張華，李遠(yuǎn)波

(1.寶雞市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西 寶雞 722405;2.陜西省漢中市鎮(zhèn)巴縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西 漢中 723600)

骨髓細(xì)胞的主要作用是造血，骨髓細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變，包括細(xì)胞的質(zhì)與量病理改變，與多種血液疾病的發(fā)生發(fā)展具有較強(qiáng)相關(guān)性[1]。隨著醫(yī)療檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查、免疫學(xué)檢查、染色體檢查等技術(shù)已廣泛應(yīng)用在疑似白血病患者的早期輔助診斷中，其中骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)技術(shù)是臨床應(yīng)用最廣泛的診斷技術(shù)之一，主要是通過(guò)顯微鏡或自動(dòng)化儀器將骨髓細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量改變進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，臨床上用于血液病的早期診斷、臨床療效評(píng)估[2]。本研究分析了骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查在疑似白血病患者輔助診斷中的價(jià)值。報(bào)告如下。

1 臨床資料

1.1一般資料 選取我院2018年4月至2019年6月收治的128例白血病患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：知曉本研究利弊，由本人或監(jiān)護(hù)人簽署知情同意書，本研究符合倫理學(xué)研究要求(倫理學(xué)批號(hào)：17481)；排除標(biāo)準(zhǔn)：排除重癥肝腎功能異常者；惡性腫瘤患者；入組研究前接受系統(tǒng)白血病治療者及其他可能影響本次研究結(jié)果的病例。入組患者男性68例，女性60例；年齡20～75歲，平均(55.14±12.09)歲。無(wú)中途退出及死亡病例。

1.2檢測(cè)方法

1.2.1骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查 所有患者入組后擇期采集骨髓備檢，使用瑞氏吉姆薩染色分類技術(shù)，采用非特異性酯酶、氟化物抑制試驗(yàn)及過(guò)氧化物酶染色等多種方法對(duì)髓細(xì)胞實(shí)施染色，按照FAB 分型標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分型。過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)為白血病的陽(yáng)性細(xì)胞超過(guò)3%。(1)免疫學(xué)檢查 所有患者入組后擇期采集3 mL骨髓液(肝素抗凝)，分離核細(xì)胞備檢，采用間接熒光標(biāo)記法對(duì)活細(xì)胞測(cè)定，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)抗體，單克隆抗體包含B系、T系、巨核系、髓系、干系及淋系。免疫學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)淋系、 髓系抗原陽(yáng)性細(xì)胞超過(guò)20%時(shí)診斷為陽(yáng)性。(2)染色體檢查 所有患者入組后擇期采集3 mL骨髓液備檢(肝素抗凝)，采用G帶技術(shù)顯帶，觀察染色體核型差異。

1.3觀察指標(biāo) 觀察入組患者的骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果、免疫學(xué)檢查結(jié)果及染色體檢查結(jié)果。

2 結(jié) 果

2.1骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果 128例患者經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)檢查確診103例，診斷符合率為80.47%(103/126)；10例患者無(wú)法區(qū)分白血病亞型；6例符合WHO分型依據(jù)，其原始細(xì)胞為21%～29%，4例患者為粒、紅、巨三系細(xì)胞和粒系、巨核系兩系細(xì)胞合并病態(tài)造血現(xiàn)象，5例患者的骨髓有核細(xì)胞顯著增多合并骨髓細(xì)胞病態(tài)造血表現(xiàn)。

2.2免疫學(xué)檢查結(jié)果 10例患者無(wú)法通過(guò)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)區(qū)分白血病亞型。其中5例患者過(guò)氧化物酶染色低于3%，免疫學(xué)檢測(cè)結(jié)果提示，4例同時(shí)存在淋系、髓系抗原表達(dá)，兩系積分超過(guò)2分，確診為雜合型白血?。?例患者免疫學(xué)檢測(cè)提示兩種髓系抗原表達(dá)(CD13、CD15、CD38、CD56、CD117)，確診為確診M5a。5例骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果誤診患者：3例患者過(guò)氧化物酶染色低于3%，其中2例患者確診為急性淋巴細(xì)胞白血病L2、1例患者確診為大顆粒淋巴細(xì)胞白血?。涣?例患者免疫學(xué)檢查單克隆抗體干系陰性。

2.3染色體檢查結(jié)果 10 例患者無(wú)法通過(guò)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)區(qū)分白血病亞型。5例患者染色體檢查正常，5例染色體異常。3例經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查證實(shí)為急性髓系白血病M3b， 其中2例單抗檢查染色體正常，基因檢測(cè)診斷為M2b，1例存在特征性染色體核型異常證實(shí)為M2b。

3 討 論

白血病是人類血液系統(tǒng)常見病癥之一，發(fā)病因素主要為化學(xué)因素、遺傳因素、接觸放射物質(zhì)或病毒等[3-4]。骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查直觀體現(xiàn)細(xì)胞的質(zhì)與量改變，應(yīng)用顯微鏡或自動(dòng)化儀器對(duì)于骨髓血液細(xì)胞的觀察更加細(xì)致，結(jié)合化學(xué)染色技術(shù)對(duì)于血液疾病診斷準(zhǔn)確度更高，采用FAB分型規(guī)則為血液疾病的診斷提供技術(shù)支撐[5]。骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，當(dāng)有骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)增高時(shí)，骨髓出現(xiàn)增生，疑似疾病有白血病、溶血性貧血、脾功能亢進(jìn)等；當(dāng)有核細(xì)胞計(jì)數(shù)降低時(shí)，骨髓造血組織功能異常，可診斷為再生障礙性貧血[6]。

為了降低骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查白血病患者誤診及漏診率的影響，臨床上可采用免疫學(xué)檢測(cè)或染色體檢測(cè)結(jié)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)來(lái)提高診斷準(zhǔn)確度，對(duì)患者的預(yù)后評(píng)估提供技術(shù)支撐[7]。慢性白血病發(fā)病率較白血病整體發(fā)病率低，在急性白血病中，急性單核細(xì)胞白血病與急性早幼粒細(xì)胞白血病檢出率最高[8]。對(duì)于白血病患者的早期鑒別診斷中應(yīng)對(duì)患者的血常規(guī)指標(biāo)改變情況進(jìn)行評(píng)估，當(dāng)白細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)生異常變化時(shí)，白血病發(fā)病率可激增[9]。外周血血液涂片對(duì)于白血病患者的早期診斷意義重大，白血病患者早期外周血血液圖片鏡下檢測(cè)可提示細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，通過(guò)對(duì)比白血病患者骨髓涂片、外周血涂片中的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變情況，對(duì)于白血病的早期診斷提供依據(jù)[10]。白血病患者的髓細(xì)胞內(nèi)核細(xì)胞增生明顯活躍或極度活躍表現(xiàn)為幼稚細(xì)胞或 原始細(xì)胞水平超正常水平20%或占比達(dá)到半數(shù)以上，可診斷為急性白血病。故對(duì)于急性白血病患者的早期實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)，應(yīng)在入院后擇期行骨髓穿刺涂片檢查， 盡早做出準(zhǔn)確診斷[11]。臨床研究結(jié)果提示，骨髓增生異常綜合征主要受造血干細(xì)胞影響，導(dǎo)致外周血細(xì)胞生成無(wú)效、骨髓細(xì)胞病態(tài)造血；再生障礙性貧血患者主要受骨髓干細(xì)胞增殖、分化障礙及造血微環(huán)境異常影響，患者的造血組織受損，影響骨髓正常造血功能，骨髓造血細(xì)胞發(fā)生再生功能障礙[11]。半數(shù)以上的骨髓異常綜合征患者轉(zhuǎn)化為白血病的風(fēng)險(xiǎn)較大，骨髓異常綜合征患者的正常細(xì)胞多受到遺傳基因影響發(fā)生克隆性改變[12]。FAB分型技術(shù)對(duì)白血病患者的細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查依據(jù)為過(guò)氧化物酶染色大于3%即可診斷為淋巴細(xì)胞白血病或急性非淋巴細(xì)胞白血病[12]。FAB分型技術(shù)無(wú)法對(duì)骨髓細(xì)胞多形態(tài)改變及淋巴細(xì)胞白血病做出準(zhǔn)確評(píng)估，而細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)聯(lián)合免疫學(xué)檢測(cè)可以對(duì)上述多形態(tài)細(xì)胞改變做出準(zhǔn)確評(píng)估，聯(lián)合檢測(cè)技術(shù)具有重復(fù)性及多參數(shù)評(píng)估優(yōu)勢(shì)，采用免疫學(xué)檢測(cè)方法對(duì)于骨髓細(xì)胞的抗原進(jìn)行細(xì)致分析評(píng)估，可對(duì)患者細(xì)胞髓系或淋系來(lái)源加深認(rèn)識(shí)，對(duì)于后期依據(jù)白血病亞型進(jìn)行分類診斷具幫助意義，一定程度上提高了診斷準(zhǔn)確度，為白血病患者的臨床治療措施選擇及預(yù)后評(píng)估提供技術(shù)支撐[13]。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)提示，采用骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查聯(lián)合免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)對(duì)于白血病患者的早期診斷具較高的診斷符合率，提高白血病患者的確診率，為后續(xù)治療方法的選擇及對(duì)癥治療提供依據(jù)[13]。本次研究結(jié)果證實(shí)，128例患者經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)檢查確診103例，診斷符合率為80.47%；10例患者無(wú)法區(qū)分白血病亞型；6例符合WHO分型依據(jù)，其原始細(xì)胞為21%～29%，4例患者為粒、紅、巨三系細(xì)胞和粒系、巨核系兩系細(xì)胞合并病態(tài)造血現(xiàn)象，5例患者的骨髓有核細(xì)胞顯著增多合并骨髓細(xì)胞病態(tài)造血表現(xiàn)。10 例無(wú)法通過(guò)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)區(qū)分白血病亞型患者采用免疫學(xué)檢測(cè)方法，結(jié)果顯示：其中5例患者過(guò)氧化物酶染色低于3%，4例同時(shí)存在淋系、髓系抗原表達(dá)，兩系積分超過(guò)2分，確診為雜合型白血病；1例患者免疫學(xué)檢測(cè)提示兩種髓系抗原表達(dá)，確診為確診M5a。5例骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果誤診患者：3例患者過(guò)氧化物酶染色低于3%，其中2例患者確診為急性淋巴細(xì)胞白血病L2、1例患者確診為大顆粒淋巴細(xì)胞白血??；另2例患者免疫學(xué)檢查單克隆抗體干系陰性。

綜上所述，應(yīng)用骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查對(duì)疑似白血病患者實(shí)際診斷價(jià)值高，診斷符合率高，早期確診及分型有助于白血病患者的后續(xù)治療，臨床應(yīng)用前景廣泛。