譚敏 戴建武 曹瑩 胡函文 梁冬蕾 胡志兵（通訊作者）

（廣州市第十二人民醫(yī)院神經內科 廣東 廣州 510620）

動脈血栓形成性腦梗死約占全部卒中70%左右，，是人類致死、致殘的重要疾病之一。韓國的Han 等[1]提出新TOAST 分型，按病因對缺血性腦卒中進行分型，逐漸成為一種常見和公認的有效分型方法。新TOAST 分型將缺血性卒中分為5 型：①動脈粥樣硬化性血栓形成（atherothrombosis，AT）；②心源性腦栓塞；③小血管病變（small artery disease，SAD），又稱小動脈閉塞型腦梗死；④不明原因的腦卒中；⑤其他明確病因的腦卒中。其中動脈粥樣硬化性血栓形成（AT）與小血管病變（SAD）為大動脈和小動脈粥樣硬化后通過兩種機制導致卒中：①原位血栓形成血管閉塞；②斑塊部位的血栓脫落繼而栓塞遠端血管。近年來大量研究表明炎癥在ACI 發(fā)病及預后中起著重要作用?；|金屬蛋白酶（MMPs）通過降解和再塑細胞外基質，促進斑塊破裂進而導致ACI 發(fā)生；S100β 蛋白可誘導一氧化氮合酶的過度表達及其釋放，導致神經元損傷，激活炎癥反應中的核因子κB，并刺激細胞因子周期中小膠質細胞的活化，放大細胞因子炎癥級聯(lián)反應[2]。二者被認為在ACI 的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。本研究通過觀察動脈粥樣硬化性血栓形成（Atherosclerotic thrombosis，AT）組、小血管病變（Small artery disease，SAD）組血清S100β 蛋白、MMP-9 濃度，探討其與大動脈、小動脈粥樣硬化性血栓的關系。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年1 月—2018 年12 月廣州市第十二人民醫(yī)院神經內科ACI 患者65 例。其中男36 例，女29 例。AT 組34例，男19 例，女15 例；SAD 組31 例，男17 例，女14 例。選取我院體檢中心體檢的健康人群50 例為正常對照。男26 例，女24 例。入選人群均簽署知情同意書。入選標準：所有患者均急性起病，有明確神經系統(tǒng)損害局灶體征，經頭顱CT 與（或）MRI 確診為：（1）動脈粥樣硬化性血栓形成（atherothrombosis，AT）（2）小血管病變（small artery disease，SAD）。兩組均排除以下情況：（1）肝腎功能損害、心肌梗死等；（2）近14日未服用以下藥物：他汀類降脂藥、抗生素等。

1.2 方法

采用ELISA 法檢測患者血漿MMP9 及S100β 蛋白濃度。對照組于清晨空腹采取5ml 肘靜脈血，ACI 患者于入院時急查5ml靜脈血1 次，所有血液均置于普通真空采血管中，4℃下靜置30 min 后，離心機4000r/min 離心15min，分離血清并置于EP 管中，-70℃冰箱保存，成批采用酶聯(lián)免疫吸附法測MMP-9 及S100β 蛋白的濃度。

1.3 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)采用SPSS21.0 統(tǒng)計軟件處理。計量資料采用均數(shù)±標準差（±s）表示，并進行正態(tài)與方差齊性檢驗，組間計量資料的比較用ANOVA方差分析。方差不齊時行數(shù)據(jù)轉換或秩和檢驗。MMP-9 與S100B 蛋白之間的相關性使用Pearson 相關性分析。以a=0.05 為檢驗水準，P＜0.05（雙側）為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結果

2.1 各組間年齡無顯著差異。ACI患者血脂、空腹血糖（FBG）、Cysc 與對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）；同時，較之于SAD 組，AT 組上述指標無顯著性差異（P＞0.05），見表1。

表1 入選各組一般資料比較（±s）

表1 入選各組一般資料比較（±s）

注：與對照組比較，aP ＜0.05；與SAD 組比較，bP ＜0.05；三組年齡無顯著差異，P ＞0.05。

組別 年齡（歲） TG（mmol/L） CHOL（mmol/L） LDL（mmol/L） FBG（mmol/L） Cysc（mg/L）AT 組 67.40±7.62 2.90±1.45a 5.14±1.51a 3.34±0.59a 7.36±1.60a 1.11±0.38a SAD 組 66.32.±8.06 2.72±1.68ab 5.01±1.70ab 3.21±0.58ab 7.14±1.58ab 1.03±0.36ab對照組 65.20±6.46 1.70±0.42 3，61±1.16 2.36±1.16 5.80±1.44 0.77±1.44

2.2 三組患者S100β 蛋白、MMP-9 濃度比較。與對照組相比，AT 組與SAD 組的血清S100β 蛋白、MMP-9 濃度均顯著升高（P均＜0.05）；較之于SAD 組，AT 組S100β 蛋白、MMP-9 濃度上升較顯著（P＜0.05），見表2。

表2 血清S100β 蛋白、MMP-9 濃度比較（±s）

表2 血清S100β 蛋白、MMP-9 濃度比較（±s）

注：與對照組比較，aP ＜0.05，與SAD 組比較，bP ＜0.05。

組別 例數(shù) S100β 蛋白（mg/ml） MMP-9（ng/ml）AT 組 34 3.22±0.34a 323.09±34.59a SAD 組 31 5.34±1.06ab 549.29±48.59ab對照組 50 1.05±0.16 188.50±34.40

2.3 AT 組、SAD 組患者血清S100β 蛋白與MMP-9 濃度相關性檢測結果：采用Pearson 相關統(tǒng)計分析，無論是AT 組還是SAD 組，S100β 蛋白與MMP-9 相關性均無統(tǒng)計學意義（R=0.207，P＞0.05；R=0.307，P＞0.05）。見圖1、2。

圖1 AT 組血清S100β 蛋白與MMP-9 濃度相關性散點圖

3.討論

我國第三次國民死因調查結果表明，腦卒中已成為我國居民的首位致殘和致死原因。嚴重威脅我國人民生命和健康，同時給家庭和社會帶來沉重的經濟負擔和思想負擔。動脈血栓形成性腦梗死是最常見的腦卒中類型，占全部腦卒中的60%～80%。隨著影像學的發(fā)展，對缺血性卒中病因認識逐漸提高，公認用于急性缺血性卒中病因學分型為Org 10172 試驗TOAST[3]分型標準。2007年2 月，韓國神經病學專家Han[1]等在此基礎上提出改良新TOAST卒中分型，繼續(xù)開展進一步準備的病因學研究，對動脈血栓形成性腦梗死一級預防與二級預防策略、預后及復發(fā)判斷有重要的意義。他認為動脈粥樣硬化性血栓形成不應過度強調狹窄程度，而應強調有無易損斑塊；而炎癥反應引起的氧化應激是動脈粥樣硬化易損斑塊的起始環(huán)節(jié)，并貫穿于動脈粥樣硬化的整過程。動脈血栓形成性腦梗死包括大動脈和小動脈的血栓形成，其基本原理均為炎癥應激致易損斑塊的生物應答。因此，通過抑制炎癥級聯(lián)反應，是腦梗死一級預防及二級預防有效的策略。

基質金屬蛋白酶-9（Matrix metalloproteinases，MMP-9）是中性蛋白水解酶家族中的一種，與血管病變關系極為密切，具有鋅鈣離子依賴性，其主要作用為降解與再塑細胞外基質，維持基質動態(tài)平衡，參加炎癥反應諸多病生過程[4]。Sakata 研究表明動脈血管細胞外基質的重塑是血管損傷的組織學特征，后果可以造成血管基底膜與內膜破壞、中膜變薄、炎性細胞遷移、血管結構重建，從而導致動脈的早期擴張、動脈瘤形成，晚期動脈狹窄[5]。

Shah[6]等報道，MMPs 在粥樣斑塊脂核邊緣與肩部高表達，可使脂核邊緣與肩部的細胞外基質降解大于合成，促使斑塊破裂。由此推論MMP-9在預測易損粥樣斑塊破裂中具有重要的價值。本研究發(fā)現(xiàn)，AT 組、SAD 組患者血清MMP-9 濃度明顯高于對照組，AT 組MMP-9 濃度較SAD 組又有明顯升高，表明與小動脈閉塞型腦梗死比較，大動脈粥樣硬化型腦梗死患者血清MMP-9 水平顯著升高，可能與梗死面積以及組織損傷 程度有關。

血清S100β蛋白是一類由星形膠質細胞分泌的細胞因子[7]，它是神經膠質細胞的標志性蛋白，是神經元與膠質細胞相互作用的紐帶，易透過血腦屏障。正常人血清中含量很低且十分穩(wěn)定，但缺血性腦卒中時腦組織受損、血腦屏障破壞，由此產生的大量血清S100β蛋白透過血腦屏障，使血清S-100β蛋白含量升高。因此，通過檢測外周血中S-100β 蛋白濃度可反映腦損害的嚴重程度。本研究結果也顯示，AT 組、SAD 組患者血清血脂、空腹血糖（FBG）、Cysc 明顯升高的同時，S100β 蛋白濃度明顯高于對照組，且AT 組患者血清S100β 蛋白濃度較SAD 組明顯升高，可見與動脈粥樣硬化性血栓形成相關。

本研究的相關性分析表明，AT 組及SAD 組血清MMP-9 、S100β 蛋白濃度并無明顯相關，可能與炎癥反應過程復雜有關。也可能由于兩者出現(xiàn)峰值不同步造成不相關。因此，MMP-9 、S100β 蛋白在ACI 患者的高表達提示可能與動脈粥樣易損斑塊的形成有關。聯(lián)合檢測血清MMP-9、 S100β 蛋白可能是對動脈血栓形成性腦梗死患者一級預防和二級預防最為有效的策略之一。