河南大學附屬鄭州頤和醫(yī)院 國際健康管理中心 （河南，鄭州，450000）

宮頸癌是作為當前女性群體臨床最常見的一類惡性腫瘤疾病，宮頸癌疾病發(fā)生是因人乳頭瘤病毒（HPV）的感染所致[1-2]。對于年齡≤30 歲的年輕女性群體而言，雖然HPV的感染率相對較高，但多數感染者為HPV一過性、無癥狀感染，不會導致發(fā)生宮頸癌，而在常規(guī)HPV-DNA篩查檢測中，對該群體HPV篩查存在較高的假陽性[3]。因此，尋找一種特異更強且陽性預測值高的宮頸癌篩查方法對于年輕女性群體具有重要意義。研究以探討高危型HPV E6/E7mRNA檢測在年輕女性群體宮頸機會性篩查的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

納入本院2018年1月至2018年12月本院接收宮頸薄層液基細胞學（TCT）篩查顯示非典型鱗狀上皮細胞/低度鱗狀上皮內病變（ASCUS/LSIL）患者100例，研究納入患者TCT診斷ASCUS、LSIL，患者年齡在22～30歲，性生活史＞3年；研究排除合并存在其他惡性腫瘤疾病、排除血液系統(tǒng)或其他臟器功能疾病患者、排除精神疾病患者。隨機將患者分成常規(guī)組（n=50）與實驗組（n=50）；常規(guī)組納入患者年齡 23～30歲，平均年齡（26.8±2.2）歲；實驗組納入患者年齡23～29 歲，平均年齡（26.2±2.6）歲。兩組患者一般資料對比未見明顯差異。納入患者入選研究前均簽署知情權同意書，研究內容經院倫理委員會批準通過。

1.2 方法

常規(guī)組患者予以HPV-DNA檢測、實驗組患者予以HPV E6/E7mRNA檢測，對兩組患者檢測陽性患者均進行陰道鏡+活檢，對檢測結果為宮頸上皮內瘤變（CIN）Ⅱ級患者經p16免疫組化染色進行分流管理，CIN＞Ⅱ級患者進行支持治療，檢測結果為陰性者則持續(xù)進行隨訪。分別對比兩組患者檢測情況。

（1）TCT檢查：患者均行膀胱截石位，醫(yī)生通過毛刷刷取患者少許宮頸管內壁脫落細胞樣本，將之置于取樣瓶，參考國際癌癥協(xié)會TBS診斷系統(tǒng)（2004）的報告方式，針對患者宮頸癌的高危因素，包括機體健康狀態(tài)、陰道炎癥、ASCUS以及高度鱗狀上皮內病變 （HSIL）等各項內容依次進行評價，ASCUS及以上檢查結果為陽性。（2）HPV-DNA檢測：患者均行膀胱截石位，經陰窺鏡獲取患者宮頸表面的分泌物樣本，置于細胞保存液內備檢。取樣本經溫箱水浴加熱處理5min，依據操作說明書分步進行檢測。（3）HPV E6/E7mRNA檢測：患者均行膀胱截石位，經陰窺鏡獲取患者宮頸表面的分泌物樣本，置于細胞保存液內備檢。樣本均經5000r/min離心機離心處理5min后棄去上清液，樣本經蒸餾水清洗，進行二次離5min，復棄去上清液，經裂解劑裂解處理，取裂解液檢測，檢測步驟按照HPV E6/E7mRNA檢測說明書分步進行。研究所用逆轉錄試劑盒為Fernentas（美國）生產，RNA提取試劑盒為QIAGEN公司（德國）生產，PCR試劑盒為上海吉瑪公司生產。以檢測值≥1表示檢測陽性。（4）陰道鏡穿刺活檢：對兩組患者檢測陽性患者均進行陰道鏡+活檢，依據《婦產科學》（第9版）標準進行病理學診斷，將患者檢測分為宮頸炎性改變、宮頸上皮內瘤變CINⅠ～Ⅲ級、宮頸癌。

1.3 統(tǒng)計學處理

通過SPSS20.0統(tǒng)計軟件對研究涉及數據依次進行統(tǒng)計分析。兩組患者診斷情況對比經x2檢驗，P＜0.05表示對比存在明顯差異。

2 結果

實驗組患者檢測陽性率相比常規(guī)組明顯更低（P＜0.05）；兩組患者檢測陽性病例經陰道鏡+活檢顯示，實驗組CIN＜Ⅱ級檢測率相比常規(guī)組更低 （P＜0.05），實驗組CIN≥Ⅱ級檢測率相比常規(guī)組未見顯著差異（P＞0.05）。 見下表 1。

表1 兩組受檢者檢測情況與病理診斷結果對比

3 討論

宮頸癌是作為中青年女性群體中常見的一類惡性腫瘤疾病。臨床研究表明，宮頸癌致病原因為HPV病毒感染，臨床對HPV患者需采取措施及時進行預防[4-5]。對于宮頸癌的預防方法，臨床上主要以注射HPV疫苗以及進行宮頸癌篩查等方法進行，其中HPV疫苗的價格相對昂貴，其普及程度相對較低；而宮頸癌篩查較疫苗注射經濟實惠且操作簡便，是作為當前宮頸癌預防的主要方向。對于宮頸癌篩查，臨床上傳統(tǒng)方法仍是以細胞學篩查方法為主，而細胞學篩查在目前尚缺乏一個統(tǒng)一的標準，檢驗結果易受檢驗者的主觀因素影響，導致檢測重復性低。HPV DNA檢測方法是宮頸癌細胞學篩查的一個輔助手段，在臨床應用較廣泛，但該方法在年輕婦女HPV感染篩查上的假陽性率較高，原因是年輕婦女HPV感染多為一過性、不致癌感染，臨床上需通過尋找其他方法以提高對HPV的篩查準確率。HPV病毒中的E6/E7基因是作為宮頸癌關鍵致病基因，其中，E6能有效抑制p53基因的表達并對細胞凋亡過程進行阻斷，而E7能抑制 pRB基因表達，從而導致細胞周期發(fā)生失控，通過檢測HPV E6/E7 mRNA能有效反映病毒的活性與病毒致癌能力。研究常規(guī)組患者予以HPV-DNA檢測、實驗組患者予以HPV E6/E7mRNA檢測，結果顯示，實驗組患者檢測陽性率相比常規(guī)組明顯更低 （P<0.05）；兩組患者檢測陽性病例經陰道鏡+活檢顯示，實驗組CIN<Ⅱ級檢測率相比常規(guī)組更低（P<0.05），實驗組CIN≥Ⅱ級檢測率相比常規(guī)組未見顯著差異 （P>0.05），研究結果表示，HPV E6/E7mRNA檢測能有效篩查女性患者CIN<Ⅱ級。

綜上所述，相比于常規(guī)HPV-DNA檢測篩查方法，HPV E6/E7mRNA在篩查與預測宮頸癌疾病患者準確性相對更高，該方法具有更高的臨床應用價值。