鶴壁市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 （河南，鶴壁，458030）

許昌市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 （河南，許昌，461000）

藥用白礬為硫酸鹽類礦物明礬石經(jīng)加工提煉制成。主含含水硫酸鋁鉀〔KAl（SO4）2·12H2O。外用解毒殺蟲，燥濕止癢；內(nèi)服止血止瀉，祛除風(fēng)痰?！吨袊?guó)藥典》2015年版一部質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于白礬的檢驗(yàn)項(xiàng)目主要有：性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定，這些項(xiàng)目多為化學(xué)定性、容量分析方法，隨著現(xiàn)代分析儀器的發(fā)展和應(yīng)用，在定性鑒別和定量檢測(cè)方面得到了廣泛的應(yīng)用，其中，電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICPMS）在元素測(cè)定方面可實(shí)現(xiàn)多種不同元素、不同價(jià)態(tài)的同時(shí)測(cè)定，而且檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確度高，以逐漸成為礦物藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)和質(zhì)量控制關(guān)鍵技術(shù)。

《中國(guó)藥典》2015年版一部質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中將鋁鹽、鉀鹽、銨鹽、銅鹽、鋅鹽及重金屬作為控制白礬質(zhì)量的關(guān)鍵，實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)項(xiàng)目多，對(duì)檢驗(yàn)人員的技能水平要求高，所用到的試劑品種多，配制也較為復(fù)雜，另外，在銨鹽的檢查實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要用到碘化汞鉀試液，而該試液的配制過(guò)程需要有毒試劑二氯化汞，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的安全會(huì)造成隱患，毒性試劑的采購(gòu)也較為困難?；诖?，本實(shí)驗(yàn)結(jié)合《中國(guó)藥典》2015年版一部中關(guān)于白礬的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，篩選鋁（Al）、鉀（K）、鐵（Fe）、鋅（Zn）、銅（Cu）、鉛（Pb）、鎘（Cd）、砷（As）、汞（Hg）等9種無(wú)機(jī)元素作為白礬質(zhì)量控制的關(guān)鍵指標(biāo)，采用ICP-MS法同時(shí)測(cè)定白礬中9種元素，并建立其無(wú)機(jī)元素的參考標(biāo)準(zhǔn)，為藥用白礬的質(zhì)量評(píng)價(jià)和質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器NexION 350X電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）， 美國(guó) Perkin Elmer公司；Mili-Q 超純水器，美國(guó)Milipore公司；ML204T型電子分析天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；MARS 6高通量密閉微波消解儀，美國(guó)CEM公司。

1.2 試藥

鋁（Al）（GSB 04-1713-2004）、鍺（Ge）（GSB 04-1728-2004）、銠（Rh）（GSB 04-1746-2004）、金（Au）（GSB 04-1715-2004）單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL，國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心），鉀（K）（GBW（E）082776）、鐵（Fe）（BW 30012-1000-NC-50）、銅（Cu）（GBW（E）082780）、鋅 （Zn）（GBW（E）082778）、砷（As）（BW 30018-1000-N-50）、鎘（Cd）（GBW （E）082822）、汞 （Hg）（BW 30029-1000-N-50）、 鉛 （Pb）（GBW （E）082825） 單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L，壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心），調(diào)諧液為鈹（Be）、鈰（Ce）、鐵（Fe）、銦（In）、鋰（Li）、鎂（Mg）、鉛（Pb）、鈾 （U）混 合 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 （1μg/L，美 國(guó) Perkin Elmer公司），65% 硝酸 （優(yōu)級(jí)純，德國(guó) Merck公司）；超純水。

1.3 藥材

15批次藥用白礬來(lái)源于不同藥店，均按照《中國(guó)藥典》2015年版一部進(jìn)行全項(xiàng)目檢驗(yàn)，其中4批次不合格，不合格項(xiàng)目為銨鹽和鐵鹽，經(jīng)鑒定為白礬偽品銨明礬[NH4Al（SO4）2·12H2O]。

2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 測(cè)定條件

2.1.1 微波消解儀參數(shù)：

步驟恒溫時(shí)間m i n 1 1 2 0 5 5 2 1 5 0 5 1 0 3 1 9 0 5 2 0控制溫度℃升溫時(shí)間m i n

2.1.2 ICP-MS參數(shù)：RF功率 1 600W；霧化器 同心霧化器，霧化氣流量 0.86L/min；輔助氣流量1.20L/min；等離子體氣流量18L/min；碰撞氣 （氦氣）流量3.2mL/min；采樣錐孔徑 1.1mm；截取錐鎳錐，截取錐孔徑0.9 mm；超級(jí)截取錐孔徑1.0mm；積分時(shí)間1s；延遲時(shí)間45s；掃描方式：?jiǎn)吸c(diǎn)跳峰；重復(fù)次數(shù)3。

表1 9種待測(cè)元素質(zhì)量數(shù)、檢測(cè)模式與內(nèi)標(biāo)元素

2.2 對(duì)照品溶液制備

2.2.1 穩(wěn)定劑

取2mL金（Au）標(biāo)準(zhǔn)溶液，用2%硝酸溶液稀釋至1000mL，用于配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.2.2 精密吸取

Al、K、Fe、Cu、Zn、As、Cd、Hg、Pb 標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，Ge、Rh標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用穩(wěn)定劑稀釋成每1mL含Al、K 0、1、2、4、8、10μg，F(xiàn)e 0、100、200、400、800、1 000ng，Cu、Zn、As、Cd、Hg、Pb 0、2、4、8、16、20ng， 內(nèi)標(biāo) Ge、Rh 10ng的系列濃度混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.3 供試品溶液制備

取樣品粉末0.1g，精密稱定，置微波消解罐中，加5mL硝酸按“2.1.1”進(jìn)行消解，消解完成后將消解液放冷至室溫，多次洗滌將消解液轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)，用2%硝酸定容至刻度，作為供試品溶液（1），同法制備空白溶液。

取樣品粉末0.1g，精密稱定，置微波消解罐中，加5mL硝酸按“2.1.1”進(jìn)行消解，消解完成后將消解液放冷至室溫，多次洗滌將消解液轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中，用2%硝酸定容至刻度，作為供試品溶液（2）；精密量取5mL供試品溶液（2）至100ml量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)，用2%硝酸稀釋至刻度，作為供試品溶液（3）。

2.4 線性關(guān)系

取“2.2.2”項(xiàng)下系列濃度混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照“2.1.2”條件，依次測(cè)定各系列濃度混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液。以各元素分析峰的響應(yīng)值與內(nèi)標(biāo)元素的參比峰響應(yīng)值的比值為縱坐標(biāo)（Y），標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度（mg·L-1或 μg·L-1）為橫坐標(biāo)（X）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得各元素標(biāo)準(zhǔn)品的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)。結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明，Al、K 元素在 0～10 000ng·mL-1，F(xiàn)e 元素在 0～1 000ng·mL-1，Cu、Zn、As、Cd、Hg、Pb 在 0～20ng·mL-1，9種元素的線性關(guān)系均較好，相關(guān)系數(shù)均在0.999 4～0.999 9之間。

2.5 檢出限與定量限

在“2.1.2”條件下，連續(xù)測(cè)定11次空白樣品溶液，以3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差所對(duì)應(yīng)的待測(cè)元素的濃度作為檢出限，以10倍標(biāo)準(zhǔn)偏差所對(duì)應(yīng)的待測(cè)元素的濃度作為定量限，結(jié)果見(jiàn)表2，9種元素的檢出限與定量限均能滿足檢測(cè)要求。

2.6 回收率

取樣品粉末0.1g，精密稱定后加入適量“1.2”中待測(cè)9種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.3”項(xiàng)下制備成供試品溶液，在“2.1.2”條件下進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算各元素的回收率，結(jié)果見(jiàn)表2，9種元素的回收率在98.0%～109.5%，均能滿足檢測(cè)要求。

2.7 重復(fù)性

取同一白礬樣品6份，每份0.1g，精密稱定，按“2.3”項(xiàng)下制備成供試品溶液，在“2.1.2”條件下進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算各元素的RSD值，結(jié)果見(jiàn)表2，9種元素的重復(fù)性RSD均在0.6～2.6之間，均能滿足檢測(cè)要求。

2.8 穩(wěn)定性

取同一白礬樣品供試品溶液，分別在0，0.5，1，2，4，6h 進(jìn)行測(cè)定， 計(jì)算各元素的 RSD 值，結(jié)果見(jiàn)表2，9種待測(cè)元素6h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.9 樣品的測(cè)定

取15批樣品，按照“2.3”項(xiàng)下制備供試品溶液，在“2.1.2”條件下進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表3，按照《中國(guó)藥典》2015年版一部規(guī)定，藥用白礬含含水硫酸鋁鉀〔KAl（SO4）2·12H2O 不得少于 99.0%，Al的理論值應(yīng)不低于56 326.8μg·g-1，K 的理論值應(yīng)不低于81 630.1μg·g-1。通過(guò)測(cè)定15批次藥用白礬，合格樣品1～11號(hào)Al元素的含量為 56 208.62～57 824.90μg·g-1，K 元素的含量為 82 145.56～82 765.23μg·g-1；對(duì)于銨鹽和鐵鹽不合格的12～15號(hào)樣品中，K元素的含量很低，僅為 198.23～1 138.33μg·g-1，F(xiàn)e 的含量明顯高于合格樣品，2015年版中國(guó)藥典白礬檢查項(xiàng)鐵鹽的測(cè)定采用化學(xué)反應(yīng)方法，有文獻(xiàn)[6]采用分光光度法測(cè)定鐵元素的含量，當(dāng)鐵含量≤171.4μg·g-1時(shí)，鐵鹽檢查才為合格。應(yīng)用ICP-MS法測(cè)定，不合格樣品均明顯高于 171.4μg·g-1，為 812.14～1127.61μg·g-1Al、K、Fe元素與藥典法具有很好的一致性。 2015年版中國(guó)藥典對(duì)植物藥中重金屬及有害元素限量標(biāo)準(zhǔn)，即Hg≤0.2μg·g-1，Cu≤20.0μg·g-1，Pb≤5.0μg·g-1，Cd≤0.3μg·g-1，As≤2.0μg·g-1，依照該規(guī)定來(lái)看，白礬和銨明礬重金屬及有害元素的含量均未超出限量要求。

表2 9種待測(cè)元素的線性方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、定量限、回收率、重復(fù)性及穩(wěn)定性試驗(yàn)

表3 15批樣品9種元素含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

應(yīng)用ICP-MS測(cè)定Hg元素的含量時(shí)，由于Hg具有較強(qiáng)的記憶效應(yīng)，會(huì)對(duì)后續(xù)的測(cè)定產(chǎn)生一定的干擾，為了消除記憶效應(yīng)，本實(shí)驗(yàn)采用金（Au）元素標(biāo)準(zhǔn)溶液作為穩(wěn)定劑，Au與Hg形成金汞齊，從而可以消除Hg元素的記憶效應(yīng)。

藥用白礬屬于高鹽基體，應(yīng)用ICP-MS檢測(cè)高鹽基體樣品時(shí)，會(huì)導(dǎo)致霧化效率發(fā)生改變，樣品中的鹽分會(huì)在錐孔上沉積而產(chǎn)生錐口效應(yīng)，而且高鹽基體會(huì)產(chǎn)生空間電荷效應(yīng)，這些都會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，根據(jù)文獻(xiàn)[2]將藥用白礬的上機(jī)濃度控制在0.2%以下，同時(shí)用Ge、Rh混合內(nèi)標(biāo)溶液校正基體效應(yīng)和信號(hào)發(fā)生的漂移，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

本實(shí)驗(yàn)采用ICP-MS法測(cè)定藥用白礬及其偽品銨明礬中9種元素的含量，藥用白礬中主要含Al、K元素，銨明礬中主要含Al、Fe元素，K元素的含量遠(yuǎn)低于藥用白礬中K元素的含量，而其他6種元素未見(jiàn)有明顯的差異性，由此可見(jiàn)控制藥用白礬中Al、K、Fe元素的含量成為控制藥用白礬質(zhì)量的關(guān)鍵。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)建立的方法可以為控制藥用白礬的質(zhì)量，為保證用藥的安全有效提供了科學(xué)的檢測(cè)方法。