易 帆，李志勇，李 萍，李 瓊，趙四林，胡 燕，陳煜楓，曾召瓊，鄧長娟，王占祥，謝小兵△

(1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗與病理中心，湖南長沙 410007；2.廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科，福建廈門 361000；3.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，湖南長沙 410007)

謝小兵

根據(jù)國家衛(wèi)生健康委員會辦公廳/國家中醫(yī)藥管理局辦公室發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第6版)》[1]，新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)常見的臨床表現(xiàn)有發(fā)熱、乏力、干咳等癥狀，而對確診病例的診斷需具備以下病原學(xué)證據(jù)之一：(1)呼吸道標(biāo)本或血液標(biāo)本實時熒光定量 PCR 檢測2019新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)核酸陽性；(2)呼吸道標(biāo)本或血液標(biāo)本病毒基因測序，與已知的SARS-CoV-2高度同源。但由于多種因素的影響，造成部分核酸檢測結(jié)果呈現(xiàn)假陰性[2-3]。《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第5版)》[4]增加了“臨床診斷病例”，采取“應(yīng)收盡收”的原則，提高診斷效率。本研究通過檢測COVID-19患者的白細胞介素-6(IL-6)、紅細胞沉降率(ESR)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、白細胞計數(shù)(WBC)、淋巴細胞百分率(LYMPH%)、淋巴細胞計數(shù)(LYMPH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-Mb)等指標(biāo)水平，探討各指標(biāo)在COVID-19診斷中的價值，輔助診斷COVID-19，提高診斷效率。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究收集2020年1-2月湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院和廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院COVID-19留觀或住院患者44例和30例體檢健康者為研究對象,分為新冠肺炎組和健康對照組。COVID-19確診患者44例，其中男25例、女19例，平均年齡(48.63±16.05)歲，上述病例均經(jīng)核酸檢測得以確診。體檢健康者30例，其中男14例、女16例，平均年齡(51.10±15.45)歲。所選研究對象在性別、年齡等方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(性別：χ2=0.737，P=0.39；年齡:t=-0.658，P=0.513)。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn) 參照《新型冠狀病毒肺炎診療方案》第2版到試行第6版中COVID-19的診斷標(biāo)準(zhǔn)，COVID-19確診患者需經(jīng)過核酸檢測確診，或者病毒基因測序，與已知SARS-CoV-2高度同源；本研究納入的所有COVID-19病例均是通過實時熒光反轉(zhuǎn)錄PCR方法檢測患者咽拭子標(biāo)本或者糞便標(biāo)本[5]中SARS-CoV-2核酸，結(jié)果為陽性而確診的。本研究納入的健康對照組均排除了COVID-19。

1.3 儀器與試劑 IL-6、CK和CK-Mb檢測試劑盒和Cobas 8000全自動生化分析儀購自德國羅氏公司；Precil XC-40B型全自動血沉分析儀及配套專用ESR測定管購自北京普利生儀器有限公司；CRP測定試劑盒購自邁瑞公司；DxC800全自動生化儀購自美國貝克曼公司；XN9000血液分析流水線和血常規(guī)試劑盒購自日本希森美康公司。

1.4 方法 COVID-19患者和體檢健康者于入院次日清晨抽取空腹12 h靜脈血2～5 mL，在2 h內(nèi)檢測。IL-6、CK和CK-Mb檢測，先以4 000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min，得到血清標(biāo)本，采用電化學(xué)發(fā)光法；ESR檢測采用自動血沉儀法；CRP檢測采用乳膠免疫比濁法；WBC、LYMPH%、LYMPH檢測采用激光流式細胞術(shù)和核酸熒光染色檢測技術(shù)。均由熟練的實驗室授權(quán)人員按照操作規(guī)范及試劑說明進行檢測。根據(jù)試劑盒設(shè)定的各項指標(biāo)正常參考范圍為IL-6:0～7 pg/mL；CRP:0～10 mg/L；ESR：男性0～15 mm/h，女性0～20 mm/h；CK：男性0～170 U/L,女性0～170 U/L；CK-MB：0～24 U/L；WBC：(4～10)×109/L；LYMPH%：20%～50%；LYMPH：(1.1～3.2)×109/L。

2 結(jié) 果

2.1 兩組的IL-6、ESR和CRP水平比較 新冠肺炎組和健康對照組的IL-6、ESR和CRP水平進行比較，結(jié)果顯示：新冠肺炎組的IL-6水平為4.12(1.53～14.16)pg/mL，高于健康對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；新冠肺炎組ESR和CRP的水平分別為61.5(19.75～85.00)mm/h、16.16(8.30～37.33)mg/L，顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組的IL-6、ESR和CRP水平比較[M(P25～P75)]

2.2 IL-6、ESR和CRP對于COVID-19的診斷效能 IL-6、ESR和CRP單項檢測診斷COVID-19的AUC依次分別為0.577、0.872、0.905，靈敏度依次分別為38.6%、75.0%、72.7%，特異度依次分別為100.0%、96.7%、100.0%。CRP對COVID-19的診斷效能要優(yōu)于ESR、IL-6，ESR對COVID-19的診斷效能要優(yōu)于IL-6。而IL-6、ESR和CRP三項聯(lián)合檢測診斷COVID-19的AUC為0.939，靈敏度為86.4%，特異度為96.7%，要優(yōu)于IL-6+ESR、IL-6+CRP、ESR+CRP兩項聯(lián)合檢測及IL-6、ESR和CRP單項檢測的診斷效能。見圖1、表2。

2.3 COVID-19患者的IL-6、ESR、CRP和其他指標(biāo)檢測情況 在44例COVID-19患者中，有25例患者進行了WBC、LYMPH%和LYMPH等血常規(guī)項目檢測，結(jié)果表明：40.91%的患者IL-6升高，79.55%的患者ESR升高，68.19%的患者CRP升高，93.18%的患者CK正常，95.45%的患者CK-Mb正常，48.00%的患者WBC正常，44.00%的患者WBC下降，64.00%的患者LYMPH%下降，52.00%的患者LYMPH下降。見表3。

圖1 IL-6、ESR和CRP單項和聯(lián)合檢測診斷COVID-19的ROC曲線

表2 IL-6、ESR和CRP單項和聯(lián)合檢測診斷COVID-19的診斷效能

表3 COVID-19患者的IL-6、ESR、CRP和其他指標(biāo)檢測情況[n(%)]

3 討 論

根據(jù)目前的研究和流行病報道，COVID-19具有傳染性強、潛伏期長等特點[6]，但其臨床癥狀與普通感冒和流感并無太大差異。研究表明，SARS-CoV-2感染人體，主要是通過與人體血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)結(jié)合，并且可能侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，抑制呼吸功能，造成呼吸衰竭[7-8]。目前通過實時熒光反轉(zhuǎn)錄PCR檢測來自呼吸道或血清的標(biāo)本，病毒核酸呈陽性，才能確診為COVID-19?！缎滦凸跔畈《痉窝自\療方案(試行第5版)》[4]增加了“臨床診斷病例”，擴大診斷范圍，提高診斷效率，并且將典型的肺部影像學(xué)表現(xiàn)作為診斷COVID-19的重要依據(jù)之一，避免COVID-19患者進一步病情加重和加速傳播的機會。

IL-6、ESR和CRP是目前常用的傳統(tǒng)快速輔助診斷感染性疾病的檢測指標(biāo)，其中CRP對于診斷肺炎感染的特異度較差，而IL-6是臨床上公認(rèn)的診斷肺部感染的實驗室指標(biāo)[9]。當(dāng)人體組織受到感染時，IL-6和CRP都會快速升高，ESR會加快。本研究通過檢測COVID-19患者IL-6、ESR和CRP的水平，探討COVID-19患者和健康人群IL-6、ESR和CRP的水平差異，分析IL-6、ESR和CRP對COVID-19的診斷效能。

本研究結(jié)果表明，COVID-19患者的ESR和CRP水平顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第5版)》[4]提到“多數(shù)患者CRP和ESR升高”，與本研究結(jié)果相一致。而COVID-19患者的IL-6水平雖然要高于健康人群，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，這可能是由于大部分病例是輕癥患者和病例數(shù)較少的原因，還需進一步擴大樣本量，進行下一步研究。IL-6、ESR和CRP單項檢測診斷COVID-19的AUC依次分別為0.577、0.872、0.905，靈敏度依次分別為38.6%、75.0%、72.7%，特異度依次分別為100.0%、96.7%、100.0%。CRP對COVID-19的診斷效能要優(yōu)于ESR、IL-6，ESR對COVID-19的診斷效能要優(yōu)于IL-6。而IL-6、ESR和CRP三項聯(lián)合檢測診斷COVID-19的AUC為0.939，靈敏度為86.4%，特異度為96.7%，要優(yōu)于IL-6+ESR、IL-6+CRP、ESR+CRP兩項聯(lián)合檢測及IL-6、ESR和CRP單項檢測的診斷效能。由此可得出，IL-6、ESR和CRP三項聯(lián)合檢測診斷COVID-19具有較好臨床特異度和較高靈敏度，可以作為臨床輔助診斷COVID-19的必要補充。

此外，本研究對44例COVID-19患者中的25例患者進行了WBC、LYMPH%和LYMPH等血常規(guī)項目檢測，結(jié)果表明有40.91%的患者IL-6升高，79.55%的患者ESR升高，68.19%的患者CRP升高，93.18%的患者CK正常，95.45%的患者CK-Mb正常，48.00%的患者WBC正常，44.00%的患者WBC下降，64.00%的患者LYMPH%下降，52.00%的患者LYMPH下降。這與《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第6版)》中的“白細胞總數(shù)正?；驕p少，淋巴細胞計數(shù)減少”基本一致，《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第6版)》中的“激酶增高”和本研究大部分患者的CK和CK-Mb正常不一致，可能是由于本研究的大部分病例是輕癥患者和病例數(shù)較少的原因。

4 結(jié) 論

綜上所述，IL-6、CRP和ESR三項指標(biāo)聯(lián)合檢測的診斷效能優(yōu)于IL-6、CRP、ESR單項檢測和其他兩項指標(biāo)聯(lián)合檢測的診斷效能，所以IL-6、ESR和CRP對COVID-19有一定的診斷價值，《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第5版)》實施后的“臨床診斷病例”中，結(jié)合影像學(xué)檢查，有利于輔助COVID-19的診斷。