王菊英 劉瑤瑤 李 鋒

(寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院醫(yī)學實驗中心，銀川 750004)

電化學發(fā)光法(ECLIA)檢測乙型肝炎病毒(HBV)感染在臨床中診斷率較高[1]。近年來，臨床檢驗中出現多例新生兒乙肝表面抗原(HBsAg)一過性陽性，其母體多數并非乙型肝炎患者。因此，本研究從本院兒科住院部檢測乙肝病毒標志物(HBV-M)的2 260例接種過乙肝疫苗的新生兒中，選取99例HBsAg陽性新生兒，通過病例對照及追蹤監(jiān)測，明確HBsAg陽性新生兒HBV感染狀況并分析其陽性原因，為臨床合理解釋新生兒HBV-M結果提供理論依據，為正確選擇HBV-M檢測時間提供指導性建議。

1 資料與方法

1.1資料

1.1.1研究對象 選取2014年1月～2017年12月寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院兒科住院部檢測HBV-M的2 260例接種過乙肝疫苗的新生兒，其中，男性1 335例、女性925例、年齡1～28 d。

1.1.2儀器及試劑 ROCHE COBAS E601電化學發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑、校準品及質控品(羅氏公司)；總膽紅素檢測使用奧森多VITROS5600全自動干式生化免疫分析儀及其配套試劑、校準品及質控品(中國奧森多醫(yī)療器械貿易有限公司)。

1.2方法 采集2 260例新生兒靜脈血2～3 ml，檢測HBV-M，HBsAg陽性者立即采用原管血清進行HBsAg定量復檢，確認陽性者納入觀察組，陰性者納入對照組，將觀察組依據年齡分為1～7 d組、8～14 d組和15～28 d組，對照組依據臨床診斷是否為高膽紅素血癥分為黃疸組和非黃疸組。知情同意后，觀察組進行1～2周HBV-M追蹤監(jiān)測，收集所有新生兒的臨床診斷、HBV-M及總膽紅素(TBIL)檢測結果，觀察組患兒母親的HBV感染資料，進行統計學分析。

1.3統計學處理 應用SPSS25.0軟件統計分析。樣本率比較采用χ2檢驗，平均值比較采用獨立樣本t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1觀察組HBV-M特征、追蹤監(jiān)測結果及其母親HBV感染狀況 經HBsAg定量確認，觀察組納入99例，陽性率4.4%(99/2 260)。觀察組HBV-M模式主要以單項HBsAg(+)為主，占比62.6%(62/99)，其次為HBsAg(+)合并HBsAb(+)，占比20.2%(20/99)；1～7 d組新生兒陽性檢出率最高，占比97.0(96/99)；3例HBeAg陽性者(出生時均進行了乙肝疫苗聯合乙肝高效價免疫球蛋白的標準免疫預防)其母親為乙肝“大三陽”，其余患兒母親HBsAg陰性，HBsAg定量測定值前者為3.84(0.5～11.5)U/ml，后者為0.11(0.06～0.24)U/ml，均為低值；追蹤監(jiān)測，第1周3例HBeAg陽性者HBV-M模式未變，67例HBsAg轉陰，29例患兒測定值明顯降低，并于第2周轉陰20例、9例未檢。觀察組HBV-M的檢出情況詳見表1。

2.2觀察組、黃疸組及非黃疸組總膽紅素比較 觀察組中新生兒高膽紅素血癥者為50例，占比50.5%。為排除新生兒黃疸引起HBsAg檢測結果假陽性，比較觀察組、黃疸組及非黃疸組總膽紅素檢測結果。觀察組與黃疸組差異無統計學意義(P>0.05)，與非黃疸組差異有統計學意義(P<0.05)；黃疸組與非黃疸組差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表1 觀察組HBV-M檢測結果

Tab.1 Results of HBV-M in observation group

Mode of HBV-M1-7 d8-14 d15-28 dTotalHBsAg(+)601162HBsAg(+) HBeAg(+) HBcAb(+)2002HBsAg(+) HBeAb(+) HBcAb(+)2002HBsAg(+) HBsAb(+) HBeAg(+) HBeAb(+) HBcAb(+)0011HBsAg(+) HBsAb(+)200020HBsAg(+) HBsAb(+) HBcAb(+)1001HBsAg(+) HBsAb(+) HBeAb(+) HBcAb(+)6006HBsAg(+) HBsAb(+) HBeAb(+)2002HBsAg(+) HBcAb(+)3003Total961299

GroupsnTBIL(μmol/L)tPObservation50247.2±73.11.012>0.05Jaundice526264.2±68.75.113<0.05Non-Jaundice1 635166.9±71.39.723<0.05

表3 觀察組與對照組HBsAb陽性率及其測定值比較

Tab.3 Comparison of HBsAb positive rate and results between observation group and control group

GroupsnPositive rate(%)χ2PResults(U/L)tPObservation9930.3(30/99)62.4<0.0555.1(12-1000)6.1<0.05Control2 16168.6(1 481/2 161)272.3(10-948)

2.3觀察組與對照組間HBsAb檢測結果比較 觀察組HBsAb陽性率及其測定值均低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

3 討論

HBsAg是乙肝病毒的外殼蛋白,本身不具有傳染性，但常伴隨乙肝病毒存在,HBsAg陽性可表示HBV感染[2]。本研究觀察組99例HBsAg陽性新生兒均經定量確認，定量檢測HBsAg血清標志物可有效反映HBV DNA復制程度，HBV DNA載量是反映HBV感染的最直接指標，由此表明該組患兒可能感染HBV，母嬰垂直傳播為HBV感染的主要途徑[3-5]。觀察組僅3例患兒母親為乙肝“大三陽”，其余患兒母親均為HBsAg陰性，經1～2周追蹤監(jiān)測共計87例HBsAg(+)轉陰，表明觀察組87.9%(87/99)未感染HBV。鑒于觀察組50.5%(50/99)為高膽紅素血癥患兒，為排除新生兒黃疸引起HBsAg檢測結果假陽性，本研究比較觀察組、黃疸組及非黃疸組間總膽紅素檢測結果，結果顯示觀察組與黃疸組差異無統計學意義(P>0.05)，與非黃疸組差異有統計學意義(P<0.05)。HBsAg試劑說明書標明膽紅素<684 μmol/L檢測結果不受影響,而觀察組總膽紅素為(247.2±73.1)μmol/L，小于此截斷值，由此可見新生兒黃疸對HBsAg檢測結果無影響。

乙肝疫苗主要成分不含有病毒遺傳物質HBsAg，不具有致病性，但保留了免疫原性，能夠刺激機體產生保護性抗體[6]。新生兒接種乙肝疫苗后會發(fā)生HBsAg一過性陽性，主要發(fā)生于接種后0～7 d，以單項HBsAg(+)為主，同時伴有合并性HBsAb(+)，HBsAg定量為低值水平[6-13]。本研究觀察組1～7 d組新生兒HBsAg陽性檢出率占97.0%(96/99)，HBV-M模式主要以單項HBsAg(+)為主，占比62.6%(62/99)，其次為HBsAg(+)合并HBsAb(+)，占比20.2%(20/99)，除3例HBeAg(+)者外，其余新生兒HBsAg定量測定為0.11(0.06～0.24)U/ml的低值水平，與文獻報道一致。劉華等[7]將乙肝疫苗1∶600稀釋后檢測HBsAg為0.13 U/ml，與本研究觀察組HBsAg定量濃度相似。鑒于87例HBsAg轉陰新生兒均接種過乙肝疫苗，HBV-M特征與報道一致，HBsAg已通過定量確認，并除了母嬰垂直傳播及黃疸影響檢測結果等因素，由此推測是接種乙肝疫苗即刻檢測引起的HBsAg一過性陽性。

張楠[14]認為新生兒HBsAb陽性率及病毒滴度均與母親HBsAb有關，對乙肝疫苗主動免疫具有負面效果。武巧珍[15]等也報道新生兒可通過胎盤獲得母源性HBsAb，且這些HBsAb能有效中和HBsAg，保護新生兒免受HBV感染，但同時也抑制乙肝疫苗的接種效果。本研究中，觀察組HBsAb陽性率及其測定值均低于對照組P<0.05，由此提示對照組HBsAg檢測結果陰性是由于高濃度的母源性HBsAb中和了乙肝疫苗中HBsAg，而觀察組因無HBsAb或濃度較低，無法中和或結合乙肝疫苗中HBsAg，導致陽性。

如果母源性HBsAb可以中和乙肝疫苗中的HBsAg，但觀察組中出現的20例HBsAg合并HBsAb陽性、10例HBsAg、HBsAb合并其他乙肝標志物陽性的模式的原因未明確。文獻報道S基因突變誘導機體產生的無效中和抗體不具備保護作用，試推測此類新生兒體內的母源性HBsAb可能為抗病毒變異株抗體，無法中和乙肝疫苗中的HBsAg，此推論有待進一步研究[16]。本研究不足之處在于3例HBeAg(+)及9例未完成追蹤監(jiān)測新生兒的HBV感染狀況未明確，有待日后補充病例繼續(xù)研究。

綜上所述，HBsAg陽性多出現于1周齡內新生兒，多數經2周后轉陰，表明并未感染HBV，為接種乙肝疫苗即刻檢測所致。由此提示，新生兒檢測HBV-M最好選擇在接種乙肝疫苗2～3周后。