賴宇堯 劉志偉 肖雪蓮

RSA 多發(fā)生在同一時(shí)間段,主要是指連續(xù)三次或三次以上出現(xiàn)胎兒丟失者,又稱之為反復(fù)性流產(chǎn)。RSA誘發(fā)因素較多,包括不良嗜好、年齡、心理、內(nèi)分泌、感染、環(huán)境、遺傳等。隨著研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)免疫因素在RSA 患者發(fā)病中具有重要作用［1］。有研究結(jié)果顯示,妊娠成功的關(guān)鍵在于正常母胎免疫耐受,目前常運(yùn)用血清免疫學(xué)檢測(cè),能夠有效了解當(dāng)前機(jī)體免疫失衡情況［2］。目前血清指標(biāo)中,最為常用的兩項(xiàng)為血清VEGF、TGF-β1,其中VEGF 能夠促進(jìn)胚胎著床,參與調(diào)節(jié)早期無(wú)血管期胚胎的發(fā)育進(jìn)展,能夠促進(jìn)內(nèi)膜分化和增生［3］；TGF-β1在正常妊娠中,可起到免疫抑制作用,屬于一種調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、生長(zhǎng)的多肽,可抑制免疫性細(xì)胞增殖［4］。本文研究探討RSA 患者血清VEGF、TGF-β1水平的變化及其臨床意義,具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年2月15 日～2018年2月15 日本院收治的200例RSA 患者作為此次研究對(duì)象,根據(jù)病因不同分為原發(fā)組(原發(fā)性RSA)和繼發(fā)組(繼發(fā)性RSA),各100例。繼發(fā)組平均年齡(28.95±2.43)歲,平均孕周(13.48±1.54)周,平均流產(chǎn)次數(shù)(5.62±1.65)次；原發(fā)組平均年齡(28.52±2.78)歲,平均孕周(13.55±1.23)周,平均流產(chǎn)次數(shù)(5.53±1.22)次。另選同期100例要求終止妊娠的正常健康早孕女性作為對(duì)照組,平均年齡(28.43±2.11)歲,平均孕周(13.47±1.24)周。三組受檢者一般資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。入選標(biāo)準(zhǔn)：①受檢者均自愿加入本次實(shí)驗(yàn),且簽署書(shū)面同意書(shū)；②受檢者經(jīng)B 超檢查,可發(fā)現(xiàn)宮內(nèi)妊娠,且胚胎尚存活；③受檢者年齡＞18歲；④受檢者夫妻雙方均無(wú)嚴(yán)重全身性疾病,染色體正常；⑤女方婦科檢查正常,男方精液檢查正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除自身免疫性疾病或生殖道感染疾病受檢者；②排除內(nèi)分泌異常者；③排除生殖器官解剖異常者；④排除夫妻雙方胚胎染色體異常者；⑤排除合并嚴(yán)重肝腎功能障礙者；⑥排除合并免疫系統(tǒng)疾病者。

1.2 檢查方法 抽取受檢者空腹?fàn)顟B(tài)下的5 ml 外周靜脈血,進(jìn)行血清分離處理,取上清液,維持15 min 離心,5000 r/min 速度,并將其置于低溫冰箱(-20℃)下保存待檢測(cè)。在檢測(cè)血清VEGF、TGF-β1時(shí),還需使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)夾心法檢測(cè),本次使用的ELISA 試劑盒為北京晶美生物工程有限公司生產(chǎn),具體操作需嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo) 比較三組受檢者的血清TGF-β1和VEGF 水平變化情況。比較繼發(fā)組和原發(fā)組不同RSA分期的血清TGF-β1和VEGF 水平變化情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清TGF-β1和VEGF 水平比較 原發(fā)組、繼發(fā)組的TGF-β1水平高于對(duì)照組、VEGF 水平低于對(duì)照組,原發(fā)組TGF-β1水平高于繼發(fā)組、VEGF 水平低于繼發(fā)組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 繼發(fā)組和原發(fā)組不同RSA 分期血清TGF-β1和VEGF水平比較 繼發(fā)組早期TGF-β1低于晚期,VEGF水平高于晚期,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；原發(fā)組早期TGF-β1低于晚期,VEGF 水平高于晚期,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見(jiàn)表2。

表1 三組血清TGF-β1 和VEGF 水平比較 (,ng/L)

表1 三組血清TGF-β1 和VEGF 水平比較 (,ng/L)

注：與對(duì)照組比較,aP＜0.05；與繼發(fā)組比較,bP＜0.05

表2 繼發(fā)組和原發(fā)組不同RSA 分期血清TGF-β1 和VEGF 水平比較(,ng/L)

表2 繼發(fā)組和原發(fā)組不同RSA 分期血清TGF-β1 和VEGF 水平比較(,ng/L)

注：與本組晚期比較,aP＜0.01

3 討論

RSA 誘發(fā)因素較多,包括感染、血型不合、宮頸發(fā)育不良、遺傳、情緒等,是導(dǎo)致不孕癥的主要因素［5］,目前相關(guān)作用機(jī)制尚未明確,但隨著深入研究,學(xué)者發(fā)現(xiàn)在胎盤(pán)形成過(guò)程中,血管生長(zhǎng)因子起到重要作用,且近年來(lái)開(kāi)始成為人們研究、關(guān)注的熱點(diǎn)［6］。通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),正常妊娠的小鼠可產(chǎn)生Treg 細(xì)胞阻止自然流產(chǎn)發(fā)生,而胎盤(pán)血管發(fā)育可通過(guò)受體調(diào)節(jié)和多種生長(zhǎng)因子調(diào)節(jié)完成,為了了解RSA 和血清因子的關(guān)系,本次便進(jìn)行了深入研究。

VEGF 是一種糖基化多肽性分泌因子,屬于缺氧誘導(dǎo)分泌的細(xì)胞因子,對(duì)血管生長(zhǎng)發(fā)揮較強(qiáng)的誘導(dǎo)作用,是由7 個(gè)內(nèi)含子和8 個(gè)外顯子構(gòu)成,編碼VEGF 基因長(zhǎng)約14 kb,全長(zhǎng)28 kb,基因位于染色體6p21.3 中［7］?？梢?yàn)樽兗羟蟹绞讲煌a(chǎn)生不同轉(zhuǎn)錄本和氨基酸數(shù)目,其中VEGF165 和VEGF121 以游離狀態(tài)下存在,屬于可溶性分泌型蛋白,是血管新生作用的主要因子,臨床有研究表明,VEGF 可上調(diào)纖溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)和組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)的表達(dá),促進(jìn)血管形成,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)蛋白水解酶、組織因子、間質(zhì)膠原酶。除此之外,VEGF 還能夠增加血管內(nèi)皮細(xì)胞的倍增次數(shù),延長(zhǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞壽命。另外還有學(xué)者發(fā)現(xiàn),在整個(gè)妊娠階段,VEGF 表達(dá)可存在浸潤(rùn)性絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤(pán)合體滋養(yǎng)細(xì)胞中,隨著妊娠期延長(zhǎng),VEGF 可出現(xiàn)明顯增加現(xiàn)象,在16 周后,可逐漸下降,在本次實(shí)驗(yàn)中,繼發(fā)組、原發(fā)組早期VEGF 高于晚期組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),由此證實(shí)了此項(xiàng)研究報(bào)道,其與胎盤(pán)生殖發(fā)育時(shí)間吻合,進(jìn)而說(shuō)明,VEGF 在胎盤(pán)生長(zhǎng)發(fā)育中起到重要調(diào)節(jié)作用。

TGF-β1具有較強(qiáng)的免疫抑制作用,屬于一種免疫調(diào)節(jié)劑,能夠有效抑制免疫活性細(xì)胞的增殖,調(diào)節(jié)細(xì)胞分化和生長(zhǎng),主要介導(dǎo)B 淋巴細(xì)胞抗體產(chǎn)生和增殖,預(yù)防對(duì)胎兒和滋養(yǎng)細(xì)胞造成繼發(fā)性損傷［8］。在本次研究中,繼發(fā)組早期TGF-β1低于晚期,VEGF 水平高于晚期,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；原發(fā)組早期TGF-β1低于晚期,VEGF 水平高于晚期,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),說(shuō)明當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)胎盤(pán)免疫損傷時(shí),TGF-β1水平可出現(xiàn)明顯上升趨勢(shì),且隨著疾病的惡化,尤其是在進(jìn)入晚期后,TGF-β1濃度值可達(dá)到高峰期,而其濃度與RSA 患者分期呈正相關(guān)性,是目前衡量RSA 患者病情的另一個(gè)重要指標(biāo),能夠在一定程度上反映患者當(dāng)前胎盤(pán)組織受損情況和機(jī)體炎癥反應(yīng)。

綜上所述,血清VEGF、TGF-β1水平是參與RSA患者胎盤(pán)組織炎癥反應(yīng)中的重要炎癥介質(zhì),且早期和晚期患者存在明顯差異,能夠在判定疾病中起到一定的作用,盡早實(shí)施血清VEGF、TGF-β1水平的監(jiān)測(cè),能夠改善不良結(jié)局。