王麗華，劉之川

重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院急救部，重慶 400010

細(xì)菌生物膜（Biofilm，BF）是導(dǎo)致抗生素?zé)o法發(fā)揮作用的重要因素，因此清除創(chuàng)面BF是當(dāng)前慢性創(chuàng)面治療和研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)[1]。體外研究表明，黃芩可能通過抑制BF的生成，提高抗菌藥物的敏感性，而金黃色葡萄球菌為慢性難愈創(chuàng)面的優(yōu)勢菌[2]。因此，該研究于2016年7月—2019年3月取健康雄性清潔級Wistar大鼠112只，通過建立金黃色葡萄球菌生物膜致病的慢性創(chuàng)面動物模型進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)，評價(jià)黃芩聯(lián)合莫匹羅星對慢性創(chuàng)面金葡菌BF的清除作用和促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用，并探討其可能的作用機(jī)理，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雄性清潔級Wistar大鼠112只，體重168～245 g，平均（203.45±22.16）g，購置于重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。

1.2 方法

①制備金黃色葡萄球菌（ATCC25933）標(biāo)準(zhǔn)菌液[3]。

②建立動物造模。健康雄性清潔級Wistar大鼠112只，制成大鼠金黃色葡萄球菌生物膜慢性創(chuàng)面模型，采用掃描電鏡觀察創(chuàng)面BF形態(tài)[4]。

③分組及處理。造模成功后行隨機(jī)分為A、B、C、D 4組，每組28只。A組用浸有 l mL黃芩+莫匹羅星混合液換藥；B組用浸有l(wèi) mL黃芩液換藥；C組用浸有l(wèi) mL莫匹羅星液換藥；D組用浸有l(wèi) mL生理鹽水換藥。各組大鼠換藥后，均用三層無菌紗布覆蓋，外套自制鋼絲網(wǎng)罩固定，同樣方法每日換藥1次[5]。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 創(chuàng)面愈合時間即用藥起至創(chuàng)面完全愈合所需時間[6]。

1.3.2 創(chuàng)面愈合率 于用藥后第 1、4、7、10、14、21 及 28 天，測定各組創(chuàng)面愈合率，創(chuàng)面愈合率=（大鼠造模時創(chuàng)面面積-用藥后第n天創(chuàng)面面積）/造模時創(chuàng)面面積×100%[7]。

1.3.3 創(chuàng)面組織細(xì)菌性檢測 于用藥后第 1、4、7、10、14、21及28天，同時各組隨機(jī)選取 4只大鼠處死，取痂下組織行菌量測定[8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 創(chuàng)面愈合時間

在平均創(chuàng)面愈合時間上，A組短于B組、C組、D組（t=7.384、6.935、8.556，P＜0.05）；B 組、C 組短于 D 組 （t=7.305、7.552，P＜0.05）。 見表 1。

表 1 4 組大鼠創(chuàng)面愈合時間比較[（±s），d]

表 1 4 組大鼠創(chuàng)面愈合時間比較[（±s），d]

組別創(chuàng)面愈合時間A（n=28）14.27±1.55 B（n=28）19.85±1.86 C（n=28）19.92±1.74 D（n=28）24.17±1.52

2.2 創(chuàng)面愈合率

在用藥后第4、7、10及14天，在平均創(chuàng)面愈合率上，A 組大于 B 組、C 組、D 組 （t=7.375、8.225、7.112，P＜0.05），B 組、C 組大于 D 組（t=7.204、7.114，P＜0.05）。 見表 2。

表2 用藥后不同時間段4組大鼠創(chuàng)面愈合率比較（±s）

表2 用藥后不同時間段4組大鼠創(chuàng)面愈合率比較（±s）

組別 第1天 第4天 第7天 第10天 第14天 第21天 第28天A（n=28）8.43±0.2432.15±3.1647.26±4.2173.21±6.2095.24±8.15100100 B（n=28）8.26±0.2620.18±2.1120.52±2.3550.63±7.3172.18±6.3396.38±2.1998.45±1.12 C（n=28）8.41±0.3321.04±2.0621.56±2.4152.35±8.1471.56±5.9195.67±2.3598.32±1.06 D（n=28）8.19±0.2615.47±1.1814.67±1.6834.26±2.6650.46±3.8190.27±3.5497.23±1.15

2.3 創(chuàng)面組織細(xì)菌性檢測

在用藥后第4、7、10、14天，在平均創(chuàng)面痂下組織菌量上，A 組小于 B 組、C 組、D 組 （t=8.284、7.551、8.112，P＜0.05），且 B 組、C 組小于 D 組（t=7.025、7.437，P＜0.05）。 見表3。

表3 用藥后不同時間段4組大鼠創(chuàng)面組織細(xì)菌性檢測結(jié)果比較（±s）

表3 用藥后不同時間段4組大鼠創(chuàng)面組織細(xì)菌性檢測結(jié)果比較（±s）

組別 第1天 第4天 第7天 第10天 第14天 第21天 第28天A（n=28）3.41±0.384.15±0.263.66±0.312.90±0.152.43±0.171.83±0.151.75±0.12 B（n=28）3.37±0.355.12±0.284.71±0.273.76±0.183.42±0.192.20±0.151.92±0.14 C（n=28）3.40±0.325.15±0.254.55±0.293.77±0.183.45±0.172.18±0.161.94±0.16 D（n=28）3.36±0.365.20±0.315.72±0.304.41±0.234.14±0.232.20±0.192.03±0.15

3 討論

①該研究結(jié)果顯示，在用藥后第4、7、10、14天，A組平均創(chuàng)面痂下組織菌量 （4.15±0.26）、（3.66±0.31）、（2.90±0.15）、（2.43±0.17）小于 B 組、C 組、D 組（P＜0.05）。 黃芩可抑制BF的形成[9]，莫匹羅星為局部外用抗生素，二者聯(lián)合可有效提高莫匹羅星的抗菌活性，進(jìn)而提高抗菌效果[10]。

②該研究結(jié)果顯示，在平均創(chuàng)面愈合時間上，A組(14.27±1.55)d 短于 B 組(19.85±1.86)d、C 組(19.92±1.74)d、D組(24.17±1.52)d（P＜0.05）；在用藥后第 4、7、10 及 14 天，A組平均創(chuàng)面愈合率 （32.15±3.16）、（47.26±4.21）、（73.21±6.20）、（95.24±8.15）大于 B 組、C 組、D 組（P＜0.05），即黃芩聯(lián)合莫匹羅星治療慢性創(chuàng)面可有效提高創(chuàng)面愈合率，縮短創(chuàng)面愈合時間，進(jìn)而在整體上提高創(chuàng)面愈合療效[11-12]。沈胡剛等[13]探討了黃芩油膏對增生性瘢痕點(diǎn)陣二氧化碳激光治療后創(chuàng)面修復(fù)的療效，治療組采用黃芩油膏涂抹創(chuàng)面，對照組采用金霉素眼膏涂抹創(chuàng)面，結(jié)果證實(shí)治療組患者的疼痛指數(shù)（1.16±0.32）、最后的創(chuàng)面愈合時間（8.23±2.78）、溫哥華瘢痕量表評分（2.23±1.38）明顯優(yōu)于對照組（P＜0.05），與該研究結(jié)果一致。

綜上所述，黃芩聯(lián)合莫匹羅星治療慢性創(chuàng)面可有效減少創(chuàng)面痂下組織菌量，進(jìn)而提高創(chuàng)面愈合率，加快創(chuàng)面愈合進(jìn)程，提高整體療效。