光合參數(shù)、熒光參數(shù)、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和抗氧化酶活性等生理指標(biāo)研究鹽分差異分布能夠緩解高粱苗期鹽脅迫的生理機(jī)制，從而為鹽堿地高粱栽培和高效開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與處理

試驗(yàn)材料為山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所自主選育的高粱雜交種濟(jì)粱1號(hào)。高粱根系由初生根、次生根和支持根組成，初生根由胚根發(fā)育形成，只有1條。如果由于種子受到機(jī)械損傷，在盾片著生部位能長(zhǎng)出少數(shù)短而細(xì)的根，稱為初生不定根，初生根和初生不定根統(tǒng)稱為種子根，高粱幼苗四葉后才開(kāi)始長(zhǎng)次生根。高粱要進(jìn)行苗期分根試驗(yàn)，就必須切掉初生根，使其盡早長(zhǎng)出不定根，以便進(jìn)行分根試驗(yàn)。

挑取整齊一致的高粱種子，用70%的酒精浸泡2 min，蒸餾水沖洗3遍，轉(zhuǎn)到鋪有2層濾紙、直徑為100 mm的玻璃培養(yǎng)皿中，加入6 mL蒸餾水，封口后放入光照培養(yǎng)箱。待種子根長(zhǎng)度為0.8—1.2 cm時(shí)，用醫(yī)用手術(shù)刀從初生根基部切去初生根，然后將切根的種子進(jìn)行沙培，沙子滅菌處理后裝在育苗盤(pán)中，澆灌1/2Hoagland營(yíng)養(yǎng)液，把種子擺好（根向下），上層覆蓋1 cm厚的濕潤(rùn)沙子，期間澆灌1次Hoagland營(yíng)養(yǎng)液，并給予適當(dāng)干旱鍛煉，以促進(jìn)根系的發(fā)育。培養(yǎng)箱條件：光照14 h，27℃，光照強(qiáng)度10 000 lx；黑暗10 h，22℃，光照強(qiáng)度0。三葉期，將高粱苗小心挖出，沖掉沙子，在水中將根系對(duì)等分為2份，分根移栽到中間有隔斷的塑料盒中，每盒5株，水培培養(yǎng)條件為溫度26℃—29℃，濕度65%—75%，緩苗6—8 d，檢查根系的發(fā)育情況，將兩側(cè)根系發(fā)育均勻、幼苗大小一致的3株留作試驗(yàn)材料，其余淘汰掉。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)共設(shè)計(jì)4個(gè)處理，每個(gè)處理重復(fù)12次。配置50、100、150和200 mmol·L-1NaCl溶液。一部分高粱幼苗的兩部分根用同一濃度的NaCl溶液處理，形成在兩側(cè)的均勻鹽處理（100/100）；另一部分幼苗一側(cè)根用低濃度NaCl溶液，另一側(cè)用高濃度NaCl溶液，形成在兩側(cè)根部的不均勻鹽處理（50/150、0/200）。無(wú)論均勻鹽處理還是不均勻鹽處理，根區(qū)的平均NaCl濃度都為100 mmol·L-1，鹽脅迫14 d后，對(duì)相關(guān)性狀進(jìn)行測(cè)定，取樣用于生理生化指標(biāo)分析。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定 將高粱幼苗從分根塑料盒中完整取出，分別對(duì)根系和地上部分采樣，清理干凈，測(cè)定鮮重。然后把樣品放在105℃烘箱殺青30 min，再于80℃烘干至恒重，稱其干重。用直尺測(cè)定葉長(zhǎng)和葉寬，并乘以校正系數(shù)0.72計(jì)算葉面積[27]。

1.3.2 葉片SPAD值的測(cè)定 用便攜式葉綠素儀（SPAD-502Plus）測(cè)量新展開(kāi)3個(gè)葉片的SPAD（soil and plant analyzer development）值。

1.3.3 葉片抗氧化酶活性和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的測(cè)定 采用氮藍(lán)四唑法測(cè)定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性，采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定過(guò)氧化物酶（peroxidase，POD）活性[28]。采用紫外吸收法檢測(cè)過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）活性，采用蒽酮比色法測(cè)定可溶性糖（soluble sugar，SS）含量[29]。采用硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，采用酸性茚三酮法測(cè)定脯氨酸（proline，PRO）含量[30]。所有試劑盒均購(gòu)自蘇州科銘生物技術(shù)公司。

1.3.4 根系形態(tài)的測(cè)定 將高粱幼苗從分根塑料盒中取出，清理干凈，用WinRHIZO植物根系分析測(cè)定儀掃描根系，并用其根系分析軟件對(duì)根系長(zhǎng)度、體積、根尖記數(shù)和分支計(jì)數(shù)等進(jìn)行分析。

1.3.5 光合參數(shù)的測(cè)定 每個(gè)處理選6株長(zhǎng)勢(shì)一致的植株，置于太陽(yáng)光下激活2 h，用Li-6400便攜式光合儀（Li-CORInc, USA）于晴天上午9：00—11：00對(duì)各植株最新展開(kāi)葉片的光合速率、氣孔導(dǎo)度、細(xì)胞間隙CO2濃度和蒸騰速率進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定光源為紅藍(lán)人工光源，光照強(qiáng)度1 000 μmol·(m-2s-1)。

1.3.6 熒光參數(shù)的測(cè)定 用英國(guó)Hansatech公司產(chǎn)FMS-2型熒光儀，于晴天上午9：00—11：00，每個(gè)處理選6株長(zhǎng)勢(shì)一致的植株，置于太陽(yáng)光下2 h，測(cè)定最新展開(kāi)葉片最大光化學(xué)效率（optimal/maximal PSⅡefficiency，F(xiàn)v/Fm）、實(shí)際光化學(xué)效率（actual photochemical efficiency of PSⅡ，ФPSⅡ）和電子傳遞效率（electron transportation rate，ETR）。

1.4 數(shù)據(jù)分析和數(shù)據(jù)可視化

采用Microsoft Excel（ver.2010）對(duì)采集的原始數(shù)據(jù)初步整理和作圖，運(yùn)用Minitab（ver. 18.0）中的混合線性模型（mixed linear model）進(jìn)行方差分析（analysis of variance）。

2 結(jié)果

2.1 分根鹽處理對(duì)高粱幼苗農(nóng)藝性狀的影響

從表1可以看出，鹽脅迫均顯著降低了高粱幼苗鮮重和干重，與對(duì)照相比，100/100、50/150和0/200處理單株鮮重分別降低了55.78%、40.13%和17.55%，單株干重分別比對(duì)照降低了44.86%、33.18%和10.28%。但是，與100/100處理相比，不均勻鹽處理50/150和0/200的地上部分鮮重分別提高了23.58%和102.20%，根系鮮重分別提高了49.82%和63.10%，單株鮮重分別提高了35.39%和86.44%；不均勻鹽處理50/150和0/200比均勻鹽處理100/100地上部分干重增加了21.74%和67.39%，根系干重增加了14.81%和40.74%，單株干重分別提高了21.19%和62.71%。對(duì)不同鹽處理單側(cè)根系鮮重和干重進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，不均勻鹽處理低鹽或無(wú)鹽一側(cè)根系鮮重和干重顯著高于高鹽一側(cè)，50/150處理低鹽一側(cè)根系鮮重是高鹽一側(cè)根系的1.90倍，根系干重是高鹽一側(cè)的2.10倍；0/200處理無(wú)鹽一側(cè)根系鮮重是鹽脅迫一側(cè)根系的3.02倍，根系干重是鹽脅迫一側(cè)根系的3.75倍。50/150處理低鹽一側(cè)根系鮮重和干重顯著高于均勻鹽處理，雖然高于無(wú)鹽對(duì)照，但差異不顯著，0/200處理無(wú)鹽一側(cè)根系鮮重和干重顯著高于無(wú)鹽對(duì)照和均勻鹽處理。

分根鹽處理對(duì)高粱幼苗葉面積有顯著影響，與對(duì)照相比，100/100、50/150和0/200鹽處理葉面積分別降低了60.70%、55.51%和25.86%，并且達(dá)到了顯著性水平；不均勻鹽處理50/150和0/200比均勻鹽處理100/100的葉面積分別提高了13.22%和88.66%，其中，0/200和100/100處理葉面積差異達(dá)到了顯著性水平（表1）。

2.2 分根鹽處理對(duì)根系形態(tài)的影響

不同鹽處理對(duì)幼苗根系形態(tài)有顯著影響，不均勻鹽處理0/200根系長(zhǎng)度最高，顯著高于100/100和50/150處理，均勻處理100/100的根系長(zhǎng)度顯著低于對(duì)照。鹽處理的根系體積與無(wú)鹽對(duì)照相比都有一定程度的下降，不均勻鹽處理的0/200根系體積顯著高于均勻鹽處理，50/150處理高于均勻處理，但差異不顯著。鹽處理對(duì)根尖數(shù)和根分支數(shù)的影響相似，鹽處理顯著降低了根尖數(shù)和根分支數(shù)，不均勻鹽處理50/150和0/200比均勻鹽處理根尖數(shù)分別增加了5.41%和23.60%，根分支數(shù)分別增加了19.40%和76.13%，0/200和100/100處理之間差異達(dá)到顯著性水平。不均勻鹽處理對(duì)局部根系形態(tài)影響顯著，低鹽一側(cè)根系生長(zhǎng)明顯增加，50/150處理低鹽一側(cè)的根系長(zhǎng)度、根系體積、根尖數(shù)和分支數(shù)比高鹽一側(cè)分別增加了66.62%、51.39%、47.00%和75.65%，比均勻鹽處理100/100分別增加了27.48%、43.42%、25.47%和52.17%，差異均達(dá)到顯著性水平；0/200處理，無(wú)鹽一側(cè)的根系長(zhǎng)度、根系體積、根尖數(shù)和分支數(shù)比鹽脅迫一側(cè)分別增加了164.07%、219.40%、128.21%和296.26%，比均勻鹽處理100/100分別增加了72.99%、181.58%、81.45%和181.28%，差異均達(dá)到顯著性水平，比無(wú)鹽對(duì)照分別增加了49.01%、38.96%、37.95%和3.86%，前三項(xiàng)性狀差異顯著（表2）。

表1 分根鹽處理對(duì)高粱幼苗農(nóng)藝性狀的影響

表中數(shù)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同一列不同字母表示差異顯著（＜0.05）?！?”兩側(cè)的數(shù)值分別代表高粱兩側(cè)根部NaCl處理濃度（mmol·L-1）。50/150-50、50/150-150、0/200-0和0/200-200表示不均勻鹽處理局部根系所處的NaCl處理濃度（mmol·L-1）。下同

Values in the table are means ± standard deviation (SD). The different letters of the same column indicate the significance of the difference (＜ 0.05). Values on both sides of the slash mark, “/”, indicate NaCl concentrations for the corresponding root sides. 50/150-50, 50/150-150, 0/200-0, and 0/200-200 indicate the partial-root of different NaCl concentrations under the non-uniform salinity treatments. The same as below

2.3 分根鹽處理對(duì)葉片光合作用的影響

對(duì)新展開(kāi)3個(gè)葉片的SPAD值進(jìn)行分析表明，分根鹽處理對(duì)幼苗葉片的葉綠素含量有顯著的影響，與無(wú)鹽對(duì)照相比，分根鹽處理3個(gè)葉片的SPAD值都有一定程度的降低，3個(gè)葉片無(wú)鹽對(duì)照與鹽處理的100/100、50/150差異都達(dá)到了顯著性水平，與0/200處理差異不顯著。不均勻鹽處理與均勻鹽處理的SPAD值相比較，均有一定程度的提高，0/200處理3個(gè)葉片SPAD值顯著高于100/100處理，50/150處理的第1和第2葉片的SPAD值顯著高于100/100處理，第3葉片差異沒(méi)有達(dá)到顯著性水平，0/200處理的第1和第3葉片的SPAD值顯著高于50/150，第2葉片差異不顯著（圖1）。

表2 分根鹽處理對(duì)高粱根系形態(tài)的影響

不同字母表示處理間在0.05水平差異顯著 Different letters represent significant difference between different treatments at 0.05 level

研究分根鹽處理對(duì)幼苗葉片的光合參數(shù)的影響，發(fā)現(xiàn)光合速率（net photosynthetic rate，n）、氣孔導(dǎo)度（stomatal conductance，s）和蒸騰速率（transpiration rate，r）都受到顯著的不利影響，對(duì)照和鹽處理之間的n、s和r差異達(dá)到顯著水平，不均勻鹽處理50/150的n、s、r與均勻鹽處理相比分別提高了155.95%、56.25%和57.14%，0/200處理分別提高了245.24%、87.50%和85.71%；均勻鹽處理細(xì)胞間CO2濃度（intercellular CO2concentration，i）顯著高于對(duì)照和不均勻鹽處理，對(duì)照和不均勻鹽處理之間差異不顯著。

分根鹽處理對(duì)ΦPSⅡ、Fv/Fm和ETR都有顯著影響，鹽處理的三項(xiàng)指標(biāo)都顯著低于對(duì)照，不均勻鹽處理的三項(xiàng)指標(biāo)都高于均勻鹽處理，不均勻鹽處理50/150、0/200的ΦPSⅡ比均勻鹽處理的100/100提高了分別為5.64%和19.00%，F(xiàn)v/Fm分別提高了1.93%和6.89%、ETR分別提高了9.25%和18.89%，其中0/200處理的ΦPSⅡ和Fv/Fm與100/100處理的差異達(dá)到顯著性水平（表3）。

2.4 分根鹽處理對(duì)葉片抗氧化酶活性和與滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

分根鹽處理對(duì)葉片抗氧化酶活性與滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響顯著，4個(gè)處理之間的SOD值差異均達(dá)到顯著性水平，100/100、50/150、0/200的SOD比對(duì)照分別增加了73.68%、122.44%和199.26%，不均勻鹽處理50/150和0/200顯著高于100/100處理，分別提高了28.17%和72.43%。分根鹽處理對(duì)CAT的影響與SOD有著相似的結(jié)果，鹽處理顯著性提高了CAT的含量水平，不均勻鹽處理顯著高于均勻鹽處理。鹽處理提高了高粱葉片POD含量水平，100/100、50/150、0/200的POD分別提高了6.75%、13.55%和31.72%，不均勻鹽處理50/150和0/200與均勻處理100/100相比分別增加了6.37%和23.40%，其中0/200與均勻處理100/100差異達(dá)到顯著水平。鹽處理增加了高粱葉片中MDA含量，100/100、50/150、0/200的MDA含量分別增加了37.64%、13.09%和4.76%，不均勻鹽處理50/150和0/200比均勻鹽處理降低了17.84%和23.89%，差異達(dá)顯著水平。鹽處理葉片的PRO和SS含量都有不同程度的增加，鹽分不均勻處理50/150和0/200的SS含量顯著高于均勻鹽處理，0/200處理的PRO含量顯著高于均勻鹽處理（表4）。

表3 分根鹽處理對(duì)高粱光合參數(shù)和熒光參數(shù)的影響

3 討論

3.1 分根鹽處理對(duì)高粱幼苗生長(zhǎng)和根系形態(tài)的影響

分根于不同鹽濃度處理下研究植物的耐鹽特性引起了眾多學(xué)者的重視[1]，高粱作為一種耐鹽堿較強(qiáng)的農(nóng)作物，已有的耐鹽性研究都是在均勻鹽堿條件下進(jìn)行的[26]。因此，通過(guò)利用分根系統(tǒng)模擬高粱根系不同區(qū)域受到不均勻鹽分脅迫，研究高粱在該脅迫條件下各種生理生化指標(biāo)的變化，一方面可以揭示高粱對(duì)不均勻鹽分脅迫適應(yīng)性的生理基礎(chǔ)，另一方面也補(bǔ)充了人們對(duì)于高粱耐鹽、抗鹽脅迫的生理認(rèn)知。前人對(duì)棉花[2]、葡萄[16]、苜蓿[17]、冬小麥[22]、番茄[24]、大洋洲濱藜[31]、羊草[32]等植物研究結(jié)果顯示，不均勻鹽處理可緩解鹽脅迫對(duì)植物的危害，不均勻鹽處理的生物量顯著高于均勻鹽處理?xiàng)l件下的生物量。本文通過(guò)分根不同鹽脅迫條件下研究發(fā)現(xiàn)不均勻鹽處理能有效減輕鹽脅迫對(duì)高粱幼苗造成的傷害，不均勻鹽處理50/150和0/200的單株鮮重和單株干重比均勻鹽處理100/100都有顯著性提高，尤其是低鹽和非鹽脅迫一側(cè)的根系鮮重和干重顯著高于高鹽一側(cè)。根系是植物吸收養(yǎng)分的主要器官，健壯的根系有助于植物對(duì)水分和礦質(zhì)元素的吸收，從而緩解鹽脅迫對(duì)高粱幼苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響。本研究中不均勻鹽脅迫下由于低鹽和非鹽脅迫一側(cè)根系長(zhǎng)度、根系體積、根尖數(shù)和分支數(shù)出現(xiàn)了補(bǔ)償性增加，整株根系長(zhǎng)度、根系體積、根尖數(shù)和分支數(shù)等根系形態(tài)指標(biāo)都高于均勻鹽脅迫，這將有利于根系從低鹽或非鹽一側(cè)溶液中吸收水分和礦物質(zhì)，緩解鹽脅迫對(duì)高粱幼苗的影響，這與冬小麥[22]通過(guò)非鹽脅迫一側(cè)根長(zhǎng)和根數(shù)的顯著增加促進(jìn)不均勻鹽處理總根長(zhǎng)和根數(shù)顯著增加的結(jié)論一致。

表4 分根鹽處理對(duì)葉片抗氧化酶活性與滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

3.2 分根鹽處理對(duì)葉片光合作用的影響

鹽脅迫可導(dǎo)致植物的光合作用降低，鹽脅迫誘導(dǎo)的光合作用降低一般是由滲透脅迫引起的氣孔關(guān)閉或者葉綠素含量降低引起的[37]，也有學(xué)者研究認(rèn)為，在低鹽濃度下光合作用降低是由于氣孔關(guān)閉造成了高粱葉片的凈光合速率下降，在高鹽濃度下是非氣孔關(guān)閉造成的，光合參數(shù)和葉綠素的熒光參數(shù)能夠反應(yīng)高粱幼苗耐鹽能力[20]。本研究表明不均勻鹽處理與均勻鹽處理的SPAD值相比較，均有一定程度的提高，大部分差異達(dá)到顯著性水平，光合速率、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率都顯著受到鹽脅迫的抑制，但是不均勻鹽處理的光合速率、氣孔導(dǎo)度、蒸騰速率顯著高于均勻鹽處理，而均勻鹽處理的細(xì)胞間隙CO2濃度顯著高于對(duì)照和不均勻鹽處理，對(duì)照和不均勻鹽處理之間差異不顯著，這說(shuō)明均勻鹽處理的葉綠素受到破壞，已經(jīng)不可恢復(fù)，而鹽分不均勻處理對(duì)葉綠素破壞較輕，葉綠素含量降幅較小，幼苗有著較高的抗鹽能力，這與不均勻鹽脅迫對(duì)葡萄、番茄的影響相似[16,21]。Fv/Fm反映了PSⅡ原初最大光化學(xué)效率，ΦPSⅡ反映了PSⅡ?qū)嶋H光化學(xué)效率，ETR反映了PSⅡ電子傳遞效率，鹽脅迫可以抑制高粱幼苗PSⅡ原初最大光化學(xué)效率和實(shí)際光化學(xué)效率[20]，無(wú)論不均勻鹽處理還是均勻鹽處理都顯著降低上述參數(shù)[16]，本研究鹽脅迫處理的三項(xiàng)熒光參數(shù)ΦPSⅡ、Fv/Fm和ETR都顯著低于對(duì)照，不均勻鹽處理都高于均勻鹽處理，與前人對(duì)其他作物中的研究結(jié)果相似。

3.3 分根鹽處理對(duì)葉片抗氧化酶活性與滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響

在鹽脅迫下，抗氧化酶活性受到影響，致使一些活性氧和MDA積累，導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化，致使植物受到傷害甚至死亡，但植物體內(nèi)也存在活性氧消除系統(tǒng)，包括SOD、POD、CAT等，并以此來(lái)維持活性氧生成與消除的動(dòng)態(tài)平衡[33-34]。滲透調(diào)節(jié)是植物應(yīng)對(duì)鹽脅迫的重要方式之一，鹽脅迫下，細(xì)胞內(nèi)積累一些物質(zhì)，如PRO、SS等，以調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的滲透勢(shì)，維持水分平衡，還可以保護(hù)細(xì)胞內(nèi)許多重要代謝活動(dòng)所需的酶類活性[35-36]。在本研究中，不均勻鹽處理的抗氧化酶SOD、POD、CAT活性均大于均勻鹽處理，部分處理差異達(dá)到顯著性水平，而在不均勻鹽脅迫處理中MDA含量顯著小于均勻鹽處理，滲透調(diào)解物質(zhì)PRO和SS含量都高于均勻鹽處理，在不均勻鹽處理?xiàng)l件下SOD、POD、CAT等抗氧化酶活性的增加，可以清除膜脂過(guò)氧化作用產(chǎn)生的MDA和活性氧，保護(hù)膜系統(tǒng)不受破壞，PRO和SS的積累可以維持鹽脅迫下細(xì)胞正常的膨脹和代謝功能，從而降低了鹽脅迫對(duì)高粱幼苗的影響。

4 結(jié)論

無(wú)論不均勻鹽處理還是均勻鹽處理，對(duì)高粱幼苗生長(zhǎng)發(fā)育均造成抑制作用，與均勻鹽處理相比，由于不均勻鹽處理低鹽或無(wú)鹽一側(cè)根系補(bǔ)償性的增長(zhǎng)，高粱幼苗整株根系形態(tài)得到改善，葉片抗氧化酶活性、滲透調(diào)節(jié)能力和光合性能均有一定程度的提高，有效緩解了鹽脅迫對(duì)高粱幼苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響。

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Effects of heterogeneous salinity across rhizosphere on the growth of sorghum seedlings

ZHANG HuaWen1,3,WANG RunFeng1,3,XU MengPing1,3, LIU Bin1,3, CHEN ErYing1,3, HUANG RuiDong2, ZHOU YuFei2, WANG HaiLian1,3

(1Crop Research Institute, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100;2;3Featured Crops Engineering Laboratory of Shandong Province, Jinan 250100)

Salt content is usually unevenly distributed in saline-alkali lands. Studies on growth and development, and the changes of physiological and biochemical indexes of sorghum seedlings under non-uniform salt stress could provide a theoretical basis for the cultivation of sorghum in saline-alkali land and the efficient exploitation and utilization of saline-alkali lands.Roots of sorghum were divided into two equal portions by a root-split method and put in uniform and non-uniform NaCl concentration solution, respectively. There were four treatments. No sodium chloride (denoted as 0/0) was the control, 0 and 200 mmol·L-1(denoted as 0/200), 50 mmol·L-1and 150 mmol·L-1(denoted as 50/150) were non-uniform salinity treatments, and 100 mmol·L-1/100 mmol·L-1(denoted as 100/100) were uniform salinity treatment. Healthy sorghum seedlings after growing for 14 days in a growth chamber were sampled for the determination of biomass, leaf area, SPAD, root morphology, osmotic regulators content, anti-oxidative enzyme activity, and photosynthetic parameters.Growth of sorghum both in uniform and non-uniform salt stress conditions was severely inhibited, and significant decrease of fresh weight, biomass, leaf area, root morphology, photosynthetic capacity, anti-oxidative enzyme activity and osmotic substance content accumulation was found. Dry weight per plant was increased by 21.19% and 62.71%, fresh weights of seedlings was increased by 35.39% and 86.44%, and leaf area was increased by 13.22% and 88.66%, respectively under 50/150 and 0/200 compared with those under 100/100. Under 50/150 treatment, fresh and dry weights of roots in the 50 mmol·L-1side were 1.90 and 2.10 times of the 150 mmol·L-1side. Under 0/200 treatment, fresh and dry weights of roots in 0 mmol·L-1side were increased by 3.02 and 3.75 times compared with the 200 mmol·L-1side. Likewise, local root morphology was affected significantly in non-uniform salt treatment. Root length, root volume, root tip number, and root branch number of sorghum seedlings in 50 mmol·L-1side or 0 mmol·L-1were significantly increased compared with 150 mmol·L-1(50/150) or 200 mmol·L-1(0/200) salt stress side, respectively. Root length, root volume, root tip number, and root branch number of the whole root were significantly increased under 0/200 (＜0.05) compared with the 100/100 treatment. Activities of SOD, CAT, and POD in leaves were significantly higher under non-uniform salt stress (＜0.05). Contents of proline and soluble sugars were significantly increased in leaves with a dramatic reduce in MDA content (＜0.05) under the non-uniform salinity treatments. Compared with seedlings under the 100/100 condition. Photosynthesis of sorghum was significantly enhanced under 0/200 and 50/150 salt stresses, which chiefly was reflected by notably increased photosynthetic rate, stomatal conductance, transpiration rate, and decreased intercellular CO2concentration (＜0.05). With respect to indexes of fluorescence of photosynthesis, such as ΦPSⅡ, Fv/Fm, and ETR, their values under 50/150 and 0/200 were increased by 5.64% and 19.00%, 9.25% and 18.89%, and 1.93% and 6.89%, respectively. ΦPSⅡand Fv/Fm under 0/200 were significantly different from those under 100/100 (＜0.05).Both non-uniform and uniform salt stress treatments caused growth inhibition to sorghum seedlings. However, due to the root compensatory growth of low salt or salt-free side under the non-uniform salt stress condition, whole root morphology, leaf antioxidant enzymes activity, osmotic regulation ability, and photosynthetic capacity were improved in a certain degree. Thus, non-uniform salinity could relieve damages to sorghum seedling initiated by salt stress.

sorghum bicolor; split root; non-uniform salinity; photosynthesis; fluorescence

10.3864/j.issn.0578-1752.2019.22.015

2019-06-05；

2019-08-06

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)（CARS-06-13.5-B23）、山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程（CXGC2018D02）、山東省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（2019GNC106059）

張華文，E-mail：zhwws518@163.com。王潤(rùn)豐，E-mail：linus.rw@outlook.com。張華文和王潤(rùn)豐為同等貢獻(xiàn)作者。通信作者王海蓮，E-mail：wanghailian11@163.com

（責(zé)任編輯 李莉）