張一嬌，秦 杰，李燕燕，趙海君（.邯鄲市中心醫(yī)院生殖科，河北 邯鄲 056000； .邯鄲市中心醫(yī)院婦三科，河北 邯鄲 056000）

女性的生育能力與年齡息息相關(guān)，年齡≥35 歲的女性生育能力明顯降低，臨床特征表現(xiàn)為卵巢儲(chǔ)備功能、妊娠率降低，流產(chǎn)發(fā)生率明顯升高，且圍產(chǎn)期母嬰不良事件發(fā)生率升高［1］。 近年來(lái)，隨著我國(guó)社會(huì)的發(fā)展，“二孩政策”全面開放，高齡生育女性的數(shù)量明顯增長(zhǎng)，對(duì)臨床提出了巨大的挑戰(zhàn)。 高齡女性的卵巢儲(chǔ)備功能較差，卵巢對(duì)促性腺激素類藥物的反應(yīng)性較低，且卵母細(xì)胞質(zhì)量差，這是影響生殖技術(shù)成功率的關(guān)鍵［2］。 臨床中不僅要根據(jù)高齡患者的卵巢功能制訂針對(duì)性的促排卵治療方案，還需要使用有效的助孕藥。 輔酶Q10 屬于線粒體營(yíng)養(yǎng)劑，目前被廣泛應(yīng)用于心力衰竭、帕金森病及黃斑變性等疾病的治療，取得了良好的效果，但在高齡女性體外受精助孕方面的應(yīng)用較少。 因此，本研究探討了輔酶Q10 聯(lián)合金鳳丸對(duì)高齡患者體外受精助孕的作用，取得了一定的成果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 資料來(lái)源

選取2015 年5 月至2018 年8 月邯鄲市中心醫(yī)院收治的高齡體外受精患者186 例進(jìn)行回顧性研究。 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡≥35 歲；（2）夫婦雙方基礎(chǔ)檢查均無(wú)異常，且滿足以下任意一項(xiàng)，①卵泡刺激素（FSH）≥10 U／L，②竇卵泡計(jì)數(shù)（AFC）≤5 個(gè)，③抗苗勒管激素（AMH）≤1.5 ng／ml，④FSH／黃體生成素（LH）＞3；（3）對(duì)研究情況知情，簽署知情同意書，且本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。 排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）生殖道畸形者；（2）染色體異常者；（3）子宮內(nèi)膜損傷、子宮腺肌癥者；（4）卵巢器質(zhì)性疾病以及良性腫瘤者；（5）內(nèi)分泌疾病者；（6）不同意參與研究者。 根據(jù)治療方法不同分為Ⅰ組、Ⅱ組，每組93 例。 兩組患者的基線資料相似，具有可比性，見表1。

1.2 方法

Ⅰ組患者給予維生素E 軟膠囊（規(guī)格：50 mg），體外受精前服用300 mg，持續(xù)治療3 個(gè)月。 Ⅱ組患者體外受精前給予輔酶Q10 膠囊（規(guī)格：5 mg）30 mg／d，1 日2 次；金鳳丸（規(guī)格：每10 丸重1.8 g），1 次1.8 g，1 日2 次，持續(xù)治療3 個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）卵巢儲(chǔ)備指標(biāo)：月經(jīng)來(lái)潮2～5 d 通過(guò)經(jīng)陰道超聲對(duì)子宮及附件情況進(jìn)行檢查，測(cè)量直徑2～10 mm 的AFC。 月經(jīng)來(lái)潮2～5 d 檢測(cè)性激素水平，通過(guò)化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)血清FSH、LH 及雌二醇（E2）水平［3］。 （2）卵巢反應(yīng)性指標(biāo)：包括促性腺激素（Gn）總量、Gn 時(shí)間、人絨毛膜促性腺素（HCG）日子宮內(nèi)膜厚度、促排卵期E2峰值［4］。 （3）體外受精結(jié)局：評(píng)價(jià)指標(biāo)包括獲卵數(shù)、優(yōu)胚數(shù)以及臨床妊娠率［5］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)；P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 兩組患者基線資料比較（±s）Tab 1 Comparison of basic data between two groups （±s）

表1 兩組患者基線資料比較（±s）Tab 1 Comparison of basic data between two groups （±s）

組別 年齡／歲 體重指數(shù)／（kg／m2）不孕時(shí)間／年AMH／（ng／ml）LH／（U／L）Ⅰ組（n＝93） 41.16±3.26 22.28±2.38 4.15±2.59 0.68±0.27 4.86±1.81Ⅱ組（n＝93） 41.35±3.42 21.97±2.16 4.33±2.46 0.73±0.31 5.03±1.93 t 0.388 0.930 0.486 1.173 0.620 P 0.349 0.177 0.314 0.121 0.268

2.1 兩組患者卵巢儲(chǔ)備指標(biāo)水平比較

治療后，Ⅱ組患者AFC、LH 水平明顯高于Ⅰ組，F(xiàn)SH、E2水平明顯低于Ⅰ組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

2.2 兩組患者卵巢反應(yīng)性指標(biāo)水平比較

治療后，Ⅱ組患者Gn 總量明顯低于Ⅰ組，Gn 時(shí)間明顯短于Ⅰ組，HCG 日子宮內(nèi)膜厚度、E2峰值明顯高于Ⅰ組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表2 兩組患者卵巢儲(chǔ)備指標(biāo)水平比較（±s）Tab 2 Comparison of indicators of ovarian reserve between two groups （±s）

表2 兩組患者卵巢儲(chǔ)備指標(biāo)水平比較（±s）Tab 2 Comparison of indicators of ovarian reserve between two groups （±s）

組別LH／（mIU／ml）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后AFC／個(gè)FSH／（U／L）E2／（pmol／L）Ⅰ組（n＝93） 3.86±1.28 4.41±1.48 12.84±2.36 12.54±2.55 358.59±80.52 359.28±90.43 4.86±1.81 0.93±0.49Ⅱ組（n＝93） 3.94±1.44 6.61±1.75 12.93±2.20 8.46±2.28 365.13±77.51 262.97±86.29 5.03±1.93 4.72±2.08 t 0.400 9.257 0.269 11.503 0.564 7.431 0.620 17.104 P 0.345 0.000 0.394 0.000 0.287 0.000 0.268 0.000

表3 兩組患者卵巢反應(yīng)性指標(biāo)水平比較（±s）Tab 3 comparison of indicators of ovarian response between two groups （±s）

表3 兩組患者卵巢反應(yīng)性指標(biāo)水平比較（±s）Tab 3 comparison of indicators of ovarian response between two groups （±s）

組別 Gn 總量／U Gn 時(shí)間／d HCG 日子宮內(nèi)膜厚度／cm E2 峰值／（pmol／L）Ⅰ組（n＝93） 1 894.29±764.44 9.59±1.64 0.77±0.32 6 131.26±1 256.58Ⅱ組（n＝93） 1 506.51±653.26 8.26±2.06 1.03±0.29 8 310.56±1 569.64 t 3.719 4.871 5.806 10.453 P 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 兩組患者體外受精結(jié)局比較

Ⅱ組患者獲卵數(shù)高于Ⅰ組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組患者優(yōu)胚數(shù)、臨床妊娠率的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表4。

3 討論

卵母細(xì)胞的整個(gè)發(fā)育過(guò)程極為復(fù)雜，主要是通過(guò)線粒體提供足量的腺苷三磷酸（ATP），實(shí)現(xiàn)減數(shù)分裂的過(guò)程。 一旦機(jī)體線粒體功能受到損傷，會(huì)直接導(dǎo)致ATP 水平降低，影響卵母細(xì)胞的正常發(fā)育，導(dǎo)致卵母細(xì)胞發(fā)育障礙，從而使受精率降低。隨著女性年齡的不斷增長(zhǎng)，線粒體DNA 突變的概率逐漸增加，而修復(fù)酶類體系的活性逐漸降低，導(dǎo)致線粒體DNA 在復(fù)制過(guò)程中出錯(cuò)的概率增加［6］。 同時(shí)，高齡女性還可能出現(xiàn)一類4977 堿基對(duì)的錯(cuò)誤刪除，且比例較高，約為線粒體DNA 的30%，這也是導(dǎo)致高齡女性受精率、妊娠率較低的因素之一。線粒體對(duì)外界損傷較為敏感，尤其是氧化應(yīng)激損傷，當(dāng)線粒體受到活性氧（ROS）的侵犯時(shí)，會(huì)進(jìn)行防御，但這種防御措施會(huì)導(dǎo)致ROS 進(jìn)一步增加，惡性循環(huán)下，能量形成過(guò)程中的減數(shù)分裂、受精和囊胚形成等均會(huì)受到影響，直接使胚胎及卵母細(xì)胞質(zhì)量降低，導(dǎo)致妊娠率、受精率降低［7］。 通過(guò)外源性抗氧化劑能在一定程度上改善線粒體的功能，保證體外受精結(jié)局。

表4 兩組患者體外受精結(jié)局比較Tab 4 Comparison of in vitro fertilization outcomes between two groups

輔酶Q10 主要存在于線粒體內(nèi)膜，在機(jī)體中負(fù)責(zé)提供或移去氧，與線粒體復(fù)合物Ⅲ穩(wěn)定性有關(guān)。 在生物氧化過(guò)程中，輔酶Q10 主要作用于線粒體呼吸鏈，具有將電子逐步轉(zhuǎn)化為復(fù)合物Ⅲ的效果。 同時(shí)，通過(guò)對(duì)質(zhì)子的傳遞，能保證線粒體膜電位的穩(wěn)定，促進(jìn)ATP 的合成。 另一方面，輔酶Q10 還具有良好的抗氧化作用，大量臨床研究結(jié)果顯示，該物質(zhì)有利于抑制脂質(zhì)與蛋白質(zhì)的過(guò)氧化，清除自由基。 若機(jī)體內(nèi)輔酶Q10 的含量不足，會(huì)使上述作用過(guò)程受到影響，導(dǎo)致體內(nèi)自由基過(guò)量，加劇氧化應(yīng)激損傷，對(duì)于機(jī)體中能量需求較大的組織器官損傷更加明顯，例如骨骼肌、內(nèi)分泌腺體和神經(jīng)組織等［8］。

有研究結(jié)果顯示，卵泡期雌激素水平過(guò)低與腎陽(yáng)虛有關(guān)，通過(guò)補(bǔ)腎類中藥能有效提高機(jī)體雌激素的水平，增加子宮內(nèi)膜雌激素受體［9］。 金鳳丸中含有淫羊藿、仙茅、益母草、阿膠、何首烏、肉桂、女貞子、鹿茸及人參，其中淫羊藿、鹿茸為君藥，具有補(bǔ)命門、益精氣、強(qiáng)筋骨和補(bǔ)腎壯陽(yáng)的效果；何首烏、女貞子補(bǔ)益精血；阿膠滋陰補(bǔ)血安胎；人參補(bǔ)肺益脾、生津安神；益母草是治療婦科病的主要藥物，具有利尿消腫、收縮子宮的功能；肉桂補(bǔ)中益氣；仙茅溫腎壯陽(yáng)；加以蜂蜜調(diào)和諸藥，能起到溫腎益陽(yáng)、調(diào)經(jīng)助孕的效果。

本研究結(jié)果顯示，治療后，Ⅱ組患者AFC、LH 水平明顯高于Ⅰ組，F(xiàn)SH、E2水平明顯低于Ⅰ組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Ⅱ組患者Gn 總量明顯低于Ⅰ組，Gn 時(shí)間明顯短于Ⅰ組，HCG 日子宮內(nèi)膜厚度、E2峰值明顯高于Ⅰ組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 Ⅱ組患者獲卵數(shù)高于Ⅰ組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組患者優(yōu)胚數(shù)、臨床妊娠率的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 由此可以看出，單獨(dú)應(yīng)用維生素E 治療的效果不明顯，對(duì)FSH、AFC 均無(wú)明顯改善。 AFC 是指早卵泡期陰道超聲下測(cè)量的直徑為2 ～10 mm 的竇卵泡數(shù)目，是臨床判斷卵巢儲(chǔ)備能力的重要指標(biāo)之一［10］。 FSH 水平也是臨床判斷卵巢功能的指標(biāo)，但該指標(biāo)容易受到多種因素的影響，且具有延時(shí)性的特點(diǎn)，存在一定的局限性。 維生素E 單獨(dú)使用時(shí)，能一定程度上加強(qiáng)高齡患者的卵巢抗氧化保護(hù)功能，改善卵巢儲(chǔ)備，輔酶Q10 聯(lián)合金鳳丸治療則對(duì)卵巢的保護(hù)功能更加明顯。 機(jī)體中抗氧化物質(zhì)在清除自由基時(shí)，不只是單獨(dú)作用，而是在聯(lián)合作用或協(xié)同作用下提高抗氧化效能。 輔酶Q10 可以利用轉(zhuǎn)換氧化還原性結(jié)構(gòu)，起到良好的抗氧化作用［11］。

目前，大量臨床研究開始探討輔酶Q10 與卵巢功能之間的關(guān)聯(lián)。 通過(guò)高效液相-質(zhì)譜法檢測(cè)卵泡液中輔酶Q10 含量發(fā)現(xiàn)，成熟卵細(xì)胞卵泡液中的輔酶Q10 含量明顯多于異常卵母細(xì)胞，Ⅰ—Ⅱ級(jí)胚胎原始卵泡液中輔酶Q10 的含量也要多于Ⅲ—Ⅳ級(jí)胚胎，由此可以發(fā)現(xiàn)，卵泡液中輔酶Q10 的含量與卵母細(xì)胞成熟程度、胚胎質(zhì)量息息相關(guān)［12］。 對(duì)順鉑類物質(zhì)誘導(dǎo)引發(fā)SD 大鼠卵巢氧化應(yīng)激損傷模型的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，給予大鼠輔酶Q10 持續(xù)灌胃2 周，陽(yáng)性的卵泡數(shù)量明顯增加，竇卵泡數(shù)增加，閉鎖卵泡數(shù)減少，證明當(dāng)卵巢組織受到氧化應(yīng)激損傷時(shí)，輔酶Q10 能起到良好的保護(hù)作用。 此外，有研究結(jié)果顯示，人體卵巢組織中與輔酶Q10 相關(guān)的重要酶類基因?yàn)镻dss2及Cop6，而隨著年齡的增長(zhǎng)，上述2 種酶類基因的表達(dá)能力會(huì)有所降低，對(duì)于高齡患者因年齡增長(zhǎng)而引發(fā)的卵巢功能降低，可適當(dāng)給予輔酶Q10，能有效提高卵母細(xì)胞的數(shù)量與質(zhì)量，效果明顯［13］。

綜上所述，輔酶Q10 聯(lián)合金鳳丸能有效改善高齡女性患者的卵巢功能，對(duì)體外受精助孕有一定的效果。