康曉燕

（河南科技大學(xué)附屬許昌市中心醫(yī)院呼吸與危重癥科，河南許昌461000）

支氣管哮喘是常見(jiàn)的慢性氣道炎癥性疾病,多種炎癥細(xì)胞及炎癥介質(zhì)均參與疾病發(fā)生及發(fā)展,其常見(jiàn)特征為多種炎癥基因表達(dá)異?；虮磉_(dá)增加[1]。支氣管哮喘發(fā)病因素較為復(fù)雜，尚未完全闡明，雖然既往關(guān)于支氣管哮喘的影響因素有研究,并表示遺傳、環(huán)境等因素均對(duì)其有一定影響，但免疫及炎癥機(jī)制一直是支氣管哮喘發(fā)病的核心[2,3]。雖然大部分患者經(jīng)長(zhǎng)期規(guī)范化治療癥狀可得到良好控制，但研究表明,近年哮喘發(fā)病率及病死率仍處于較高水平，分析其原因可能為氣道炎癥存在[4]。不少研究證實(shí),樹(shù)突狀細(xì)胞及淋巴細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞在哮喘的發(fā)生及發(fā)展中發(fā)揮一定作用[5]。趨化因子配體 19(C-C chemokine ligand 19，CCL19)、趨化因子配體 21(C-C chemokine ligand 21，CCL21)均屬于CC 類趨化因子家族成員，是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性的趨化因子，其在多種炎癥組織中具有高表達(dá)，在維持免疫穩(wěn)態(tài)中具有重要作用[6,7]。近年關(guān)于CCL19、CCL 21 與血管生成、自身免疫疾病的發(fā)生、腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究較多,但其與氣道炎癥性疾病的相關(guān)性研究較少,尤其與支氣管哮喘患者病情的相關(guān)性研究更少?；诖?，本研究旨在探討血清趨化因子CCL19、CCL21 與支氣管哮喘患者病情的相關(guān)性，以指導(dǎo)臨床。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2018 年 1 月-2019 年 12 月本院收治的84 例支氣管哮喘患者為研究對(duì)象，本次研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。其中男44例,女 40 例；年齡 40~74 歲，平均年齡 52.36±3.16歲;體質(zhì)量指數(shù)(Body Mass Index，BMI)16.0~24.6kg/m2,平均 22.15±1.46kg/m2;病程 1~6 年,平均 2.16±1.01 年；其中合并高血壓26 例、糖尿病17 例、血脂異常14 例、冠心病9 例；文化程度：初中及以下28 例、高中及中專32 例、大專及以上 24 例；所有患者均有不同程度反復(fù)發(fā)作的喘息、氣促、胸悶及咳嗽等癥狀。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴所有患者均符合 《中國(guó)支氣管哮喘防治指南 （基層版）》[8]中支氣管哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)臨床表現(xiàn)、肺功能檢查等確診；⑵患者及家屬對(duì)本次研究知情并簽署知情同意書(shū)；⑶依從性較好，可配合完成研究的患者；⑷入院前未使用過(guò)免疫抑制劑或激素類藥物等干預(yù)；⑸無(wú)過(guò)敏性疾病的患者。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴合并心、肝、腎等重要臟器病變者；⑵合并慢性阻塞性肺疾病、支氣管擴(kuò)張等慢性肺部疾病的患者；⑶合并免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)或風(fēng)濕免疫系統(tǒng)疾病的患者；⑷伴有精神疾病或認(rèn)知功能障礙的患者；⑸合并惡性腫瘤。

1.3 方法

1.3.1 分組方法 參照《支氣管哮喘防治指南(支氣管哮喘的定義、診斷、治療和管理方案)》[9]評(píng)估84例支氣管哮喘患者病情嚴(yán)重程度，其中輕度持續(xù)：第一秒用力呼氣容積（Forced Expiratory Volume in the first second，F(xiàn)EV1）占預(yù)期值的百分比≥80%，1次/周≤胸悶、咳嗽等癥狀出現(xiàn)＜1 次/d，2 次/月＜夜間咳嗽癥狀＜1 次/周，將其設(shè)為輕度組；中度持續(xù)：60%≤FEV1 占預(yù)期值的百分比≤79%，胸悶、咳嗽等癥狀每日均存在,對(duì)患者活動(dòng)及睡眠造成一定影響，夜間咳嗽癥狀≥1 次/周，將其設(shè)為中度組；重度持續(xù)：FEV1 占預(yù)期值的百分比＜60%, 患者每日頻繁出現(xiàn)咳嗽、胸悶等臨床癥狀，經(jīng)常出現(xiàn)夜間哮喘癥狀，體力活動(dòng)受限，將其設(shè)為重度組。

1.3.2 血清趨化因子CCL19、CCL21 檢測(cè)法 采集所有患者入院時(shí)清晨空腹肘靜脈血4~5ml，3000r/min 離心10min，分離血清后,將其置于-20℃環(huán)境中冷凍備用。采用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) 檢測(cè)所有患者血清CCL19、CCL21 水平；血清 CCL 19、CCL21 檢測(cè)試劑盒均由美國(guó)R&D 公司提供；血清水平檢測(cè)操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，全部劑量資料均經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布采用“”表示，3 組間比較采用單因素方差分析檢驗(yàn)，組間兩兩比較采用SNK-q 檢驗(yàn)；血清趨化因子CCL19、CCL21 與支氣管哮喘患者病情的相關(guān)性采用一般線性雙變量Pearson 直線相關(guān)性檢驗(yàn)；支氣管哮喘患者病情程度 （FEV1%） 對(duì)血清趨化因子CCL19、CCL21 的影響采用一般線性回歸分析檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 支氣管哮喘患者根據(jù)病情嚴(yán)重程度的分組情況 經(jīng)《支氣管哮喘防治指南(支氣管哮喘的定義、診斷、治療和管理方案)》評(píng)估結(jié)果顯示，84 例支氣管哮喘患者中，有42 例病情輕度持續(xù)患者，占比50.00%（42/84），F(xiàn)EV1 占預(yù)期值的百分比為 87.69±3.07%；有29 例病情中度持續(xù)患者，占比34.52%（29/84），F(xiàn)EV1 占預(yù)期值的百分比為 70.11±2.86%;有13 例病情重度持續(xù)患者，占比15.48%（13/84），F(xiàn)EV1 占預(yù)期值的百分比為50.16±2.47%。

2.2 支氣管哮喘不同病情程度患者血清趨化因子CCL19、CCL21 水平比較 重度組、中度組患者趨化因子CCL19、CCL21 水平高于輕度組，且重度組患者趨化因子CCL19、CCL21 水平高于中度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 不同病情程度患者血清趨化因子CCL19、CCL21 水平比較（，ng/L）

表1 不同病情程度患者血清趨化因子CCL19、CCL21 水平比較（，ng/L）

注：與輕度組同指標(biāo)比較，aP＜0.05；與中度組同指標(biāo)比較，bP＜0.05

組別 例數(shù)輕度組中度組重度組42 29 13 F P--CCL19 CCL21 57.11±18.56 70.65±20.14a 81.02±21.64ab 8.929 P＜0.001 110.32±21.36 135.45±25.64a 157.89±24.39ab 23.911 P＜0.001

2.3 支氣管哮喘病情嚴(yán)重程度（FEV1%）與血清趨化因子 CCL19、CCL21 水平相關(guān)性 經(jīng)雙變量Pearson 直線相關(guān)性檢驗(yàn)結(jié)果顯示, 血清趨化因子CCL19、CCL21 水平與支氣管哮喘患者病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（r＞0，P＜0.05），即隨著支氣管哮喘患者病情越重，其血清趨化因子CCL19、CCL21 水平越高。見(jiàn)表2。

表2 支氣管哮喘病情嚴(yán)重程度與血清趨化因子CCL19、CCL21 水平相關(guān)性

2.4 血清趨化因子CCL19、CCL21 水平對(duì)支氣管哮喘患者病情的影響的線性回歸結(jié)果 將支氣管哮喘患者病情嚴(yán)重程度作為因變量,將血清趨化因子CCL19、CCL21 水平作為自變量, 做線性回歸檢驗(yàn)得到線性回歸方程結(jié)果顯示, 血清趨化因子CCL1 9、CCL21 水平是氣管哮喘患者病情嚴(yán)重程度（FEV1%）的影響因素（P＜0.05）,得到線性回歸方程如下：Y=51.236＋12.269XCCL19+25.205XCCL21。見(jiàn)表3。

3 討論

支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜,目前認(rèn)為氣道炎癥在疾病發(fā)生及發(fā)展中起到重要作用[10]。臨床用于檢測(cè)支氣管哮喘氣道炎癥的方式較多,包括侵入性操作及非侵入性操作,其中前者被認(rèn)為是評(píng)估氣道炎癥金標(biāo)準(zhǔn)，主要包括支氣管鏡內(nèi)膜活檢、誘導(dǎo)痰等，其可準(zhǔn)確反應(yīng)氣道炎癥情況，但該種方式對(duì)操作人員的技術(shù)要求較高，患者依從性差，臨床應(yīng)用受限[11]。呼出氣一氧化碳是反映氣道炎癥反應(yīng)較為準(zhǔn)確的非侵入性操作檢查方式,但該種檢查方式價(jià)格昂貴，且準(zhǔn)確性易受患者呼吸頻率、屏氣次數(shù)等因素影響，應(yīng)用仍存在一定局限[12,13]。因此，探尋可客觀、準(zhǔn)確、實(shí)時(shí)反映支氣管哮喘患者氣道炎癥指標(biāo)十分重要，可進(jìn)一步指導(dǎo)臨床對(duì)哮喘的評(píng)估、診斷、治療及管理等。

表3 支氣管哮喘病情對(duì)血清趨化因子CCL19、CCL21 水平影響的線性回歸結(jié)果

血清中炎癥相關(guān)因子在哮喘病早期診斷、預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、療效評(píng)估中受到重視[14]。趨化因子也稱為趨化素或趨化激素，是一種小分子分泌蛋白，由70-100 個(gè)氨基酸組成, 主要包括CC、CXC、CX3 C、C4 個(gè)家族，其受到炎癥因子的影響，對(duì)各種免疫細(xì)胞具存在一定趨化作用[15]。血清趨化因子CC L19、CCL21 均屬于CC 類趨化因子家族成員，均是CC 趨化因子受體 7 （CC chemokine receptor 7，CCR7）的配體，由活化的T 淋巴細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，主要通過(guò)對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞的歸巢進(jìn)行趨化，進(jìn)而轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒旒?xì)胞，參與激活T 細(xì)胞，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，促進(jìn)炎癥反應(yīng)等作用[16,17]。CCL19、CCL21 也是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性趨化因子，在氣管內(nèi)呈現(xiàn)高表達(dá)，具有調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞的遷移功能,與多種呼吸系統(tǒng)疾病發(fā)生及發(fā)展具有密切關(guān)系，其中CCL21 與CCR7結(jié)合可促進(jìn)細(xì)胞向趨化因子源處進(jìn)行遷移[18,19]。研究報(bào)道，與CCL19 比，CCL21 對(duì)T 淋巴細(xì)胞及樹(shù)突狀細(xì)胞具有更強(qiáng)的趨化性；此外，CCL19 與氣道平滑肌細(xì)胞CCR7 相結(jié)合，可在一定程度上參與哮喘氣道平滑肌的增殖，CCL21 并無(wú)該作用，故二者雖然均屬于CC 類趨化因子家族成員，但仍存在一定區(qū)別。李毅等[20]研究發(fā)現(xiàn)，CCL19、CCL21 可能參與肺間質(zhì)病變的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程。因此，本研究推測(cè)趨化因子CCL19、CCL21 在支氣管哮喘患者病情發(fā)展中發(fā)揮重要作用。但目前關(guān)于其研究較少，且機(jī)制尚未明確。

FEV1 是評(píng)估肺功能重要指標(biāo)之一，其不僅是一種容量測(cè)定，也是一秒內(nèi)的流量測(cè)定，因支氣管哮喘患者起到阻塞，使得呼吸時(shí)間延長(zhǎng)，故FEV1占預(yù)期值有所降低,其對(duì)判定支氣管哮喘病情嚴(yán)重程度具有重要價(jià)值。故本研究通過(guò)FEV1 評(píng)估支氣管哮喘患者病情,并分析支氣管哮喘患者血清趨化因子CCL19、CCL21 與病情的相關(guān)性，研究結(jié)果顯示,重度組、中度組患者趨化因子CCL19、CCL21 水平高于輕度組,且重度組患者趨化因子CCL19、CC L21 水平高于中度組,結(jié)果提示,血清趨化因子CCL 19、CCL21 水平越高,支氣管哮喘患者病情越嚴(yán)重，這也初步證實(shí)血清趨化因子CCL19、CCL21 與支氣管哮喘患者病情的關(guān)系;進(jìn)一步做一般線性雙變量Pearson 直線相關(guān)檢驗(yàn)結(jié)果顯示，血清趨化因子CCL19、CCL21 水平與支氣管哮喘患者病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān), 進(jìn)一步證實(shí)隨著血清趨化因子CCL 19、CCL21 水平越高,支氣管哮喘患者病情越重；最后做線性回歸檢驗(yàn)得到線性回歸方程結(jié)果顯示，血清趨化因子CCL19、CCL21 水平是氣管哮喘患者病情嚴(yán)重程度（FEV1%）的影響因素，故推測(cè)臨床可將CCL19、CCL21 作為評(píng)價(jià)支氣管哮喘患者氣道炎癥的重要指標(biāo),對(duì)評(píng)價(jià)病情嚴(yán)重程度具有一定應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，血清趨化因子CCL19、CCL21 與支氣管哮喘患者病情存在一定相關(guān)性,臨床可通過(guò)早期持續(xù)監(jiān)測(cè)患者血清CCL19、CCL21 水平，并采取相應(yīng)防范措施，對(duì)延緩疾病進(jìn)展起到重要作用。