濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科 （山東，濟(jì)寧，272100）

金黃色葡萄球菌 （Staphylococcus aureus，SAU）是臨床上常見的一類病原菌。SAU具有耐干燥、抵抗力強(qiáng)的特點(diǎn)，易在物體表面定植，是引起院內(nèi)感染的重要病原體之一。金黃色葡萄球菌可以產(chǎn)生A、B、C1、C2、C3、D、E 及 F 八種血清型腸毒素，對(duì)熱耐受性好，常引起食物中毒[1]。隨著抗菌藥物的濫用，SAU對(duì)抗菌藥物的耐藥性日趨嚴(yán)重，特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin resistant staphylococcus aureus，MRSA）的出現(xiàn)，使臨床抗菌藥物的選擇面臨更大壓力[2]。及時(shí)了解院內(nèi)SAU感染的腸毒素特點(diǎn)和耐藥趨勢(shì)，對(duì)指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物、控制耐藥菌株擴(kuò)散具有指導(dǎo)意義。本研究分析了2018年1月-2019年6月期間住院患者生物樣本中分離出的金黃色葡萄球菌的腸毒素特征及藥敏試驗(yàn)結(jié)果，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下：

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象

我院2018年1月-2019年6月住院患者送檢痰液、血液、尿液、分泌物、胸腹水、引流液、肺泡灌洗液等標(biāo)本中分離出的226株金黃色葡萄球菌，同一患者同一部位去除重復(fù)菌株，-80℃冰箱保存。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC29213，購于山東省臨床檢驗(yàn)中心。菌株和質(zhì)控菌株接種于血瓊脂平板上于37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.2 腸毒素檢測(cè)方法

采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)A型～E型 （SEA～SEE）腸毒素，試劑盒購自德國拜發(fā)公司，按照說明書進(jìn)行操作。

1.3 藥敏試驗(yàn)方法

藥敏試驗(yàn)采用法國生物梅里埃 VITEK 2 Compact全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)，藥敏卡為GP67卡。藥敏結(jié)果判讀根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）2015 年標(biāo)準(zhǔn)[3]，紙片法（K-B 法）進(jìn)行驗(yàn)證，藥敏紙片購于英國Oxoid公司。

1.4 MRSA的判斷方法

（1）K-B 法：30μg 頭孢西?。‵OX）紙片的抑菌圈直徑≤21mm。

（2）VITEK 2 儀器法：當(dāng)苯唑西林 MIC＞4μg/ml，頭孢西丁篩選試驗(yàn)陽性，儀器自動(dòng)判讀為MRSA。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)整理使用Microsoft Excel表格，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；所有分析使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 金黃色葡萄球菌檢出情況

在分離出的金黃色葡萄球菌226株中，檢出MRSA92株（40.71%），檢出 MSSA134株（59.29%），重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）中MRSA檢出率與非ICU科室相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見表 1。

表1 MRSA檢出情況

2.2 腸毒素檢出情況

226株金黃色葡萄球菌中，其中184株檢出腸毒素，陽性率為 81.42% （184/226），其中 MRSA中有85株檢出腸毒素，陽性率為 92.39%（85/92），MSSA中有99株檢出腸毒素，陽性率為73.88%（99/134）；僅檢測(cè)出1種腸毒素菌株有91株，占49.46%（91/184），檢測(cè)出 2種腸毒素菌株有 74株，占40.21%（74/184），檢測(cè)出3種腸毒素菌株有19株，占 10.33%（19/184）；未檢出 SEE。 見表 2。

表2 金黃色葡萄球菌攜帶腸毒素基因檢出率

2.3 金黃色葡萄球菌抗菌藥物耐藥情況

金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、克林霉素及紅霉素等抗菌藥物整體耐藥率超過了50%；對(duì)萬古霉素、利奈唑胺、替加環(huán)素的敏感率為100%。其中MRSA對(duì)四環(huán)素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、克林霉素及紅霉素等抗菌藥物整體耐藥率超過了70%。見表3。

表3 金黃色葡萄球菌藥敏結(jié)果（n，%）

3 討論

金黃色葡萄球菌特別是MRSA的營養(yǎng)要求低，對(duì)醫(yī)院環(huán)境特別是ICU有較好的耐受能力和定植能力，可經(jīng)過醫(yī)護(hù)手作為傳播媒介造成院內(nèi)感染的暴發(fā)流行，所以，MRSA已成為醫(yī)療界關(guān)注的焦點(diǎn)問題之一[4]。不同國家及地區(qū)之間MRSA檢出率差異顯著，同一醫(yī)院不同科室之間MRSA的檢出率也存在差異[5]。本研究發(fā)現(xiàn)ICU中MRSA檢出率大于其他科室，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

金黃色葡萄球菌在一定條件下可以分泌一種小分子蛋白質(zhì)，為腸毒素，其分子結(jié)構(gòu)和毒性作用相似，迄今為止已發(fā)現(xiàn)的腸毒素有22種不同類型，其分泌的腸毒素可以造成食物中毒。在本研究中，檢出率最高的為腸毒素A，說明SEA型金黃色葡萄球菌是引起感染的主要菌種，本研究結(jié)果還顯示MRSA腸毒素檢出率高于MSSA，這與陳萬進(jìn)等的研究結(jié)論一致[6]。

本研究發(fā)現(xiàn)MRSA對(duì)于常用抗菌藥物均有高的耐藥性，對(duì)苯唑西林和青霉素的耐藥率達(dá)到了100%，這與相關(guān)研究結(jié)果一致[7-8]。金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶使青霉素的活性受到抑制，所以SAU對(duì)青霉素不敏感。糖膚類抗菌藥物萬古霉素是治療MRSA感染的最后一線藥物，它通過干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成來起到抗菌作用。由于萬古霉素在肺部的藥物濃度不高，所以在治療MRSA感染肺炎中的效果不好，萬古霉素聯(lián)合其他抗菌藥物如利福平成為治療肺部嚴(yán)重感染時(shí)的一種策略[9]。利奈唑胺屬于唑烷酮類抗菌藥物，不易與其他抗菌藥物發(fā)生交叉耐藥，治療效果顯著。利奈唑胺與萬古霉素的抗菌作用及安全性相似甚至更優(yōu)，有研究者報(bào)道利奈唑胺與達(dá)托霉素聯(lián)合應(yīng)用可有效治療MRSA感染，但在臨床用藥時(shí)需要注意消化道以及血液系統(tǒng)的毒性等不良反應(yīng)[10]。

綜上所述，在診治金黃色葡萄球菌特別是MRSA感染患者，必須謹(jǐn)慎考慮治療方法的選擇，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理的選擇抗菌藥物，避免抗菌藥物濫用，從而有效防止耐藥菌株的發(fā)生。