武治云，曹 莉，高軍攀，王 鵬

（1.石家莊市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，河北石家莊 050000；2.石家莊市動物疫病預(yù)防控制中心，河北石家莊 050000；3.石家莊市獸用生物制品供應(yīng)站，河北石家莊 050000；4.石家莊市畜牧獸醫(yī)技術(shù)開發(fā)中心，河北石家莊 050000）

紫花苜蓿是國內(nèi)外廣泛種植的優(yōu)質(zhì)豆科牧草，產(chǎn)量高、適應(yīng)性強(qiáng)、營養(yǎng)價值較高，是畜禽飼糧中常用的優(yōu)質(zhì)牧草之一，其蛋白質(zhì)含量較高，同時富含多種營養(yǎng)物質(zhì)及多種生物活性物質(zhì)，被譽(yù)為“牧草之王”（李剛，2019；劉旭蕾，2019）。相關(guān)研究表明，苜蓿可以顯著提高育肥肉羊飼料消化率和生長性能（張鵬飛，2019）。苜蓿干草經(jīng)自然晾曬或人工干燥調(diào)制而成的優(yōu)質(zhì)飼草，其質(zhì)量與品種、氣候條件、生育期/刈割時期及調(diào)制技術(shù)重要因素有關(guān)，與苜蓿鮮草相比，苜蓿干草營養(yǎng)成分變異范圍大，蛋白質(zhì)含量下降、水分降低、粗纖維含量提高，營養(yǎng)價值降低（趙佩榮，2019；熊乙，2018）。相關(guān)研究表明，微生物發(fā)酵技術(shù)可有效降解干草中的纖維素含量，提高其蛋白質(zhì)含量（王永偉，2019）。本試驗為提高苜蓿干草的利用率，采用復(fù)合益生菌制劑進(jìn)行厭氧發(fā)酵，以不同水平添加到肉羊基礎(chǔ)日糧中，對其生長性能、養(yǎng)分表觀消化率及血液生化指標(biāo)進(jìn)行檢測，為進(jìn)一步微生物發(fā)酵苜蓿干草臨床應(yīng)用提供參考依據(jù)。

<1)，且各件產(chǎn)品是否為不合格品相互獨(dú)立．

1 材料與方法

1.1 主要材料 復(fù)合益生菌制劑主要有乳酸菌、枯草芽孢桿菌、雙歧桿菌、糞尿球菌，購自中國食品藥品檢測所；免疫球蛋白IgG、IgM、IgA ELISA Kit 試劑盒，購自北京中控生物科技有限公司。

1.2 微生物發(fā)酵苜蓿干草制備 將苜蓿干草鍘段其長度為2～3 cm，將復(fù)合益生菌制劑復(fù)蘇擴(kuò)大培養(yǎng)，其總菌量≥1×1010cfu/mL，水與苜蓿干草的比例為1:1，添加復(fù)合益生菌液攪拌均勻加入發(fā)酵罐，在20～25 ℃條件下厭氧發(fā)酵21 d 后可使用。

1.3 基礎(chǔ)日糧配比 基礎(chǔ)日糧參照 NRC（2012）推薦肉羊的營養(yǎng)水平進(jìn)行配制（表1），精料制成1.2～1.5 cm 顆粒飼料，按照先精后粗的方式進(jìn)行混合飼喂。

表1 日糧組成與營養(yǎng)水平

1.4 試驗設(shè)計 試驗于2019 年5～7 月在石家莊市藳城區(qū)肉牛養(yǎng)殖基地進(jìn)行，采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計試驗，選擇健康、體重相近肉羊30 只隨機(jī)分成3組，每組 10 個重復(fù)，每個重復(fù) 1 只，1組為對照組飼喂苜蓿干草，試驗2 組飼喂50%苜蓿干草+50%微生物發(fā)酵苜蓿干草，試驗3 組飼喂微生物發(fā)酵苜蓿干草，預(yù)試驗7 d，試驗期56 d。每個重復(fù)單獨(dú)飼養(yǎng)給料，定時定量飼喂，自由采食與飲水。定期免疫、驅(qū)蟲及環(huán)境消毒。

1.5 指標(biāo)測定及方法

1.5.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)的測定 在試驗期間，對試驗肉羊斷料12 h 逐個稱重，記錄試驗開始的體重和試驗?zāi)┲丶霸谠囼炂陂g耗料量，測定生長性能指標(biāo)平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.5.2 養(yǎng)分表觀消化率的測定 參考俞文靚等（2019）報道的方法，試驗結(jié)束前3 d，每個重復(fù)組收集50 g 糞便，將重復(fù)組的糞便均勻混合，加入10%硫酸10 mL 固氮，烘干過篩，參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》測定糞便中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷等營養(yǎng)物質(zhì)消化率，計算各營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率。

1.5.3 免疫指標(biāo)的測定 在試驗結(jié)束 （56 d），斷料12 h，每個試驗組隨機(jī)抽取10 只試驗肉羊，用一次性的采血針頸靜脈采集血液5 mL，6000 r/min離心分離血清。按照試劑盒說明書測定各個試驗組肉羊血清中免疫球蛋白 IgG、IgM 及IgA 的含量。

1.6 數(shù)據(jù)分析 試驗結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用統(tǒng)計學(xué)軟件SAS 19.0 進(jìn)行單因素方差分析，用P ＜0.05 表示差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊生長性能的影響 由表2 可知，試驗3 組的平均日增重與1組相比顯著提高 13%（P ＜ 0.05），試驗 2 組與 1組之間及試驗3 組和2 組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05），試驗 2、3 組的平均采食量均高于 1組，但差異性不顯著（P＞0.05）；試驗 2、3 組的料重比均低于1組，3 組的料重比與1組相比顯著降低11.3%（P ＜ 0.05），試驗 2 組與 1組之間及試驗3組和 2組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）。

表2 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊生長性能測定結(jié)果

2.2 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表3 可知，試驗2、3 組干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、鈣、磷表觀消化率均高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05）；試驗 2、3 組的中性洗滌纖維表觀消化率均高于1組，試驗3 組與1組相比顯著提高 12.3%（P ＜ 0.05），試驗 2 組與 1組之間及試驗3 組和 2 組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）；試驗2、3 組的酸性性洗滌纖維表觀消化率均高于1組，試驗3組與 1組相比顯著提高14.9%（P ＜0.05），試驗 2 組與 1組之間及試驗3組和 2 組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）。

表3 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊養(yǎng)分表觀消化率測定結(jié)果 %

2.3 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊血清中免疫指標(biāo)的影響 由表4 可知，試驗 2、3 組血清中的IgG、IgM 含量均高于1組，但差異性不顯著（P >0.05）；試驗 2、3 組血清中的 IgA 含量均高于 1組，試驗3組較 1組比顯著提高 18.8%（P ＜0.05），試驗 2 組高于 1組，但差異性不顯著（P >0.05）；試驗2 組和3 組之間相比差異性不顯著（P> 0.05）。

表4 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊血清中免疫指標(biāo)測定結(jié)果 ng/mL

3 討論

3.1 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊生長性能的影響 苜蓿經(jīng)自然晾曬或人工干燥可調(diào)制成便于儲存的飼草，但是在調(diào)整的過程中水分降低，營養(yǎng)價值降低，粗纖維含量升高，其利用率下降（娜娜，2018）。魏炳棟等（2016）研究表明，用復(fù)合菌劑發(fā)酵玉米秸稈后，可提高肉羊的生長性能。韓穎潔（2015）研究表明，用微生物處理的秸稈可以提高肉羊的生長性能。本試驗研究表明，用50%、100%微生物發(fā)酵苜蓿干草替代苜蓿干草，可以提高其平均日增重和平均采食量，降低料肉比，其中以100%微生物發(fā)酵苜蓿干草替代苜蓿干草效果顯著。從而說明苜蓿干草通過微生物發(fā)酵后，可提高其利用率，因而提高其生長性能。與上述文獻(xiàn)報道的基本一致。微生物發(fā)酵苜蓿干草替代苜蓿干草在反芻動物的養(yǎng)殖過程中均有一定的應(yīng)用價值。

3.2 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊養(yǎng)分表觀消化率的影響 飼糧中的粗纖維過高時，會影響粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分等營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，降低其利用率，因此營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率是評價動物飼糧營養(yǎng)特性及飼用價值的重要指標(biāo)之一 （張鵬飛，2019；趙佩榮，2019）。本試驗研究表明，50%、100%微生物發(fā)酵苜蓿干草替代苜蓿干草，可以提高干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、鈣、磷等營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，其中100%微生物發(fā)酵苜蓿干草替代苜蓿干草可以顯著提高其中性洗滌纖維、 酸性洗滌纖維。可能由于苜蓿干草及復(fù)合益生菌發(fā)酵過程中，會產(chǎn)生多種粗纖維分解酶，從而降低其粗纖維含量，并且在益生菌的作用下可合成菌體蛋白，提高其蛋白質(zhì)含量，同時可以刺激胃腸道分泌多種消化酶，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收，從而提高營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。

3.3 微生物發(fā)酵苜蓿干草對肉羊血清中免疫指標(biāo)的影響 免疫球蛋白是介導(dǎo)體液免疫重要的抗體物質(zhì)，在機(jī)體免疫過程中起重要的作用，免疫球蛋白主要包括 IgG、IgA、IgE、IgM、IgD 5 種 （張召興，2017）。免疫球蛋白IgG 由體內(nèi)的漿細(xì)胞分泌產(chǎn)生，主要介導(dǎo)抗感染免疫，免疫球蛋白IgA 主要參與黏膜免疫，在局部抗感染中發(fā)揮重要作用，免疫球蛋白IgM 是機(jī)體免疫中出現(xiàn)最早的抗體，具有很強(qiáng)的殺菌功能。因此，血清中免疫球蛋白含量變化是評價機(jī)體免疫機(jī)能的重要標(biāo)準(zhǔn) （李星，2019）。本試驗研究表明，50%、100%微生物發(fā)酵苜蓿干草替代苜蓿干草可以提高其免疫球蛋白IgG、、IgM 的含量，其中100%微生物發(fā)酵苜蓿干草替代苜蓿干草可顯著提高其IgA 含量。說明微生物發(fā)酵苜蓿干草可以提高機(jī)體的免疫機(jī)能。可能苜蓿干草通過微生物發(fā)酵后，所含的活性物質(zhì)可刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)，促進(jìn)抗體形成，增加免疫球蛋白的含量，提高其肉羊的免疫水平。

4 結(jié)論

微生物發(fā)酵苜蓿干草替代苜蓿干草可以提高肉羊生長性能、養(yǎng)分表觀消化率及免疫機(jī)能，具有臨床應(yīng)用與推廣價值。