趙 丹

（盤錦市大洼區(qū)疾病預(yù)防控制中心，遼寧 盤錦 124200）

基層疾控中心屬于政府職能部門們，在我國分布較為廣泛。疾控中心主要工作內(nèi)容是預(yù)防及控制傳染性及慢性非傳染性疾病，因而微生物檢驗結(jié)果會對傳染性疾病預(yù)防工作質(zhì)量造成直接影響。現(xiàn)階段，在我國基層疾控中心的微生物檢驗中存在一定問題，因而本文以此為切入點，總結(jié)微生物檢測中存在的問題，并以此穩(wěn)基礎(chǔ)制定相應(yīng)解決措施。

1 微生物檢驗常見問題

1.1 送檢標本質(zhì)量低：檢驗人員對患者真實狀況進行檢驗的基礎(chǔ)為一份合格的患者標本，因而這就表明在對微生物檢驗進行質(zhì)量管理的過程中，不能僅僅局限于檢測過程中的管理，還需要加強對檢驗分析前的質(zhì)量管理。通常情況下，造成保本送檢質(zhì)量低的原因為如下四點：①沒有對標本采集工作進行規(guī)范化操作[1]。如臨床科室在對標本進行采集的過程中沒有嚴格規(guī)范采集時間、采集量、采血姿勢、標本收集容器以及防腐劑或抗凝劑的使用等。②通常情況下對于細菌培養(yǎng)的血標本在采集時應(yīng)該在患者使用抗生素前，但60%以上的住院患者在入院前均已經(jīng)接受了門診的相應(yīng)治療，因而對檢驗結(jié)果造成了不良影響。③對于血液標本的采集應(yīng)該采取溫和處理措施，一旦血液標本發(fā)生了溶血，則會降低血漿或血清中的測定值。④一部分標本在采集完成運送的過程中，無法在規(guī)定時間內(nèi)將其送至微生物檢驗室，從而便會造成污染正常菌落的情況。

1.2 檢驗指標問題：在當(dāng)前的基層疾控中心中，微生物檢測指標方面也存在一定的問題。其主要為以下幾點：①檢測指標欠缺完整性。在現(xiàn)有的檢測中，微生物檢測種類遺漏問題較為明顯，從而在疾病防控的布置措施中存在不完整等情況，導(dǎo)致發(fā)病概率增加，疾控時效性降低。如在檢測水質(zhì)衛(wèi)生物中，具體存在總大腸桿菌群、菌落總數(shù)、大腸埃希菌、耐熱大腸菌等，但是總大腸桿菌群中存在檸檬酸桿菌屬、埃希菌屬、腸桿菌屬、克雷伯菌屬，實際檢測中卻總會忽視總大腸菌群中的某些菌屬，整體檢測并不完善；②檢測不突出重點。這一問題導(dǎo)致現(xiàn)有的大型微生物檢測中準確性降低，影響了疾控防控的參數(shù)，降低了疾控的有效性。如食物微生物檢測，檢測重點應(yīng)該側(cè)重于能夠引發(fā)人類生理系統(tǒng)病變之類的有害微生物，但實際工作中卻經(jīng)常忽視此種問題。

1.3 檢驗環(huán)境不合格：微生物檢驗過程中對于實驗室環(huán)境要求較高，但對于基層疾控中心而言，因其自身條件有所限制從而使得大多數(shù)的微生物實驗室環(huán)境無法達到相關(guān)要求，最終便會對微生物檢驗結(jié)果造成影響。

1.4 缺乏規(guī)范檢驗流程：在對基層疾控中心調(diào)查中，一部分檢驗人員在對標本進行接種、細菌培養(yǎng)、菌落篩選、藥敏試驗、涂片、染色以及鑒定等過程中沒有嚴格執(zhí)行相關(guān)操作規(guī)程。同時沒有對其進行嚴格質(zhì)量監(jiān)控，也無法有效地確保檢驗分析中的各個環(huán)節(jié)，還有一部分的檢驗人員沒有充分認識到病原菌類型，且部分菌落鑒定漏網(wǎng)會對終末質(zhì)量造成影響[2]。

1.5 檢驗設(shè)備落后：基層疾控中心檢測設(shè)備十分重要，是檢測效率與標準提升的基礎(chǔ)，但是實際工作中檢測設(shè)備卻存在一定的缺陷，其穩(wěn)定性較差，檢測結(jié)構(gòu)不能滿足微生物檢驗的需求。并且，基層疾控中心因其自身條件有限因而相關(guān)的檢驗設(shè)備均由國家分配，但由于政策從制定到落實需要一定時間，因此導(dǎo)致基層疾控中心的檢驗設(shè)備與技術(shù)較為落后，且缺乏一定數(shù)量。

2 質(zhì)量控制措施

2.1 確定檢驗方法：當(dāng)使用新的檢驗方法之前，需要通過一定樣本數(shù)量進行預(yù)實驗，核實驗證方法的精準性與準確性，證明在實驗室中可以重復(fù)試驗指標。并將現(xiàn)有的工作有關(guān)手冊、指導(dǎo)、標準等保證其有效性，方便工作人員開展微生物檢驗。

2.2 保證實驗環(huán)境良好：實驗室環(huán)境是微生物檢測中的重要部分，對環(huán)境需求較高。應(yīng)當(dāng)保證實驗室通風(fēng)換氣設(shè)備的管維工作，則可以有效控制實驗室的室內(nèi)環(huán)境，其環(huán)境標準如下：濕溫度、照明、噪音、風(fēng)量等。還需要劃分微生物檢測實驗室的4個模塊，設(shè)置相應(yīng)的標志牌，以免工作過程中工作人員走錯出現(xiàn)交叉感染等問題，影響了工作人員的身體健康。定期進行維護與監(jiān)測，使用紫外線燈每月進行消毒監(jiān)測，設(shè)置監(jiān)測與維護的記錄備查，并且應(yīng)有實驗室主管的復(fù)合簽字。

2.3 監(jiān)控質(zhì)控菌株：在微生物檢測中，質(zhì)控菌株是其中的參考體系，是典型穩(wěn)定的生物學(xué)特征，需要有認可部門或者權(quán)威機構(gòu)提供。通常在菌種保存中心機構(gòu)購買，或者是上級業(yè)務(wù)主管發(fā)送。微生物實驗室中需要有金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌這三種，建立相應(yīng)的菌株檢測、保存等操作程序，從而保證生物安全性。若是實驗室中不存在規(guī)定的標準菌株，也可以用同一種類的菌株替代。對于菌株購買、保存等都應(yīng)該具有細致的記錄，設(shè)置完善的措施，沒有管理者允許則不能獲得菌株。

2.4 檢查培養(yǎng)基及使用試劑：為了提升微生物檢測質(zhì)量，需要檢查所用試劑的外觀，數(shù)量、生產(chǎn)廠家等各項基礎(chǔ)參數(shù)，購買試劑與培養(yǎng)基的時候，應(yīng)當(dāng)向供貨商索取“三證”，使用之前需要評估以下內(nèi)容：固體試劑潮解程度；液體試劑均勻性與透明性；培養(yǎng)基厚度在均勻中是否表面光滑平整。并且，按照規(guī)定要求存儲試劑，在有效期之間使用，不能混用不同批次之間的培養(yǎng)基與試劑，使用時需要有相應(yīng)的配置記錄。對于不同批次的商品試劑或培養(yǎng)基等都需要進行實驗：生長實驗、無菌實驗、選擇性實驗等質(zhì)量檢測。同時，不同培養(yǎng)基需要根據(jù)不同的培養(yǎng)標準，使用相應(yīng)菌種接種；生化培養(yǎng)基鑒定細菌；陽性菌株鑒定觸酶、氧化酶試劑；標準菌株使用染液控制等。

2.5 診斷血清：當(dāng)進行血清的簽收時，工作人員需要確定血清的各項基本參數(shù)，其中包含了生產(chǎn)批號與生產(chǎn)廠家的審核，保證檢測工作開展在無菌環(huán)境之中。

2.6 實驗檢測：當(dāng)檢測人員收到檢測任務(wù)與樣品單后，需要對任務(wù)單上的內(nèi)容進行核對，看其是否與送檢樣品相符，其中包含了檢測項目、方法、包裝、數(shù)量、狀態(tài)等，只有無誤后才能安排檢測。檢測前需要根據(jù)實驗室的相關(guān)標準，做好基本的質(zhì)量控制，如培養(yǎng)基配置、無菌實驗室消毒、設(shè)備調(diào)控、防護檢測人員、防污染等準備。

微生物檢驗時，通常情況下樣品并不能進行復(fù)檢，若是在檢測過程中出現(xiàn)異常，客戶或者審核人員對于檢測數(shù)據(jù)提出了異議等，則可以進行微生物復(fù)檢，而停氣、停電等對于樣品檢測結(jié)果準確性有所影響的意外情況，檢測人員需要立即停止檢測，恢復(fù)檢測條件則可以繼續(xù)檢測，若是不能檢測則重新采集樣品。

檢測之后，所有與檢測相關(guān)的場所、器具、物品等需要消毒滅菌處理。若是必要，則可以實施目標菌生長實驗，確定為無菌生長時，焚毀清洗。

3 解決措施分析

3.1 創(chuàng)建完整的檢測指標體系：若是想要提升微生物檢測質(zhì)量，則需要創(chuàng)建完整的檢測指標體系。其主要應(yīng)當(dāng)從兩方面進行：①通過分析資料確定檢測指標項目。具體而言，主要是由于微生物的分布具有一定的空間性與時間性，但是其中又存在不確定性，因此，需要相關(guān)工作人員利用以往的檢測資料，總結(jié)基層疾控中心中存在的微生物種類，并將其納入到檢測體系之中，可以有效改善檢測遺漏等問題；②利用區(qū)域時間，對微生物檢測重點名單進行總結(jié)確定，重點檢驗與監(jiān)控具有重大影響的微生物。通過上述兩種方法，創(chuàng)建出較為完整的微生物檢測指標體系，加強檢測工作的指導(dǎo)。

3.2 加強專業(yè)技能培訓(xùn)：為了能夠提高臨床微生物檢驗質(zhì)量，就需要進一步加強對檢驗人員能力與技能的培養(yǎng)，同時在判讀檢驗結(jié)果時，需要檢驗人員具備較強的主觀判斷能力。除此之外，檢驗人員需要掌握免疫學(xué)、臨床抗生學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、病原生物學(xué)以及醫(yī)院流行病學(xué)等多方面的知識，如此才能在微生物檢驗中有效地解決分析前質(zhì)量控制中技術(shù)問題。最終才能確保檢驗結(jié)果的準確性與科學(xué)合理性，確保藥敏與藥敏、細菌鑒定與藥敏之間結(jié)果的吻合。同時還需要對基層疾控中心的各科護土進行教育培訓(xùn)，因而為了能夠進一步提高標本質(zhì)量，可以由檢驗科主任為臨床護土長傳授向知識，主要講解終末質(zhì)量與標本質(zhì)量之間的關(guān)系。并對標本采集方式與注意事項進行詳細介紹，嚴格要求標本采集的部位與采集量，堅決退回不合格的標本[3]。

培訓(xùn)之后，還要對檢測人員專業(yè)技能進行統(tǒng)一考核，保證培訓(xùn)的有效性，其主要包含兩方面內(nèi)容：一是加標實驗與樣品重測的考核；二是培訓(xùn)期間各項技能的學(xué)習(xí)情況，由指導(dǎo)教師進行最終評估。

3.3 樣品采集運輸保存：若是想要獲得更加可靠精準的檢測結(jié)果，除了工作人員專業(yè)技能達到相應(yīng)標準之外，最為重要的就是對微生物樣本的采集。需要工作人員依據(jù)檢測標準、方法、目的等確定選擇采樣工具、方法、時機、部位、數(shù)量以及存放容器等，樣本的采集需要具有典型性、代表性與適時性。樣本在采集之后則應(yīng)當(dāng)根據(jù)相應(yīng)的需求包裝送檢，避免出現(xiàn)樣本污染等情況，若是不能實現(xiàn)立即送檢，則需要有充足的冷藏冷凍設(shè)備，將樣品存儲其中，封口樣品容器，貼上明顯標識，以免樣品出現(xiàn)損毀、丟失、污染、變質(zhì)等情況。樣品的接收人員則需要根據(jù)送檢單核對樣本信息，只有確定送檢的樣本符合相應(yīng)要求，才能簽收登記。通常情況下，在送檢樣品中需要提供同一批次的平行雙樣，方便后續(xù)的復(fù)檢工作開展。

3.4 提高檢驗人員專業(yè)素養(yǎng)：臨床微生物檢驗工作具有較高的風(fēng)險性與技術(shù)性，因而其對于臨床微生物檢驗人員的操作能力較高。基層疾控中心為了提高檢驗質(zhì)量需要進一步培養(yǎng)微生物檢驗人員的業(yè)務(wù)水平，提高檢驗經(jīng)驗。同時作為基層疾控中心管理者，在日常工作中應(yīng)該積極地組織檢驗人員進行相關(guān)的學(xué)術(shù)培訓(xùn)與交流會，以不斷地加強技術(shù)及學(xué)術(shù)交流，更好地掌握新的檢驗技術(shù)。

3.5 引進先進檢驗設(shè)備：基層疾控中心根據(jù)自身的實際情況，管理者分階段、分批次地對新的檢驗儀器進行購置，及時地對技術(shù)落伍的檢驗儀器進行淘汰，從而保證微生物檢驗工作順利開展。除此之外，管理者還應(yīng)該對微生物檢驗儀器管理制度予以進一步完善，從而確保檢驗儀器的使用及維護，并安排專人建立檢驗儀器相關(guān)檔案。

并且定期檢測檢驗設(shè)備的性能，數(shù)據(jù)與標準數(shù)據(jù)想對比，其儀器設(shè)備的標準數(shù)據(jù)如下：①恒溫恒濕培養(yǎng)箱的箱內(nèi)溫度應(yīng)當(dāng)在36～45 ℃，而霉菌箱其溫度應(yīng)當(dāng)在28 ℃左右。冰箱內(nèi)部最低溫溫度是-20 ℃，而保鮮冰箱溫度則約為4 ℃。②滅菌器。需要對新購買的滅菌器進行效果檢測，當(dāng)合格之后才能在實驗室中使用，每周進行一次監(jiān)測。壓力蒸汽滅菌器滅菌效果通常使用化學(xué)指法或者生物法進行滅菌效果的監(jiān)測。化學(xué)指法主要是通過化學(xué)指示卡監(jiān)測，生物法則是使用生物指示劑監(jiān)測。③生物安全柜。通常的基層疾控中心實驗室中主要使用二級生物安全柜，初次安裝與使用是都需要有專業(yè)的人員檢漏高效過濾器，若有問題則及時更換，檢定風(fēng)速、壓差等因素，保證樣本環(huán)境、人員的安全性，做好監(jiān)控記錄等工作。④紫外線燈。其在實驗室中主要具有空氣消毒的作用。對于紫外線燈是否合格的檢測，則是根據(jù)生物學(xué)指標以及物理學(xué)指標。生物學(xué)指標是指示菌殺滅率，以枯草桿菌黑色變種芽孢以及大腸桿菌為指示菌，殺滅率在照射一段時間后＞99.99%；而物理學(xué)指標則是紫外線輻射照度，安裝的新燈管初始階段，其紫外線照射強度應(yīng)當(dāng)超過94%，室溫為23 ℃時普通30 W直管紫外線燈輻射強度超過75 μW/cm2，高強度的紫外線燈相同條件下則超過210 μW/cm2。⑤稱量設(shè)備。量筒、天平、移液器等需要每年有專業(yè)的技術(shù)檢測機構(gòu)，或者是國家標準物質(zhì)檢測中心校準檢定，合格后在其上貼上綠色標識，才能繼續(xù)使用。

4 總結(jié)

綜上所述，對于微生物檢驗工作而言，檢驗人員專業(yè)素質(zhì)、實驗室環(huán)境以及檢驗設(shè)備均具有嚴格要求。因此，為了提高檢驗結(jié)果的可靠性與準確性，需要加強對微生物檢驗工作的重視，對檢驗操作進行嚴格規(guī)范，并引進先進的檢驗設(shè)備，提高檢驗質(zhì)量。