葛賽金　張英軍　朱雯飛　吳輝　白樺　馬強(qiáng)　李曉旭

摘 要 研制了小型化介質(zhì)阻擋放電電離源（DBDI），將稀釋或溶解于有機(jī)溶劑中的樣品快速蒸發(fā)，以氣溶膠的形態(tài)引入等離子體噴射區(qū)域，與實(shí)驗(yàn)室自制的小型化線形離子阱質(zhì)譜儀聯(lián)用，儀器整機(jī)體積為31.5 cm×27.3 cm×27.3 cm，重量?jī)H18 kg。優(yōu)化了載氣流速和樣品快速蒸發(fā)區(qū)域的溫度，評(píng)估了儀器的檢測(cè)限和穩(wěn)定性等性能指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在選擇離子存儲(chǔ)條件下，可以檢測(cè)出0.2 ng/mL咖啡因樣品。通過(guò)連續(xù)進(jìn)樣并采集200張質(zhì)譜圖，計(jì)算得到樣品離子強(qiáng)度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為11.1%。最后，分別檢測(cè)了丙泊酚、精氨酸、SIPI5286和利血平等多種樣品，得到了對(duì)應(yīng)的質(zhì)譜圖。 研制的快速蒸發(fā)小型化DBDI源與實(shí)驗(yàn)室自制的小型化線形離子阱質(zhì)譜儀聯(lián)用系統(tǒng)具有定性能力強(qiáng)、分析速度快、檢測(cè)限低以及穩(wěn)定性較高等特點(diǎn)，在現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)檢測(cè)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用價(jià)值和發(fā)展前景。

關(guān)鍵詞 小型化; 介質(zhì)阻擋放電; 快速蒸發(fā); 線形離子阱質(zhì)譜儀; 檢出限

1 引 言

質(zhì)譜儀作為現(xiàn)代分析儀器的代表，具有很強(qiáng)的物質(zhì)定性和定量分析能力。近年來(lái)，小型化質(zhì)譜儀在食品檢測(cè)[1]、環(huán)境監(jiān)測(cè)[2，3]、公共安全[4]、法醫(yī)研究[5]以及化學(xué)合成[6，7]等領(lǐng)域發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。因此，研究和開發(fā)具備現(xiàn)場(chǎng)分析和應(yīng)急檢測(cè)能力的小型化質(zhì)譜儀已成為質(zhì)譜領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。質(zhì)譜儀小型化的難點(diǎn)之一是真空系統(tǒng)的小型化，2008年，Gao等[8]研制了基于一級(jí)真空系統(tǒng)和非連續(xù)大氣壓接口的便攜式質(zhì)譜儀，通過(guò)機(jī)械式地開關(guān)大氣壓接口，使離子以“脈沖”的方式進(jìn)入質(zhì)譜儀。Li等[9]設(shè)計(jì)了小型化三級(jí)差分真空系統(tǒng)，研制了具有連續(xù)大氣壓接口的小型化線形離子阱質(zhì)譜儀，并與納升電噴霧電離源聯(lián)用，獲得了良好的分析性能。此外，為了實(shí)現(xiàn)樣品的快速、實(shí)時(shí)和原位電離，各類敞開式電離源（如解吸電噴霧電離源（Desorption electrospary ionization， DESI）、實(shí)時(shí)直接分析（Direct analysis in real-time， DART）和介質(zhì)阻擋放電電離源（Dielectric barrier discharge ionization， DBDI）等）[10]也被相繼應(yīng)用于小型化質(zhì)譜儀。

DBDI作為一種新型的敞開式電離源，可實(shí)現(xiàn)對(duì)固態(tài)、液態(tài)和氣態(tài)樣品的實(shí)時(shí)在線分析。在毒品檢測(cè)[11]、爆炸物檢測(cè)[12]和藥物分析[13]等領(lǐng)域得到了廣泛運(yùn)用。DBDI利用介質(zhì)阻擋條件下的交流高壓放電，激發(fā)氦氣等惰性氣體生成等離子體，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的軟電離。2017年，胡舜迪等[14]利用DBDI源與大型LTQ（Linear ion trap quadrupole）質(zhì)譜儀聯(lián)用，快速檢測(cè)了4種極性較低的合成藥物，為藥物研究提供了一種新的、快速檢測(cè)方法。2018年，洪歡歡等[15]設(shè)計(jì)了單電極的DBDI源， 并與大型LTQ質(zhì)譜儀聯(lián)用， 提出了一種消電子技術(shù)，使部分弱極性樣品的檢測(cè)信噪比提高了5～6倍。DBDI與傳統(tǒng)大型質(zhì)譜儀聯(lián)用已得到較多實(shí)驗(yàn)論證。但是，其與小型化質(zhì)譜儀聯(lián)用方面的報(bào)道較少。

本研究將研制的快速蒸發(fā)小型化DBDI源與連續(xù)大氣壓接口-小型化線形離子阱質(zhì)譜儀聯(lián)用， 通過(guò)優(yōu)化載氣流速與樣品快速蒸發(fā)區(qū)域溫度等參數(shù)，提升了儀器的檢測(cè)限和穩(wěn)定性等性能指標(biāo)。利用此系統(tǒng)現(xiàn)場(chǎng)快速實(shí)時(shí)檢測(cè)了多種樣品，并得到了相應(yīng)的質(zhì)譜圖。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器與試劑

改進(jìn)的小型化線形離子阱質(zhì)譜儀（自制）[9]： 離子傳輸線長(zhǎng)度為10 cm，孔徑由0.25 mm 增大至0.30 mm; SVF-E1M-50/OEM前級(jí)泵（杭州思科渦旋公司）的抽速為50 L/min，并且與儀器分離; 石英管（江蘇科泰石英公司）外徑5 mm，內(nèi)徑3 mm，長(zhǎng)度53 mm; MFC2022流量控制模塊（瑞士Axetris公司）的流速控制范圍為0～3000 mL/min; 交流高壓模塊（云霄科技公司）的輸出幅值為2.5 kV，頻率為10 kHz; LU-926U（S）溫控器（安東Anthone）的溫度控制范圍為0～800℃。

無(wú)水甲醇（色譜級(jí)， 99.99%， 蘇州科同生物醫(yī)藥科技有限公司）; 氦氣（高純99.999%， 江蘇科米克化工有限公司）; 高純水（色譜級(jí)， 99.99%，江蘇博美達(dá)生命科學(xué)有限公司）; 咖啡因固體（純度99.7%， 江蘇博美達(dá)生命科學(xué)有限公司）; 丙泊酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（500 mg/L， 蘇州斯麥福生物科技有限公司）; 精氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 mg/L， 北京伊諾凱科技有限公司）; SIPI5286標(biāo)準(zhǔn)溶液（500 mg/L， 中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所提供）; 利血平標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 mg/L， 阿爾塔科技有限公司）。

2.2 實(shí)驗(yàn)平臺(tái)搭建

實(shí)驗(yàn)平臺(tái)及結(jié)構(gòu)示意圖如圖1A和1C所示。研制的單電極小型化DBDI源如圖1E所示，用鐵架臺(tái)將其水平固定，高度與小質(zhì)譜的大氣接口保持一致，等離子噴射端與質(zhì)譜大氣接口相距約1.5 cm，實(shí)物相對(duì)位置如圖1B所示。氦氣通過(guò)外徑為4 mm的直插式皮管，從氦氣瓶上減壓閥的出口處進(jìn)入流量傳感器，然后以一定的可控流速進(jìn)入石英玻璃管。銅環(huán)電極嵌套在石英玻璃管外表面，距離噴射端約0.8 cm， 在銅環(huán)電極上施加交流高壓，氦氣被激發(fā)成等離子體束向質(zhì)譜大氣壓接口噴射。樣品快速蒸發(fā)平臺(tái)如圖1D所示，內(nèi)部有加熱棒與PT100，外部用耐高溫的保溫棉包裹，然后用鐵架臺(tái)固定于質(zhì)譜大氣壓接口與等離子體噴射端之間的正下方，垂直距離約1 cm，便于快速蒸發(fā)后的氣溶膠狀樣品充分接觸等離子體火焰。

2.3 樣品處理

將咖啡因固體溶解于甲醇-水（1∶1， V/V）， 配制成濃度為50 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。將50 μg/mL咖啡因溶液用甲醇-水（1∶1， V/V）稀釋，分別配制成濃度為1、0.5、0.4、0.25、0.1 μg/mL和5、1、0.2 ng/mL的咖啡因待測(cè)溶液。以上述同樣的方法，分別將對(duì)應(yīng)的樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋，配制成濃度均為1 μg/mL的丙泊酚溶液、精氨酸溶液、SIPI5286溶液和利血平溶液。

2.4 實(shí)驗(yàn)方法

2.4.1 DBDI實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化 用移液槍取濃度為0.1 μg/mL的咖啡因溶液，每次均勻垂直滴加20 μL至樣品快速蒸發(fā)平臺(tái)上，分別優(yōu)化加熱溫度（70～210℃）以及載氣流速（100～600 mL/min）。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，根據(jù)咖啡因的平均響應(yīng)強(qiáng)度確定最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件。

2.4.2 咖啡因在聯(lián)用平臺(tái)上的響應(yīng)性能

用移液槍從低到高依次取不同濃度的咖啡因溶液，每次均勻垂直滴加20 μL至樣品快速蒸發(fā)平臺(tái)上，為減小實(shí)驗(yàn)誤差，相同濃度樣品均重復(fù)3～4次，計(jì)算得到各濃度下的平均信號(hào)強(qiáng)度。以平均信號(hào)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度（ng/mL）為橫坐標(biāo)，繪制咖啡因濃度響應(yīng)曲線。當(dāng)樣品濃度較低時(shí)，可通過(guò)增加離子化時(shí)間線性提高離子強(qiáng)度，最后統(tǒng)計(jì)的離子強(qiáng)度再歸一化至同一離子化時(shí)間。

2.4.3 聯(lián)用穩(wěn)定性測(cè)試 在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，每次用移液槍抽取20 μL 100 ng/mL咖啡因樣品，垂直滴加至快速蒸發(fā)平臺(tái)上，采集200張譜圖并繪制信號(hào)強(qiáng)度分布圖，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2.4.4 對(duì)其它樣品的快速檢測(cè)

用移液槍抽取30 μL的不同測(cè)試樣品，分別均勻垂直滴加至加熱蒸發(fā)平臺(tái)上，通過(guò)DBDI實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化以及質(zhì)譜電參數(shù)的調(diào)試，測(cè)得相應(yīng)的質(zhì)譜圖。

3 結(jié)果與討論

3.1 DBDI實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化

快速蒸發(fā)區(qū)的溫度會(huì)影響待檢測(cè)樣品離子的信號(hào)強(qiáng)度。本實(shí)驗(yàn)中，控制載氣流速為400 mL/min， 加熱溫度變化范圍在70℃～210℃時(shí)，得到樣品離子信號(hào)強(qiáng)度與加熱溫度的關(guān)系如圖2A所示。當(dāng)樣品加熱溫度為170℃時(shí)，信號(hào)強(qiáng)度最大，溫度繼續(xù)升高，信號(hào)強(qiáng)度略有下降。原因可能是隨著溫度升高，樣品揮發(fā)率提高，在相同條件下，有更多的氣溶膠狀樣品接觸等離子體火焰，信號(hào)強(qiáng)度增強(qiáng)，若溫度繼續(xù)升高，樣品揮發(fā)量趨于飽和，而在高溫下部分樣品熱裂解，導(dǎo)致信號(hào)強(qiáng)度降低。因此，選擇最優(yōu)的加熱咖啡因樣品的溫度為170℃。

載氣流速會(huì)影響等離子體中亞穩(wěn)態(tài)的He數(shù)量，從而影響電離效率。本實(shí)驗(yàn)中，控制樣品加熱溫度為170℃，氦氣流速?gòu)?00 mL/min增加至600 mL/min，得到樣品離子信號(hào)強(qiáng)度和載氣流速的關(guān)系如圖2B所示。隨著載氣流速增大，單位時(shí)間內(nèi)樣品電離出的離子數(shù)目增多，信號(hào)強(qiáng)度增大。但倍增器檢測(cè)離子數(shù)存在上限，當(dāng)載氣流速大于400 mL/min時(shí)，信號(hào)強(qiáng)度并無(wú)明顯變化。因此，選擇最優(yōu)的載氣流速為400 mL/min。

3.2 咖啡因在聯(lián)用平臺(tái)上的響應(yīng)性能

在優(yōu)化后的實(shí)驗(yàn)條件下，將快速蒸發(fā)小型化DBDI源與小型化線形離子阱質(zhì)譜儀聯(lián)用，檢測(cè)不同濃度的咖啡因樣品，咖啡因濃度響應(yīng)曲線如圖3A所示。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，離子阱在選擇離子存儲(chǔ)模式下工作，通過(guò)存儲(chǔ)波形逆傅里葉變換（SWIFT）技術(shù)對(duì)目標(biāo)離子（m/z=195）進(jìn)行了質(zhì)量隔離。隔離目標(biāo)離子的q=0.35，設(shè)置SWIFT波形的缺口頻率為127～135 kHz。離子化時(shí)間為100 ms時(shí)，0.2 ng/mL 咖啡因樣品的質(zhì)譜圖如圖3B所示。與本研究組前期報(bào)道的樣品測(cè)試結(jié)果[9]進(jìn)行對(duì)比，改進(jìn)后的儀器與DBDI源聯(lián)用，儀器檢測(cè)限從5 ng/mL降低至0.2 ng/mL。儀器檢測(cè)性能提高的原因主要在于兩個(gè)方面：一是離子傳輸線的內(nèi)徑增大，提高了離子引入效率; 二是快速蒸發(fā)-DBDI電離源提升了樣品的電離效率。

3.3 聯(lián)用穩(wěn)定性測(cè)試

儀器的穩(wěn)定性是小型化質(zhì)譜儀的重要性能指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)在離子選擇存儲(chǔ)模式下，分析100 ng/mL的咖啡因樣品，選擇的存儲(chǔ)目標(biāo)離子為m/z=195，電離時(shí)間為0.05 ms。按照2.4.3節(jié)的進(jìn)樣和實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行操作，每次滴加樣品后，記錄質(zhì)譜信號(hào)強(qiáng)度最高的一張質(zhì)譜圖。待上一次的質(zhì)譜信號(hào)降至基線附近，再進(jìn)行下一次樣品滴入，共重復(fù)200次實(shí)驗(yàn)，采集了每一張譜圖的樣品離子豐度，得到的信號(hào)強(qiáng)度分布圖如圖4所示，計(jì)算得到相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為11.1%。表明快速蒸發(fā)小型化DBDI源與小型化線形離子阱質(zhì)譜儀聯(lián)用，在樣品連續(xù)進(jìn)樣、快速分析時(shí)，穩(wěn)定性較高。

3.4 對(duì)其它樣品的快速檢測(cè)

利用本聯(lián)用平臺(tái)對(duì)丙泊酚、精氨酸、SIPI5286和利血平進(jìn)行了現(xiàn)場(chǎng)快速實(shí)時(shí)檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)，僅需滴加幾滴樣品至快速蒸發(fā)加熱平臺(tái)上。檢測(cè)得到的質(zhì)譜圖如圖5所示，與相關(guān)文獻(xiàn)中檢測(cè)精氨酸[16]、SIPI5286[17]、利血平[9]得到的質(zhì)譜圖一致。 結(jié)果表明，上述4種樣品電離均檢測(cè)出了＼[M+H＼]+的質(zhì)譜峰，這與DBDI的潘寧離子化原理吻合[18]。實(shí)驗(yàn)中，從進(jìn)樣到正確檢出樣品的時(shí)間小于1 s。綜上，本聯(lián)用平臺(tái)具備了快速、實(shí)時(shí)分析熱穩(wěn)定樣品的能力。

4 結(jié) 論

將研制的快速蒸發(fā)小型化DBDI源與小型化線形離子阱質(zhì)譜儀聯(lián)用。優(yōu)化了樣品快速蒸發(fā)區(qū)域的加熱溫度與載氣流速，測(cè)試了儀器的分析性能，繪制了咖啡因樣品濃度響應(yīng)曲線，結(jié)果表明，在選擇離子存儲(chǔ)模式下，儀器的檢測(cè)限可達(dá)到0.2 ng/mL。在穩(wěn)定性測(cè)試中，樣品離子強(qiáng)度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為111%。利用本系統(tǒng)對(duì)丙泊酚、精氨酸、SIPI5286和利血平進(jìn)行了現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，并得到了相應(yīng)的質(zhì)譜圖。本系統(tǒng)對(duì)熱不穩(wěn)定的樣品尚無(wú)法有效分析，今后工作中需針對(duì)此問(wèn)題進(jìn)行改進(jìn)。

References

1 Yang S， Ding J， Zheng J， Hu B， Li J， Chen H， Zhou Z， Qian X. Anal. Chem.， 2009， 81（7）： 2426-2346

2 Hendricks P I， Dalgleish J K， Shelley J T， Kirleis M A， McNicholas M T， Li L， Chen T C， Chen C H， Duncan J S， Boudreau F. Anal. Chem.， 2014，? 86（6）： 2900-2908

3 Huang G， Gao L， Duncan J， Harper J D， Sanders N L， Ouyang Z， Cooks R G. J. Am. Soc. Mass Spectrom.， 2010，? 21： 132-135

4 Giannoukos S， Brkic B， Taylor S， France N. J. Am. Soc. Mass Spectrom.， 2015，? 26： 231-239

5 Lawton Z E， Traub A， Fatigante W L， Fatigante L M， Mancias J， O'Leary A E， Hall S E， Wieland J R， Oberacher H， Gizzi M C， Mulligan C C. J. Am. Soc. Mass Spectrom.， 2017，? 28（6）： 1048-1059

6 Saha S， Mandal M K， Nonami H， Hiraoka K. Anal. Chim. Acta，? 2014，? 839： 1-7

7 Klute F D， Michels A， Schütz A， Vadla C， Horvatic V， Franzke J. Anal. Chem.， 2016，? 88（9）： 4701-4705

8 Gao L， Cooks R G， Ouyang Z. Anal. Chem.， 2008， ?80（11）： 4026-4032

9 Li X X， Zhang Y J， Ge S J， Qian J， Miao W. Analyst， 2019，? 144： 5127-5135

10 Wells J M， Roth M J， Keil A D， Grossenbacher J W， Justes D R， Patterson G E， Barket D J. J. Am. Soc. Mass Spectrom.， 2008， ?19： 1419-1424

11 March C， Karnes H T， Mclean A， Mukherjee P S. Biomed. Chromatogr.， 2011，? 15： 100-107

12 Cooks R G， Ouyang Z， Takats Z， Wiseman J M. Science， 2006，? 311（5767）： 1566-1570

13 Zhan X， Zhao Z， Yuan X， Wang Q， Li D， Xie H， Li X， Zhou M， Duan Y. Anal. Chem.， 2013，? 85（9）： 4512-4519

14 HU Shun-Di， LIU Qi-Qiang， ZHAO Peng， HONG Huan-Huan， SHI Zhen-Zhi， ZHOU Zhen-Yu， WEN Lu-Hong. Chinese J. Anal. Chem.， 2018，? 46（7）： 1017-1024

胡舜迪， 劉其強(qiáng)， 趙 鵬， 洪歡歡， 史振志， 周鎮(zhèn)宇， 聞路紅. 分析化學(xué)， 2018，? 46（7）： 1017-1024

15 HONG Huan-Huan， ZHAO Peng， NING Lu-Sheng， WEN Lu-Hong， XU Tie-Feng. Chinese J. Anal. Chem.， 2017，? 45（10）： 1529-1534

洪歡歡， 趙 鵬， 寧錄勝， 聞路紅， 徐鐵鋒. 分析化學(xué)， 2017，? 45（10）： 1529-1534

16 CHU Yan-Qiu， XIAO Yu， LING Xing， DING Chuan-Fan. Chinese J. Anal. Chem.， 2013，? 41（1）： 152-158

儲(chǔ)艷秋， 肖 育， 凌 星， 丁傳凡. 分析化學(xué)， 2013，? 41（1）： 152-158

17 Xiao Y， Ding Z Z， Xu C S， Dai X H， Fang X， Ding C F. Anal. Chem.， 2014，? 86（12）： 5733-5739

18 Na N， Zhao M X， Zhang S C， Yang C D， Zhang X R. J. Am. Soc. Mass Spectrom.， 2007，? 18： 1859-1862

Abstract A miniaturized dielectric barrier discharge ionization （DBDI） source assisted with a sample rapid evaporation platform was developed. With the DBDI source， the sample solution could be evaporated rapidly into aerosol state and then transferred to plasma ionization region， which improved the efficiency of sample transmission and ionization. The miniaturized DBDI source was coupled to a homemade miniaturized linear ion trap mass spectrometer which had a total volume of 31.5 cm×27.3 cm×27.3 cm and a weight of about 18 kg. In the experiment， the flow rate of carrier gas （He） and the temperature of sample rapid evaporation platform were optimized， and the limit of detection （LOD） and stability of the instrument were evaluated. Experimental results indicated that a LOD of 0.2 ng/mL （caffeine solution， mass selected storage， m/z 195） was achieved. The relative standard deviation （RSD） of the mass spectrum intensity was calculated to be 11.1%. Furthermore， various samples including propofol， arginine， SIPI5286 and reserpine were analyzed using the instrument. The combination of rapid evaporation assisted DBDI source and the homemade miniaturized linear ion trap mass spectrometer had the characteristics of strong qualitative ability， fast analytical speed， low limit of detection and high stability， and showed a great potential in the field of real-time and in-situ analysis.

Keywords Miniaturization; Dielectric barrier discharge ionization; Rapid evaporation; Linear ion trap mass spectrometer; Limit of detection