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禽源沙門氏菌凈化檢測技術(shù)研究進(jìn)展

2020-01-15 07:22朱國強(qiáng)
關(guān)鍵詞:白痢沙門氏菌凈化

牛 瓊 ,楊 斌 ,楊 溢 ,朱國強(qiáng) *

(1. 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州 225009;2. 江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心,教育部農(nóng)業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品安全國際合作聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室,江蘇 揚(yáng)州 225009)

沙門氏菌(Salmonella)是人類細(xì)菌性食源性疾病的主要來源之一,可引起胃腸炎和菌血癥,也可導(dǎo)致臨床并發(fā)癥和死亡。美國疾病控制和預(yù)防中心(Centers for disease control and prevention,CDC)曾報(bào)道,僅在美國每年就發(fā)生約120 萬例沙門氏菌病病例[1-2]。在人類感染沙門氏菌的病例中,有近75%的感染是由于食用受污染的豬肉、禽肉和牛肉等引起的[3]。禽源沙門氏菌主要包括禽傷寒沙門氏菌(Sal?monella Gallinarum)和雞白痢沙門氏菌(Salmonella Pullorum),雞白痢(Pullorum disease)是2 周齡~3 周齡以內(nèi)幼雛由于感染雞白痢沙門氏菌引起的急性、系統(tǒng)性、敗血性傳染病,幼雛感染后出現(xiàn)白色下痢、精神萎靡等癥狀,致死率極高[4];雞傷寒沙門氏菌引起的雞傷寒(Fowl typhoid)通常是危害成年雞的一種急性或慢性敗血癥,雞與火雞均可感染,致各種年齡雞的敗血性傷寒癥,可蔓延至生殖器官,導(dǎo)致病原體垂直傳播[5]。目前由于抗生素的耐藥性問題和缺少有效疫苗[6-7],考慮到垂直傳播的特點(diǎn),防控該病的根本措施只能通過撲殺凈化手段,而凈化的核心在于準(zhǔn)確快速檢出感染個(gè)體,因此快速可靠且適用于現(xiàn)場的檢測技術(shù)是有效實(shí)施禽源沙門氏菌病凈化的關(guān)鍵。本文對近年來禽源沙門氏菌流行現(xiàn)狀、凈化檢測技術(shù)和綜合防治措施進(jìn)行了綜述,以期為禽沙門氏菌病的凈化提供參考。

1 雞白痢/傷寒沙門氏菌凈化現(xiàn)狀

美國從1935 年開始實(shí)施國家家禽改良計(jì)劃(Na?tional poultry improvement plan,NPIP),通過建立雞白痢凈化評估標(biāo)準(zhǔn),明確凈化標(biāo)準(zhǔn)程序和凈化標(biāo)準(zhǔn)要求,對參加改良計(jì)劃的種禽場、養(yǎng)殖場、孵化場等的雞群必須檢測,一般在開產(chǎn)前(16 周)采用快速全血平板凝集試驗(yàn)對雞群進(jìn)行現(xiàn)場篩查,陽性雞的血清樣本建議送到指定診斷實(shí)驗(yàn)室采用試管凝集試驗(yàn)復(fù)核驗(yàn)證,也要對感染雞的組織器官進(jìn)行細(xì)菌的分離鑒定[8-9]。目前,美國和英國分別通過NPIP 和家禽健康計(jì)劃(Poultry health scheme)已在商品代雞群中完成雞白痢/傷寒沙門氏菌病的凈化[5]。上述國家近些年僅有小農(nóng)場養(yǎng)殖的雞群中出現(xiàn)雞白痢/傷寒感染的零星病例報(bào)道[10]。

在中國,禽源沙門氏菌仍是家禽中流行率較高的病原菌之一。Gong 等從2006 年~2012 年的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)雞白痢沙門氏菌是沙門氏菌屬最常見的血清型,占17.0%[11]。張倩在2011 年~2016 年間采用平板凝集法對我國19 個(gè)省、市、自治區(qū)共60 個(gè)祖代種雞場超過40 000 份血清樣本進(jìn)行雞白痢/傷寒抗體檢測,結(jié)果顯示各年度祖代種雞場陽性率為17.65%~78.95%,在2011 年~2013 年和2015 年~2016年間陽性雞場和陽性雞比例均呈下降趨勢,而2013年~2015 年陽性率卻有所上升[12]。近年來,許多學(xué)者對各地的雞白痢/傷寒沙門氏菌感染情況進(jìn)行了調(diào)查和報(bào)道。薛俊龍等調(diào)查了2008 年~2009 年山西省37 554 份父母代種雞和2 441 份商品蛋雞樣本,結(jié)果顯示父母代種雞的平均陽性率為2.6%,商品蛋雞的陽性率為15%[13]。劉佳等在2017 年~2018 年調(diào)查了山東省濰坊地區(qū)11 410 份雞血清樣本,采用雞白痢/傷寒平板凝集試驗(yàn)的檢測結(jié)果顯示肉種雞的平均陽性率為7.08%,蛋種雞和商品蛋雞平均陽性率分別為10.91%和48.17%[14]。元振杰等調(diào)查了2015 年~2016 年西藏拉薩市部分雞場采集的1 203 份樣品,結(jié)果顯示禽沙門氏菌的平均陽性率為48.96%等[15]。

我國在《國家中長期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012—2020 年)》中指出,在2020 年之前所有種雞場沙門氏菌病要達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。雞白痢沙門氏菌病凈化標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定,祖代和曾祖代養(yǎng)殖場陽性率要低于0.2%,父母代養(yǎng)殖場陽性率要低于0.5%,目前全國范圍內(nèi)官方報(bào)道僅有北京峪口禽業(yè)、吉林德大等少數(shù)龍頭養(yǎng)殖業(yè)通過了雞白痢凈化示范場或創(chuàng)建場的認(rèn)證。就最近的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,全國范圍內(nèi)雖然種雞場的祖代和父母代種雞的禽沙門氏菌抗體陽性率低于商品代雞群,但是大部分種雞場的禽沙門氏菌的感染率仍遠(yuǎn)高于凈化標(biāo)準(zhǔn),這一事實(shí)表明我國種雞場禽源沙門氏菌病的凈化仍是一項(xiàng)重要工作。

2 凈化檢測技術(shù)

近年來,種雞場實(shí)施禽沙門氏菌病的凈化技術(shù)和凈化措施是防控該病的重要途徑,為了從源頭上降低禽業(yè)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,快速準(zhǔn)確、成本低廉的檢測技術(shù)就顯得尤為重要。

2.1 傳統(tǒng)分離鑒定方法目前,國際上用于檢測沙門氏菌的標(biāo)準(zhǔn)方法主要有(Food and drug administra?tion,F(xiàn)DA)《FDA 分析手冊(2003 年3 月)》介紹的沙門氏菌的檢驗(yàn)方法《食品和動(dòng)物飼料的微生物學(xué)沙門氏菌檢測的水平位置檢測法》(ISO6579: 2002)。我國現(xiàn)行的沙門氏菌檢測的標(biāo)準(zhǔn)方法有《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)》(GB 4789.4-2010)等[16],這些檢測方法都是對樣品進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng),并結(jié)合生化方法得出檢測結(jié)果。傳統(tǒng)細(xì)菌分離培養(yǎng)鑒定技術(shù)檢測成本較低,在細(xì)菌分離和分型鑒定中起著重要的作用,是不可或缺的金標(biāo)準(zhǔn)檢測技術(shù)。這些標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)菌分離培養(yǎng)方法大多是利用木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(Xylose ly?sine deoxycholate agar,XLD)培養(yǎng)基和亞硫酸鉍瓊脂(Bismuth sulfite agar,BS)等選擇鑒別培養(yǎng)基,分離鑒定沙門氏菌的標(biāo)準(zhǔn)操作程序大約需要4 d~7 d,培養(yǎng)方法繁瑣,需要依賴手工操作和主觀判斷[17],對一些生化特性相似的其它種屬菌無法準(zhǔn)確鑒別[18]。一些研究者也在傳統(tǒng)分離培養(yǎng)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了縮短細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間等一系列優(yōu)化。劉知奇等利用疏水網(wǎng)膜過濾濃縮樣品中的細(xì)菌,提高菌體富集效率從而達(dá)到縮短檢測時(shí)間的目的,檢測時(shí)間縮短到3 d,操作步驟略為簡化[19]。黃文宇等在傳統(tǒng)檢測方法上提出改進(jìn)措施,利用沙門氏菌分解丙烯乙二醇產(chǎn)酸使中性紅指示劑變紅的生化特性,通過添加物質(zhì)對選擇培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化,可同步實(shí)現(xiàn)沙門氏菌的分離與鑒定,縮短檢測時(shí)間至2 d[20]。上述的研究雖然對傳統(tǒng)分離鑒定方法進(jìn)行了優(yōu)化,縮短了檢測時(shí)間、簡化了檢測程序,但仍存在培養(yǎng)程序繁瑣,耗時(shí)費(fèi)力,效率低下的弊端,難以適應(yīng)禽源沙門氏菌病快速簡便凈化的要求。

2.2 免疫學(xué)檢測方法在禽源沙門氏菌的檢測方法中,以全血平板凝集試驗(yàn)為代表的經(jīng)典凝集試驗(yàn)使在大規(guī)模雞群中快速篩查雞白痢/傷寒真正成為可能[21],由于該方法的便捷性和實(shí)用性,具有無可比擬的優(yōu)勢,在美國國家家禽改良計(jì)劃的雞白痢/傷寒凈化工作中發(fā)揮了重要作用[5]。凝集原理是細(xì)菌顆粒性診斷抗原在電解質(zhì)存在且溫度適宜的條件下,結(jié)合相應(yīng)的血清抗體后,數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)凝集凝聚現(xiàn)象,僅通過肉眼就能觀察和判定結(jié)果。早在20世紀(jì)30 年代科學(xué)家們就開發(fā)了檢測雞白痢/傷寒的標(biāo)準(zhǔn)試管凝集試驗(yàn)(Standard tube agglutination test,STAT)、快速血清凝集(Rapid serum agglutination test,RSA)試驗(yàn)和用于全血平板凝集試驗(yàn)的染色抗原等[22],這些凝集試驗(yàn)為之后的禽沙門氏菌病的凈化工作奠定了基礎(chǔ)。凝集試驗(yàn)具有如下優(yōu)點(diǎn):操作簡便、成本低廉且不需要額外設(shè)備,尤其不需要實(shí)驗(yàn)室檢測設(shè)備就能完成檢測。因此,該方法在國內(nèi)禽沙門氏菌病的凈化工作得以廣泛應(yīng)用,但在實(shí)際應(yīng)用中出現(xiàn)了檢測結(jié)果不可靠的報(bào)道[23],有報(bào)道在雞白痢/傷寒凝集試驗(yàn)陽性雞的卵巢等器官中分離到諸如腸炎、海德堡、鼠傷寒等非雞白痢/傷寒沙門氏菌,提示非雞白痢/傷寒沙門氏菌感染可能會造成交叉反應(yīng)[24]。此外,也有假陰性漏檢的報(bào)道[17]??傊匀桨迥囼?yàn)為代表的經(jīng)典凝集試驗(yàn)的重復(fù)性穩(wěn)定性有待改進(jìn)和進(jìn)一步完善。本研究室也利用雞白痢沙門氏菌分離株制備了染色凝集抗原,通過以D 群沙門氏菌ELISA 作為金標(biāo)準(zhǔn)方法與商品化凝集抗原比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)二者的檢測結(jié)果總符合率僅為79.5%,而使用自制凝集抗原與ELISA 檢測結(jié)果的總符合率為88%,且自制凝集抗原出現(xiàn)的陽性反應(yīng)更快更強(qiáng),更易于現(xiàn)場的結(jié)果判定[21]。

ELISA 檢測法具有特異性強(qiáng)、靈敏性高等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)在各種病原微生物的檢測中廣泛應(yīng)用。最近研究表明,Ma 等選擇沙門氏菌pagC 編碼的外膜蛋白為沙門氏菌靶標(biāo)建立了一種檢測該外膜蛋白抗體的間接ELISA 法,其對87 份雞白痢陽性血清樣品的檢出率為86.5%(84/87),對93 份沙門氏菌陰性血清樣品的檢出率為0(0/93),此外該方法與凝集試驗(yàn)檢測252 份臨床雞血清檢測結(jié)果的符合率為80.6%,顯示了良好的特異性和靈敏度[25]。Li 等基于雞白痢沙門氏菌一種特異性的免疫原IpaJ 蛋白,建立了檢測IpaJ 蛋白抗體的間接ELISA 方法,400 ng/mL的包被抗原便能檢測出血清中的抗體,是監(jiān)測雞白痢沙門氏菌感染的一種新方法[26]。雖然近年來開發(fā)了一系列ELISA 方法[27-28],提高了檢測通量,但ELISA 方法檢測成本高,以BioChek 公司的商品化D群沙門氏菌檢測試劑盒為例,一次檢測單個(gè)樣本的平均費(fèi)用為5 元~10 元,且需要相應(yīng)儀器,并不適合于大規(guī)模養(yǎng)殖現(xiàn)場應(yīng)用。而且該方法以LPS 作為包被抗原,可能與腸桿菌科內(nèi)不同種屬細(xì)菌的LPS存在一定程度的交叉反應(yīng),對結(jié)果判定有一定的影響。

免疫層析技術(shù)(Immunochromatography assay,ICA)是一種結(jié)合了免疫技術(shù)和色譜層析技術(shù)的檢測方法,劉志科等基于雞白痢沙門氏菌侵襲蛋白A(invA)建立了一種檢測該菌抗體的免疫膠體金試紙條,195 份臨床樣本的陽性檢出率為13.85%,與平板凝集試驗(yàn)的符合率為96.43%[29]。該方法操作簡便快速省時(shí),適合基層現(xiàn)場快速檢測。隨著檢測方法的快速發(fā)展,為避免肉眼觀察引起的誤差,對免疫層析技術(shù)又進(jìn)行了優(yōu)化,免疫熒光層析法即是將免疫學(xué)檢測方法與熒光標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合的快速檢測方法[30],Yeung 等首次以金納米顆粒作為探針載體,利用16S rDNA 探針-金納米顆粒建立了一種免疫層析方法,對已知樣品檢測的敏感性為100%,特異性為94.93%[31]。張捷等人采用低噪聲激發(fā)式熒光染料標(biāo)記沙門氏菌單克隆抗體,采用免疫層析技術(shù),制備了靶向于沙門氏菌的免疫層析試紙條。該試紙條特異性強(qiáng),靈敏度提高了約100 倍,其檢測限可達(dá)到0.5×103cfu/mL,整個(gè)檢測過程可在45 min 內(nèi)完成[32],相比傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法,免疫層析技術(shù)在時(shí)效性方面具有優(yōu)勢,是一種新型高效、即時(shí)快速的檢測方法。

2.3 分子生物學(xué)技術(shù)近年來,聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction,PCR)是一種敏感性高和特異性強(qiáng)的高通量方法[33]。傳統(tǒng)的PCR 方法是通過靶向單一的病原體特異性基因片段進(jìn)行檢測,如本研究室張江英等建立的靶向沙門氏菌I 型菌毛蛋白調(diào)控基因fimW 建立的PCR 檢測方法[34]和Xu 等基于毒力相關(guān)基因IpaJ 建立了檢測雞白痢沙門氏菌的PCR 方法[35]。值得注意的是本研究室楊溢等發(fā)現(xiàn)鞭毛鉤蛋白編碼基因flgE 存在于所有沙門氏菌中(包括無鞭毛沙門氏菌,如雞白痢和雞傷寒沙門菌),且其同源性高達(dá)100%,基于此建立了一種靶向flgE基因的單一PCR方法(專利申請?zhí)枺?01911036658.7)。Xu 等首次使用新基因SPUL 2693 作為雞白痢特異性診斷靶標(biāo),利用SPUL-2693 建立了一種特異性快速檢測雞白痢沙門氏菌的一步PCR 方法,靈敏度可達(dá)到2.143 pg/μL,且與傳統(tǒng)的血清學(xué)分型方法的結(jié)果一致[36]。隨著PCR 技術(shù)的不斷發(fā)展,研究人員建立了許多靶向不同目的基因的多重PCR 檢測方法,Kang等基于glgC 和speC 基因的多態(tài)性區(qū)域建立了檢測雞白痢沙門氏菌和雞傷寒沙門氏菌的雙重PCR 方法[37],該方法經(jīng)濟(jì)簡便高效。由于熒光定量PCR 方法比常規(guī)PCR 方法敏感性更高,研究者根據(jù)沙門氏菌的不同靶基因(如invA、fimY 等基因)建立了多種熒光定量PCR 方法檢測沙門氏菌。張童利篩選到雞白痢沙門氏菌基因組中特有的一段基因作為靶基因,建立了一種SYBR 熒光定量PCR 檢測方法,該方法最低檢測限為34 fg/μL,檢測模擬樣品時(shí)該方法與傳統(tǒng)細(xì)菌分離培養(yǎng)方法的符合率高達(dá)97.2%,為禽沙門氏菌病提供了快速診斷的技術(shù)手段[38]。研究者還開發(fā)了許多有優(yōu)異特異性和靈敏度的PCR 檢測方法,如首次利用PCR-高分辨率熔解曲線(PCRHRM)技術(shù)區(qū)分雞白痢沙門氏菌、雞傷寒沙門氏菌和其它菌的研究。Ren 等人基于遺傳標(biāo)記rfbs 基因第237 和598 位的單核苷酸多態(tài)性,發(fā)明了一種單核苷酸多態(tài)性(SNP)PCR-HRM 用于檢測雞白痢沙門氏菌和雞傷寒沙門氏菌[39]。PCR 技術(shù)準(zhǔn)確靈敏,但是對操作人員、儀器以及檢測條件要求較高,因此無法在基層大面積推廣使用。

環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是通過肉眼觀察擴(kuò)增產(chǎn)物焦磷酸鎂白色沉淀或者綠色熒光的有無來判斷靶基因是否存在,具有靈敏度高和特異性強(qiáng)、省時(shí)省力、成本低廉等優(yōu)點(diǎn),適合基層現(xiàn)場檢測[40]。在傳統(tǒng)的LAMP 方法的基礎(chǔ)上,研究者對該檢測方法進(jìn)行了優(yōu)化,Liu 等靶向invA 基因開發(fā)了一種將LAMP 與橫向側(cè)流試紙(LFD)相結(jié)合的檢測沙門氏菌的新型方法。該方法檢測雞白痢沙門氏菌基因組的靈敏度可達(dá)89 fg/μL,是常規(guī)PCR 的1 000 倍,適合基層和現(xiàn)場檢測[41]。LAMP 技術(shù)也有一些不容忽視的缺點(diǎn),因其擴(kuò)增產(chǎn)物通常要經(jīng)凝膠電泳觀察,這個(gè)過程容易產(chǎn)生氣溶膠,污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境并造成假陽性結(jié)果,且對操作環(huán)境和人員有較高的要求[42]。

2.4 其它技術(shù)生物傳感器(Biosensor)作為一種檢測手段已在食品安全檢測中廣泛應(yīng)用,與傳統(tǒng)的檢測方法相比其具有分析速度快,靈敏度高,能滿足現(xiàn)場檢測的需求等優(yōu)點(diǎn)。目前用于沙門氏菌檢測的傳感器包括酶傳感器、免疫傳感器、電化學(xué)生物傳感器、基因傳感器、光敏傳感器等[43-45]。生物傳感器雖然在沙門氏菌檢測方面應(yīng)用前景樂觀,但傳感器價(jià)格高,檢測費(fèi)用昂貴,限制了其在現(xiàn)場檢測的廣泛使用。

隨著科技的發(fā)展,許多新方法也不斷涌現(xiàn),如石英晶體微天平(Quartz crystal microbalance,QCM)[46]、夾心免疫分析方法(Sandwich immunoassay method)[47]和免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescence test)[48]等,這些新方法各有優(yōu)勢,但這些檢測方法離不開裝備精良的實(shí)驗(yàn)室條件和訓(xùn)練有素的實(shí)驗(yàn)人員,大多無法滿足禽源沙門氏菌現(xiàn)場檢測需求。

3 凈化檢測的開展

3.1 凈化檢測時(shí)間的選取根據(jù)種雞的飼養(yǎng)條件、日齡、血清抗體的消長規(guī)律,判定凈化檢測的最佳時(shí)間。動(dòng)物檢疫學(xué)研究表明,120 日齡~140 日齡的種雞處于性成熟階段,血清學(xué)檢測方法反應(yīng)速度快、檢出率高,為首次沙門氏菌檢疫的最佳時(shí)間。為進(jìn)一步提高種雞的凈化質(zhì)量,還必須進(jìn)行第二次檢疫,360 日齡~400 日齡的感染雞的血清抗體趨于平衡狀態(tài),第二次檢疫可把部分血清抗體陰性轉(zhuǎn)陽性的雞及時(shí)淘汰,此時(shí)則為第二次檢疫的最佳時(shí)間[49]。

3.2 凈化效果的評估規(guī)?;N禽場滿足血清學(xué)抽檢要求,即祖代以上種禽的沙門氏菌感染血清的陽性率低于0.2%,父母代種禽沙門氏菌感染的陽性率低于0.5%,連續(xù)兩年以上無臨床病例,即認(rèn)為達(dá)到禽源沙門氏菌病凈化狀態(tài)。

3.3 凈化后的綜合防控建立生物安全綜合防控體系來保障禽源沙門氏菌病的凈化效果。種雞場要定期開展滅鼠、滅蠅、滅蚊蟲等工作,嚴(yán)格控制并最大程度降低生物媒介的傳播風(fēng)險(xiǎn)。由于魚粉中存在嚴(yán)重的沙門氏菌污染問題,因而飼料原料中杜絕使用魚粉來減少病原菌的帶入,生產(chǎn)的飼料成品避免被接觸過魚粉的人員、物品、設(shè)備所污染。飼料中可添加酸化劑或益生菌等,以最大程度降低沙門菌的感染風(fēng)險(xiǎn);飲水中可持續(xù)添加氯制劑,避免通過飲水感染沙門氏菌[50-51]。

4 小結(jié)與展望

目前,禽沙門氏菌在我國各地的雞群中有較高的流行率,提示基層禽沙門氏菌病的凈化工作依然是任重道遠(yuǎn)。凈化工作的成功開展核心在于檢測技術(shù),適用于禽沙門氏菌病凈化工作的檢測方法需要滿足操作簡便性、結(jié)果可靠性、價(jià)格低廉等條件。操作簡便性是考慮到凈化工作的效率和基層養(yǎng)殖場的人員、設(shè)備等條件限制,應(yīng)避免過于復(fù)雜的操作程序,檢測方法應(yīng)該耗時(shí)短、易于掌握且不需要額外的設(shè)備為佳;結(jié)果可靠性是因?yàn)閮艋ぷ鞯挠行ч_展關(guān)鍵在于檢測方法的效果,結(jié)果可靠的檢測方法可以避免漏檢,減少檢測重復(fù)次數(shù),縮短凈化周期,還可以避免淘汰假陽性雞從而降低凈化成本;價(jià)格低廉,則是考慮養(yǎng)殖企業(yè)的凈化成本,由于凈化工作開展過程中的檢測樣本眾多,凈化檢測技術(shù)應(yīng)避免過高的單個(gè)檢測成本和依賴昂貴儀器。此外,凈化狀態(tài)的維持關(guān)鍵在于生物安全防控,只有有效的生物防控措施才能保障凈化工作的順利開展,才能避免病原菌的傳入從而維持凈化狀態(tài)。狠抓種雞的檢疫凈化工作,杜絕病原體傳入養(yǎng)雞場,嚴(yán)格執(zhí)行各種雞群的消毒措施,并通過科學(xué)的檢測方法剔除帶菌雞,能夠切實(shí)提高雞沙門氏菌病的檢疫凈化效率和保障禽沙門氏菌凈化狀態(tài)的維持。

上述禽沙門氏菌的凈化檢測技術(shù)都是優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)并存,一方面承擔(dān)凈化工作的單位可以根據(jù)實(shí)際情況選擇或組合選用合適的檢測技術(shù),另一方面也顯示出目前缺少一種同時(shí)滿足操作簡便性、結(jié)果可靠性、價(jià)格低廉等條件,適用于基層禽沙門氏菌病凈化工作的檢測方法。目前本研究室已經(jīng)研發(fā)了一種可以避免非特異性反應(yīng)的新穎檢測系統(tǒng),基于該系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)采一滴全血即時(shí)(2 min 內(nèi))、快速,僅需裸眼觀察即可判定結(jié)果,并形成了一套雞白痢/雞傷寒凈化程序。在實(shí)驗(yàn)室前期充分驗(yàn)證確保惰性載體檢測系統(tǒng)的優(yōu)良檢測性能后,目前已經(jīng)定點(diǎn)推廣到數(shù)家大型養(yǎng)殖企業(yè)應(yīng)用于種雞場雞白痢/雞傷寒沙門氏菌凈化工作中,并取得較好的成績。相信擁有核心檢測技術(shù)的新型凈化程序?qū)︷B(yǎng)禽業(yè)的長足發(fā)展,禽蛋產(chǎn)品質(zhì)量的安全保障,食品公共衛(wèi)生和人類健康都有著十分重要的意義。

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