朱強(qiáng) 朱遠(yuǎn)泰 余信 岑旺
摘? ?要:以臺(tái)灣牡丹櫻花當(dāng)年新生枝條為原材料,采集生長(zhǎng)健壯的枝條腋芽(側(cè)芽)建立誘導(dǎo)、增殖、生根、出棚馴化的臺(tái)灣牡丹櫻花快繁體系。結(jié)果表明:采集3月中旬至4月初的當(dāng)年生枝條最為適宜;外植體消毒時(shí)間11 min,污染率最低,誘導(dǎo)率最高;最適的誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+1.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA+30 g糖;繼代培養(yǎng):MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+30 g糖,增殖系數(shù)2.04;生根培養(yǎng):1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+15 g糖+1 g AC,生根率為83.21%;移栽采用基質(zhì):泥炭土∶珍珠巖∶草木灰=5∶3∶2,移栽成活率最高,達(dá)到87%。
關(guān)鍵詞:臺(tái)灣牡丹櫻花;快繁體系;建立;馴化技術(shù)
文章編號(hào): 1005-2690(2020)10-0003-02? ? ? ?中圖分類號(hào): S685.99? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼: B
牡丹櫻花原產(chǎn)我國臺(tái)灣省,又名臺(tái)灣牡丹櫻,花深紅色、重瓣,花量大,盛花時(shí)紅花滿樹、花團(tuán)錦簇,是最具發(fā)展?jié)摿Φ臋鸦ㄐ缕贩N之一。牡丹櫻花屬薔薇科落葉喬木,傘狀樹型,花先葉開放,花下垂,萼筒鐘狀;花瓣深紅色,不完全開展,呈半開狀;花朵授粉后,雌蕊留存,萼筒與花瓣自然脫落,花梗、萼筒均無毛,花期2月初至3月初;幼枝綠色,被短柔毛,不久脫落,老枝紫紅色。
臺(tái)灣牡丹櫻花顏色鮮艷亮麗,是早春重要的觀花樹種,可用于觀賞園林;也可種植于山坡、路邊、建筑物前;還可以群植,造成“花?!本坝^,具有很好的園林觀賞價(jià)值[1-4]。
1? ?材料與方法
1.1? ?材料選取
3月下旬至4月中旬,從沙淤園區(qū)采集生長(zhǎng)健壯、無病蟲害、花型優(yōu)美的當(dāng)年生半木質(zhì)化臺(tái)灣牡丹櫻花枝條為試驗(yàn)外植體。
1.2? ?試驗(yàn)方法
以MS、1/2MS為基本培養(yǎng)基,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值為5.6,瓊脂粉6.5 g/L,蔗糖1.5%~3%,配以植物激素BA、IBA、NAA,以及AC和基質(zhì)土。
1.2.1? ?外植體獲取
采摘前1 d用多菌靈消毒液噴灑枝條,于次日晴天中午采集消毒過的健壯新生枝條,于實(shí)驗(yàn)室待處理。用飽和洗衣粉液配以軟毛刷洗刷干凈枝條,用流水沖洗1 h。后剪切為1~2 cm帶芽小段,放置于超凈工作臺(tái)中備用。
在超凈工作臺(tái)中用75%酒精浸泡1 min,無菌水沖洗3次,每次4 min。用0.1%升汞浸泡,以不同的消毒時(shí)間(8 min、11 min、15 min)處理外植體,用無菌水沖洗4次,每次4 min。
1.2.2? ?誘導(dǎo)培養(yǎng)
以MS為基本培養(yǎng)基,添加不同濃度的BA(0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L)、IBA(0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.15 mg/L),共計(jì)12組,每組重復(fù)3次,每次40瓶,每瓶1個(gè)外植體。
1.2.3? ?繼代培養(yǎng)
以誘導(dǎo)培養(yǎng)的芽體為原材料。以MS為基本培養(yǎng)基,添加不同濃度的BA(0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L)、NAA(0.05 mg/L、0.1 mg/L),共計(jì)6組,每組重復(fù)1次,每次40瓶,每瓶5個(gè)新芽。
1.2.4? ?生根培養(yǎng)
以繼代培養(yǎng)的繼代苗為原材料(2~3片葉、2~3 cm高)。以1/2MS為基本培養(yǎng)基,添加不同濃度的IBA(0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L)、NAA(0.5 mg/L、1.0 mg/L)、AC 1 g,共6組,每組重復(fù)1次,每次40瓶,每瓶5個(gè)繼代苗。
1.2.5? ?室外移栽
選取生長(zhǎng)健壯的生根苗,移出培養(yǎng)室,在室外馴化21 d,開瓶煉苗3 d,在不同配比的基質(zhì)上移栽(泥炭土∶珍珠巖∶蛭石=5∶3∶2、泥炭土∶珍珠巖∶草木灰=5∶3∶2、泥炭土∶蛭石∶草木灰=5∶3∶2),共計(jì)3個(gè)處理,每個(gè)處理2 000株,分別于7 d、30 d統(tǒng)計(jì)存活率。
2? ?結(jié)果與分析
2.1? ?外植體獲取
外植體升汞消毒分3組對(duì)照,分別計(jì)算污染率、存活率、死亡率。消毒8 min,污染率43.15%、存活率48.35%、死亡率8.50%;消毒11 min,污染率30.17%、存活率55.33%、死亡率14.50%;消毒15 min,污染率14.70%、存活率45.11%、死亡率40.19%。綜上結(jié)果,升汞消毒8 min,污染率高,達(dá)不到要求的滅菌效果;升汞消毒15 min時(shí),能有效避免外植體的污染,但外植體的活性明顯降低,死亡率較高,達(dá)40.19%;升汞消毒11 min,其污染率、死亡率適中,存活率達(dá)到55.33%,是最適合的升汞滅菌時(shí)間。
2.2? ?激素誘導(dǎo)培養(yǎng)
牡丹櫻花的誘導(dǎo)培養(yǎng)共設(shè)計(jì)了12組對(duì)照,統(tǒng)計(jì)其誘導(dǎo)率,結(jié)果見表1。由表1可知,第8組培養(yǎng)基的誘導(dǎo)率最高,達(dá)到59.16%;第2、4組培養(yǎng)基的誘導(dǎo)率最低,為22.50%;其余各組差距不大。表明第8組培養(yǎng)基MS+1.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA 為最適培養(yǎng)基。
2.3? ?增殖培養(yǎng)
本次增殖培養(yǎng)是以MS為基本培養(yǎng)基,共計(jì)6組,統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表2。經(jīng)過初選,6組配比中,第1組的增殖系數(shù)最低,為1.31;第5組的增殖系數(shù)最高,為2.04。表明第5組配比MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+30 g糖更適合臺(tái)灣杜鵑櫻花的繼代培養(yǎng)。
2.4? ?生根培養(yǎng)
本次生根培養(yǎng)以1/2MS為基本培養(yǎng)基,不同激素配比,共6組,統(tǒng)計(jì)分析見表3。由表3可見,第4、5組的生根率為83.21%、72.10%,明顯高于其他各組配比,且隨著IBA濃度的增加,生根數(shù)反而減少。因此4組1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+15 g糖+1 g AC為臺(tái)灣牡丹櫻花的適合培養(yǎng)基。
2.5? ?馴化移栽
以生根的小苗經(jīng)過馴化21 d,開瓶煉苗3 d后移栽,在3種不同配比的基質(zhì)上移栽,分別于7 d、30 d統(tǒng)計(jì)存活率,結(jié)果見表4。通過統(tǒng)計(jì)存活率,前7 d,第2組、3組的成活率相差不大,30 d時(shí)第2組明顯高于3組,表明采用基質(zhì)泥炭土∶珍珠巖∶草木灰=5∶3∶2適宜臺(tái)灣牡丹櫻花的移栽。
3? ?結(jié)論
以臺(tái)灣牡丹櫻花當(dāng)年新生枝條為材料,采集3月中旬至4月初生長(zhǎng)健壯的枝條腋芽(側(cè)芽)建立誘導(dǎo)、增殖、生根、出棚馴化的牡丹櫻花快繁體系具有明顯的市場(chǎng)意義。
試驗(yàn)結(jié)果表明:采集3月中旬至4月初的當(dāng)年生枝條,其生長(zhǎng)旺盛,木質(zhì)化程度低,作為外植體最為適宜;外植體的最佳消毒時(shí)間為11 min,既能有效降低污染,又不影響腋芽(側(cè)芽)的活性;在誘導(dǎo)過程中BA的增加,使誘導(dǎo)率有所提升,但超過1.5 mg/L時(shí),誘導(dǎo)能力又有所下降。
在組織培養(yǎng)過程中,小苗的生長(zhǎng)有多種影響因素。本試驗(yàn)著重于BA、IBA、NAA這3種激素對(duì)臺(tái)灣牡丹櫻花組培影響的研究,而對(duì)于其他激素及培養(yǎng)條件的影響未作關(guān)注。今后可以對(duì)加入更多的培養(yǎng)條件及激素深入探討,以求獲得更加適宜臺(tái)灣牡丹櫻花的組培條件。
參考文獻(xiàn):
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