蔡豪斌，黃麗華，覃麗清，蔣麗香，黃喜善

（1.桂林師范高等?？茖W校化學與藥學系，廣西桂林541199；2.桂林普元生物技術(shù)有限公司，廣西桂林541001）

金花茶（Camellia nitidissima C．W．Chi）為山茶科山茶屬金花茶組植物，是我國廣西特有珍稀古老茶樹品種[1]?，F(xiàn)代醫(yī)藥學研究發(fā)現(xiàn)金花茶含有茶多酚類、黃酮類、微量元素以及氨基酸等多種生物活性物質(zhì)，其化學成分和藥用價值的相關(guān)研究在諸多領(lǐng)域取得進展[2]。近年來，生物活性成分提取溶劑的研究發(fā)現(xiàn)一種新型非有機溶劑——小分子團磁化水[3]。這種溶劑具有進出細胞能力強、提取物溶出量大的特性。本文基于這一理論首次將小分子團磁化水引入金花茶葉活性成分提取的研究中，以探索其作為高效提取溶劑的實際意義。

一、實驗方法

（一）試劑

小分子團磁化水由佛山市富鑫科技實業(yè)有限公司公司提供，超純水、蒸餾水均為桂林師范高等?？茖W?；瘜W藥學系實驗室制備。

95%乙醇、甲醇、聚酰胺粉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、硫酸亞鐵、酒石酸鉀鈉以及苯等，均為市售分析純（AR）化學試劑。

（二）儀器

可見紫外分光光度計，型號：specord 200 plus，德國耶拿公司；超聲波儀，型號：kQ5200Dv，昆山市超聲儀器有限公司；電子天平（0.0001）；抽濾器；烘箱；2000mL圓底燒瓶。

（三）實驗樣品

廣西中港高科金花茶產(chǎn)業(yè)集團提供金花茶樣品。該樣品采集于廣西防城港十萬大山大祿金花茶種植基地，為人工種植的防城港普通種金花茶，摘取二年生鮮葉供測試。

二、樣品提取和測定

（一）樣品預(yù)處理

金花茶鮮葉經(jīng)蒸餾水洗凈、晾干、去除葉梗，使用高速粉碎機粉碎，過篩，制成均勻干粉，然后置烘箱反復烘烤至恒重。每一個測試樣品質(zhì)量100 g干粉，分別置于2000 mL圓底燒瓶中，備用。

（二）兩種溶劑的提取方法

1.濃縮液提取方法

稱取同一干樣粉料100g分別置于兩個圓底燒瓶中，各加入1500mL溶劑（料液比1：15），其一為超純水對照溶劑，另一為小分子團磁化水測試溶劑。在常溫浸泡半個小時后轉(zhuǎn)至90℃水浴鍋提取2 h；室溫下冷卻后真空抽濾，測定濾液pH值。繼而收集濾渣加溶劑定容到1200 mL（料液比1：12），如上法進行二次提取1.5 h，測定濾液pH。將兩次濾液合并即得濃縮提取液。

2.濃縮固體物提取方法

將兩次提取收集混合的濾液置水浴鍋中加熱蒸發(fā)濃縮，至一定體積后混合成一個樣品，測定pH，繼續(xù)在水浴鍋上蒸發(fā)至干。此后，將干樣轉(zhuǎn)至烘箱分次緩慢烘干，溫度為60℃，第1次3 h，第2次0.5 h，第3次0.5 h，以此類推，直至恒重為止，即為最終固態(tài)濃縮物，迅速放置于干燥器內(nèi)保存，備用。

（三）總黃酮含量測定

取適當體積二次提取的樣液采用蘆丁比色法測定提取液總黃酮含量[4]。

（四）茶多酚含量測定

取4 mL二次提取合并的樣液，使用分光光度法在540 nm波長測定吸光度，以每克干粉所含茶多酚重量表示（mg／g）[5]。

（五）固體物含量測定

使用感量0.0001電子天平稱量經(jīng)過烘干恒重的固體物，質(zhì)量單位為mg。

三、結(jié)果與分析

（一）總黃酮和茶多酚提取率

總黃酮提取率以小分子團磁化水為高。而茶多酚的結(jié)果則以超純水提取率為高。見表1。

表1 兩種提取溶劑提取總黃酮和茶多酚結(jié)果比較

（二）濃縮固體物含量

在相同實驗條件下比較兩種溶劑的濃縮固體物提取率，結(jié)果見表2。對100 g干粉的提取效果分別為：超純水3次提取的濃縮固體物重量分別為（g）14.17、14.36、14.17，期望值為 14.23，得率 14.23%（g／100 g）；小分子團磁化水為（g）22.48、21.38、20.88，期望值21.58，得率 21.58%（g／100g）。表明小分子團磁化水的固體物提取率高于超純水。超純水提取的方差為0.241，小分子團磁化水為0.490，兩種提取方法的可信度均在允許范圍之內(nèi)，說明小分子團磁化水作為提取溶劑與超純水比較具有相對穩(wěn)定性。

表2 兩種溶劑提取固態(tài)物結(jié)果比較

四、討 論

普通天然水的結(jié)構(gòu)是由100-200個水分子締合成的大分子簇團，經(jīng)過充分磁處理裂解分離成許多小分子團，富含小分子團的離子水被稱為小分子團磁化水。這種小分子團磁化水的滲透性、溶解力和擴散力均強于大分子團水[6]。目前，小分子團磁化水已被應(yīng)用于食品加工工藝，例如，在啤酒、豆乳、魚貝類等加工過程引入小分子團磁化水替代普通天然水，以提升產(chǎn)品內(nèi)在品質(zhì)[7]；卷煙加工使用小分子團磁化水進行浸梗處理，發(fā)現(xiàn)在未經(jīng)蒸梗工藝處理的條件下，煙?；赝嘎时憧商嵘?9.3%[8]。小分子磁化水應(yīng)用于提取蕓豆清蛋白的比較研究是將60目粉料按22：1液料比在溫度30℃下浸提2h，結(jié)果顯示小分子團磁化水組提取率最高（48.96%），而自來水組為42.79%、純凈水組為40.87%[9]。本研究使用小分子團磁化水作為溶劑提取金花茶葉活性物質(zhì)，在60℃水浴進行二次蒸餾，先后對3組樣品分別提取出現(xiàn)相同的趨勢：固體物和總黃酮得率均大于超純水所得，如固體物依次為（超純水／小分子 團 磁 化水，mg）14.17／22.48、14.36／21.38、14.17／20.88；總黃酮 1.49／1.95、1.89／2.60、1.48／2.36。但茶多酚得率則以超純水為高，依次為 23.92／19.58、26.73／21.21、27.06／23.96。其機制有待研究。實驗結(jié)果提示，小分子團磁化水應(yīng)用于金花茶葉活性物質(zhì)提取具有進一步研究的價值。