譚洪輝，邱振華，蕭 飛，龍則平

（1.高州市人民醫(yī)院檢驗科，廣東高州 525200；2.茂名市人民醫(yī)院檢驗科，廣東茂名 525000）

自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH)是一種出現(xiàn)氨基轉(zhuǎn)移酶升高，高水平γ-球蛋白及高濃度循環(huán)自身抗體，以肝門靜脈淋巴細(xì)胞浸潤以及肝臟纖維化為病理特征，以女性為多發(fā)的慢性、進(jìn)行性肝臟壞死性炎癥[1-3]。AIH發(fā)病機(jī)制現(xiàn)尚未明確，目前研究推測是一種由免疫、遺傳、環(huán)境等多種因素間相互作用引起的慢性肝臟炎癥性疾病[4-5]。研究發(fā)現(xiàn)，AIH通常起病隱匿,在臨床癥狀上類似普通病毒性肝炎，但兩者治療方式不同。長期得不到正確治療的AIH患者的肝臟慢性炎癥可

發(fā)展為肝衰竭[6]，因而AIH若能得到早期鑒別診斷，正確治療，對控制AIH發(fā)展及預(yù)后有重要意義[7]。過去的AIH研究，主要是分析患者肝功能和自身免疫抗體，本課題研究主要嘗試對慢性肝炎癥狀的患者在已進(jìn)行自身免疫抗體分析的基礎(chǔ)上，再聯(lián)合分析紅細(xì)胞分布寬度（red blood cell distribution width，RDW）水平，探討RDW及免疫抗體AIH鑒別診斷價值。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象 AIH組選自2015年1月～2019年10月在高斗市人民醫(yī)院住院的被診斷為AIH的患者73例（所選AIH病例均肝炎病毒標(biāo)志陰性，診斷符合AIH 相關(guān)指南[8]），其中男性13例，女性60例，年齡61.24±13.05歲。病毒性肝炎（viral hepatitis，VH）組選自同時期收治的慢性病毒性肝炎患者80例，包括慢性乙肝40例和慢性丙肝40例，其中男性15例，女性65例，年齡60.14±14.25歲。對照組選自同期健康體檢者80例（所選對照組肝功能正常，肝炎病毒標(biāo)志陰性，無自身免疫性疾?。?，其中男性15例，女性65例，年齡60.56±10.45歲，三組研究對象的年齡、性別和血紅蛋白含量無差異，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 儀器和試劑 血細(xì)胞檢測采用希森美康XT-4000i全自動血細(xì)胞分析儀及配套試劑進(jìn)行檢測。肝功能采用日立7602全自動生化分析儀及美康生物生化試劑進(jìn)行檢測。自身免疫抗體的檢測儀器及試劑盒均購自德國EUROMMUN醫(yī)學(xué)診斷公司。

1.3 檢測方法 所選研究對象均進(jìn)行血細(xì)胞檢測，肝功能和四項自身免疫抗體（包括抗肝特異性胞漿抗原Ⅰ型抗體（anti hepatospecific cytoplasmic antigen type Ⅰ antibody,LCI），抗核抗體（antinudear antibody ANA），抗平滑肌抗體（anti smooth muscle antibody,ASMA），抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原抗體（anti soluble liver antigen/anti hepatopancreas antigen antibody,SLA/LP）檢測。LC1和SLA/LP應(yīng)用免疫印跡法進(jìn)行測定，結(jié)果在 EUROlineScan分析軟件中讀取，以半定量(+)為陽性。ANA和ASMA采用間接免疫熒光法進(jìn)行測定，血清以1∶100，1∶320，1∶1 000用稀釋液進(jìn)行倍比稀釋，檢測結(jié)果通過熒光顯微鏡進(jìn)行觀察判斷?？贵w滴度以≥1∶100為陽性，抗體核型根據(jù)組織或細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)特征性綠色熒光進(jìn)行判斷。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料以例數(shù)及檢出率[n（%）]表示，采用R×C表χ2檢驗。用K-S檢驗檢驗計量資料的正態(tài)性，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析；非正態(tài)分布計量資料以M（P25，P75）表示，組間差異采用Mann-WhitneyU秩和檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組研究對象四項自身免疫抗體檢測結(jié)果比較 見表1。AIH組四項自身免疫抗體檢出率均高于非AIH組，其中ANA，ASMA和SLA/LP 三項組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 四項自身抗體陽性率比較[n（%）]

2.2 三組研究對象ANA抗體滴度檢出率比較 見表2。對照組和病毒肝炎組均以低滴度(≤1∶100)為主，而AIH組則以高滴度(≥1∶320)為主,三組對象高滴度(≥1∶320) ANA檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 ANA滴度檢出率比較[n（%）]

2.3 三組研究對象ANA抗體核型檢出率比較 見表3。三組患者ANA抗體核顆粒型和核均質(zhì)型差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而核仁型和胞槳型差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表3 ANA核型檢出率比較[n（%）]

2.4 三組研究對象Hb及RDW檢測水平比較 見表4。三組對象Hb差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。AIH組患者與非AIH組患者RDW差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表4 Hb及RDW檢測水平比較（±s）

表4 Hb及RDW檢測水平比較（±s）

項 目 AIH組（n=73）VH組（n=80）對照組（n=80）F P Hb(g/L) 119.18±15.83 121.36±16.56 123.79±15.37 1.60 0.20 RDW(%) 14.65±2.01 13.15±1.18 11.95±0.46 76.740.00

3 討論

AIH疾病呈慢性炎癥進(jìn)程，通常發(fā)病隱匿，大部分AIH早期缺乏特異性臨床癥狀，AIH的臨床診斷和治療仍然面臨巨大挑戰(zhàn)[9]。目前未完全明了AIH發(fā)病機(jī)制，但免疫耐受機(jī)制失衡，過度自身免疫反應(yīng)在其發(fā)病中作用已日漸明確[2]，AIH患者血清中出現(xiàn)多種高水平的自身抗體[10]引起機(jī)體過度的自身免疫反應(yīng)，肝臟免疫平衡被打破，多種免疫細(xì)胞、免疫分子被激活，各類炎癥細(xì)胞和趨化因子釋放至肝臟[11-12]引起免疫性肝損傷，導(dǎo)致自身免疫性肝炎。

AIH患者出現(xiàn)自身免疫抗體是其一個顯著臨床特征[13]，LC1，ANA，ASMA和SLA/LP均是AIH的主要自身抗體[10]，但和其他自身免疫疾病一樣，AIH靠單一自身抗體檢測，無法兼顧敏感度和特異度。四項自身抗體聯(lián)合檢測，敏感度和特異度能較好互補(bǔ)，可以較好地診斷AIH與非AIH。其中ANA作為一種無器官種屬特異性的自身抗體，在非自身免疫疾病患者和健康人群也能被檢測出，但AIH與非AIH兩者ANA滴度及核型檢出率有統(tǒng)計學(xué)差異，分析ANA的滴度和核型可以作為鑒別AIH和非AIH的重要指標(biāo)。

近年來，RDW作為紅細(xì)胞形態(tài)參數(shù)，被認(rèn)為是一種炎癥指標(biāo)，可用于指征機(jī)體系統(tǒng)性炎癥狀態(tài)[14]。其水平的升高與許多疾病的炎癥水平呈正相關(guān)[15]。RDW也被應(yīng)用于自身免疫性疾病中，可反映機(jī)體炎癥和貧血情況，可監(jiān)測疾病的發(fā)生及病情的活動[16]。AIH作為一種慢性炎癥進(jìn)程疾病[9]，肝功能受損及機(jī)體炎癥狀態(tài)導(dǎo)致造血功能低下，同時肝臟儲備功能差，原材料缺乏使血細(xì)胞成熟障礙，生成大量不成熟的小體積紅細(xì)胞[1]，使RDW明顯升高，因此RDW對AIH具有潛在的鑒別診斷或預(yù)后價值。

綜上所述，ANA，ASMA，SLA/LP和LC1 4項自身抗體及RDW聯(lián)合檢測，分析四項自身免疫抗體檢出率并分析ANA抗體滴度及核型，同時分析RDW水平，對AIH具有鑒別診斷價值。