陳 穎 王珍妮 宋 月 白 欣

（大連市疾病預(yù)防控制中心理化技術(shù)檢驗所，遼寧 大連 116021）

草甘膦（glyphosate）是一種非選擇性、無殘留滅生性除草劑[1]，對多年生根雜草非常有效[2]，廣泛用于橡膠、桑、茶、果園及甘蔗地。目前對草甘膦檢測多采用液相色譜－質(zhì)譜法（HPLC-MS）[3-4]和高效液相色譜柱后衍生法[5-6]。本次研究選用超高效液相色譜柱后衍生裝置，以生活飲用水中殘留的草甘膦為研究對象，建立分析的方法，并得到了滿意的結(jié)果，可以滿足對生活飲用水中殘留草甘膦測定的要求。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品：生活飲用水源水、二次加壓水。

1.1.2 儀器與試劑：Waters超高效液相色譜柱后衍生裝置（H-class型）；超高速低溫離心機（HITACHI cf16RXⅡ，10000r/min）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（國產(chǎn)）；氮吹儀（國產(chǎn)）；多功能濾膜（孔徑0.22μm，Waters）。草甘膦標準品（純度均≥98.0%，Dr.公司）；甲醇（德國Merck，均為色譜純）；鄰苯二醛（阿拉丁）；β-巰基乙醇（天津福晨化學(xué)品廠）；磷酸、磷酸二氫鉀、EDTA、氯化鈉、氫氧化鈉、硼酸、氫氧化鉀（均為國藥集團，分析純）。

1.2 方法

1.2.1 標準溶液的配制：準確稱取草甘膦固體標準品0.01000 g溶于水并定容至10 mL，可得1 mg/mL的標準儲備液，存放于-20 ℃的聚丙烯管中。

1.2.2 樣品前處理

1.2.2.1 樣品濃度≥100 μg/L時，不需要濃縮，取9.9 mL樣品和0.1 mL 0.1 mol/L的EDTA，經(jīng)0.22 μm濾膜后，取50 μL進樣測定。

1.2.2.2 樣品低于檢出限時需要對水樣進行濃縮，取700 mL水樣，分三次（250、250、200 mL）加入500 mL圓底燒瓶進行旋蒸，并每次加入適量鹽酸（5、5、4 mL），待蒸干后，用1 mL流動相進行溶解并過0.22 μm濾膜，取50 μL進樣測定。

1.2.3 添加回收實驗：取直接測定濃度≤100 μg/L的水樣700 mL，加入2 μg/mL的草甘膦標準溶液1 mL，依據(jù)1.2.2.2進行前處理并測定。

1.2.4 實驗條件。色譜條件：色譜柱：Waters IC-PakTM Ion Exclusion（7.8 mm×150 mm）；進樣量：50 μL；流動相：陽離子交換流動相。

2 結(jié)果

2.1 檢出限：進樣量為5ng絕對量的譜圖S/N＞3，本方法的檢出限為0.1 μg/mL。

2.2 標準曲線：標準系列見表1、圖1、圖2。

表1 草甘膦標準系列

圖1 草甘膦標準曲線

圖2 草甘膦標準系列的譜圖

2.3 儀器精密度：見表2、圖3。

2.4 添加回收實驗：見表3。

3 討 論

3.1 標準溶液保存與儲存：準確稱取草甘膦標準樣品0.01000 g 4份，分別溶于水并定容至100 mL，1號于玻璃標準溶液瓶中4 ℃保存，2號于聚丙烯標準溶液瓶中4 ℃保存，3號于玻璃標準溶液瓶中-20 ℃保存，4號于聚丙烯標準溶液瓶中-20 ℃保存。在1個月后和2個月后分別稀釋成標準系列進行測定，發(fā)現(xiàn)在第1個月后的測定中，于聚丙烯標準溶液瓶中-20 ℃保存的標準儲備液響應(yīng)值就已經(jīng)降低很多，其他3支管中稀釋的標準系列低濃度端幾乎無響應(yīng)。在第2個月后的測定中，于聚丙烯標準溶液瓶中-20 ℃保存的標準儲備液稀釋的標準系列低濃度端幾乎無響應(yīng)。因此對于0.1 mg/mL的標準儲備液只能在聚丙烯標準溶液瓶中-20 ℃保存1個月。

3.2 離子柱和對應(yīng)流動相的選擇：本實驗選用的是Waters 公司生產(chǎn)的IC-PakTM Ion Exclusion（7.8 mm×150 mm）色譜柱，為陽離子交換柱，因此使用陽離子流動相。

表2 草甘膦儀器精密度測定

圖3 絕對量為20 ng和200 ng精密度

表3 草甘膦回收實驗結(jié)果

3.3 流動相比例的選擇：陽離子交換流動相為0.68g磷酸二氫鉀溶于1L甲醇水（2/98）溶液，用磷酸調(diào)節(jié)pH為2.1。離子交換柱的流動相應(yīng)為純水溶液，但實驗中發(fā)現(xiàn)峰形和保留時間均不理想。加入甲醇（2/98）后，峰形和保留時間有明顯改善，因此實驗中雖然選擇離子交換柱，但仍需要加入一定比例的甲醇作為流動相。

3.4 衍生試劑配制時的注意事項：衍生化試劑不穩(wěn)定，需現(xiàn)用現(xiàn)配，且鄰苯二醛有劇毒，配制時要做好防護。

4 結(jié) 論

本次實驗建立的測定生活飲用水中草甘膦的方法，靈敏度、回收率高，重現(xiàn)性好，完全符合我國對草甘膦的監(jiān)管要求。