宋 揚(yáng)，范雪松，王恩世，孫 奇，賀建勛，張 蕾，趙 松，崔 穎，袁 慧△

1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院/北京市心肺血管疾病研究所檢驗(yàn)科，北京 100029；2.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外醫(yī)院成人心臟外科中心，北京 100037；3.北京市第一社會(huì)福利院/北京市老年病醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100011

動(dòng)脈粥樣硬化可導(dǎo)致心腦血管疾病，是嚴(yán)重危害人類健康的病理基礎(chǔ)。而載脂蛋白E(ApoE)是血液中參與機(jī)體脂質(zhì)代謝及調(diào)節(jié)膽固醇平衡的主要載脂蛋白之一，其基因多態(tài)性與多種疾病相關(guān)。ApoE在動(dòng)脈粥樣硬化的病理過程中具有抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用，ApoE通過促進(jìn)外周細(xì)胞膽固醇的流出及清除血漿膽固醇脂蛋白，并通過減少低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白的形成，達(dá)到抑制泡沫細(xì)胞形成從而抗動(dòng)脈粥樣硬化[1]。本文通過研究頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊患者血清中ApoE水平，旨在分析脂類代謝與頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2019年2—5月在首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院體檢中心行頸動(dòng)脈超聲的體檢者300例為研究對(duì)象。研究對(duì)象中男177例，女123例；年齡30～86歲，平均(57.42±13.06)歲；男女比例為1.44∶1。所收集的人群中對(duì)照組118例，對(duì)照組的頸動(dòng)脈超聲結(jié)果為雙側(cè)頸動(dòng)脈正常，并排除心腦血管疾??；頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)異常組182例。所有研究對(duì)象均排除嚴(yán)重肝腎功能不全、腦卒中、心臟病、肺動(dòng)脈高壓、腫瘤、嚴(yán)重感染等。所有研究對(duì)象均自述未服用過任何降脂藥物。本研究檢查前所有研究對(duì)象簽署知情同意書。

1.2儀器與試劑 美國(guó)貝克曼庫爾特AU5400全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血脂指標(biāo)。主要血脂檢測(cè)指標(biāo)包括三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和ApoE，試劑購(gòu)自日本積水醫(yī)療株式會(huì)社。采用國(guó)際臨床化學(xué)和實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)聯(lián)盟(IFCC)推薦的酶法檢測(cè)TG水平。采用第3代均相法檢測(cè)LDL-C水平，當(dāng)標(biāo)本測(cè)定值超過上限時(shí)，將標(biāo)本用9 g/L氯化鈉溶液作1+1稀釋重新檢測(cè)，結(jié)果乘以2。采用第3代均相法檢測(cè)HDL-C水平，當(dāng)標(biāo)本測(cè)定值超過上限時(shí)，將標(biāo)本用9 g/L氯化鈉溶液作1+2稀釋重新檢測(cè)，結(jié)果乘以3。采用免疫透射比濁法檢測(cè)ApoE水平。均采用日本積水醫(yī)療株式會(huì)社提供的配套校準(zhǔn)品及質(zhì)控品，嚴(yán)格按照試劑說明書制訂測(cè)定參數(shù)。

1.3方法 受試者均于前一日空腹12 h以上，次日清晨VACUETTE?真空采血管采集肘靜脈血5 mL，室溫靜置30 min，4 ℃ 3 000×g離心10 min分離血清，送檢驗(yàn)科直接檢測(cè)TG、LDL-C和HDL-C水平。同時(shí)吸取500 μL血清于EP管中，凍存至-80 ℃保存，統(tǒng)一進(jìn)行ApoE水平檢測(cè)。頸動(dòng)脈超聲檢查儀器為日本東芝Aplion-500超聲診斷儀(探頭頻率4～11 MHz)，均為同一位超聲體檢醫(yī)生操作，根據(jù)《血管超聲檢查指南》對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊進(jìn)行評(píng)價(jià)，如果IMT異常組中有局限性回聲結(jié)構(gòu)突出管腔情況存在(回聲結(jié)構(gòu)可不均勻或伴聲影)，則進(jìn)一步分亞組：IMT 1.0～<1.5 mm者納入IMT增厚組(65例)，IMT≥1.5 mm者納入頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組(117例)。

2 結(jié) 果

2.1IMT異常組與對(duì)照組臨床資料比較 IMT異常組與對(duì)照組的性別構(gòu)成、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)`和既往史(吸煙、飲酒、運(yùn)動(dòng)、高血壓和冠心病患病率)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。IMT異常組的年齡和糖尿病患病率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2IMT異常組與對(duì)照組血脂水平比較 IMT異常組與對(duì)照組的TG和HDL-C水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。IMT異常組的LDL-C水平高于對(duì)照組，IMT異常組的ApoE水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對(duì)照組臨床資料比較 頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對(duì)照組的性別構(gòu)成、BMI和既往史(吸煙、飲酒、運(yùn)動(dòng)、高血壓和冠心病患病率)比較，3組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組和IMT增厚組的年齡高于對(duì)照組(P<0.01)，頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組與IMT增厚組的年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。IMT增厚組的糖尿病患病率高于頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組和對(duì)照組(P<0.01)，頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組與對(duì)照組糖尿病患病率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 IMT異常組及其各亞組與對(duì)照組臨床資料比較

2.4頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對(duì)照組血脂水平比較 頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對(duì)照組的TG、HDL-C和LDL-C水平比較，3組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組ApoE水平低于IMT增厚組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，IMT增厚組和對(duì)照組ApoE水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 IMT異常組及其各亞組與對(duì)照組血脂水平比較

3 討 論

ApoE在多種脂蛋白顆粒中均存在，最先在健康者VLDL-C中發(fā)現(xiàn)，主要作用是參與脂類代謝、神經(jīng)元的修復(fù)、再生和免疫反應(yīng)，所以，ApoE的異常往往伴隨著脂代謝的異常[2]。LDL-C作為傳統(tǒng)的致動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素，有著不可替代的臨床應(yīng)用價(jià)值。但在臨床上許多患者盡管LDL-C在正常范圍但仍發(fā)生急性心腦血管事件，還有許多患者盡管應(yīng)用他汀類藥物使LDL-C降到正常范圍仍發(fā)病，說明非傳統(tǒng)血脂指標(biāo)提示LDL-C以外的危險(xiǎn)因素及血脂殘留風(fēng)險(xiǎn)有著重要的臨床意義。

本研究發(fā)現(xiàn)，ApoE的水平在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組低于IMT增厚組和對(duì)照組，而LDL-C水平僅在IMT異常組和對(duì)照組之間有差異，在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對(duì)照組3組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示ApoE水平隨著斑塊嚴(yán)重程度發(fā)展可進(jìn)一步識(shí)別出頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊，從另一個(gè)側(cè)面反映ApoE在不同的疾病分層中具有不同的水平。年齡在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組和IMT增厚組高于對(duì)照組，頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組和IMT增厚組的年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IMT增厚組的糖尿病患病率高于頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組和對(duì)照組，而頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組與對(duì)照組的糖尿病患病率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組中ApoE水平低不是由年齡和糖尿病導(dǎo)致的。

ApoE參與到脂質(zhì)運(yùn)輸及代謝過程的方式是依靠其所攜帶的脂質(zhì)結(jié)合域，結(jié)合極低密度脂蛋白和高密度脂蛋白來運(yùn)輸膽固醇和TG，從而參與細(xì)胞對(duì)脂蛋白的吸收。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，ApoE可以影響血脂水平，而脂質(zhì)代謝紊亂是動(dòng)脈粥樣硬化眾多發(fā)病因素中非常重要的環(huán)節(jié)。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中膽固醇主要由血漿脂蛋白構(gòu)成，而ApoE又是構(gòu)成血漿脂蛋白的重要成分，ApoE在脂質(zhì)代謝中可作為高脂血癥與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的重要分子靶標(biāo)[3-5]。此外，有研究顯示，ApoE具有非常明顯的基因遺傳多態(tài)性，ApoE可通過多態(tài)性蛋白形式參與脂蛋白的轉(zhuǎn)化與代謝過程，ApoE與脂代謝紊亂、冠心病和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[6-7]。ApoE的其他作用還包括：ApoE能調(diào)控血漿中脂蛋白的清除與脂蛋白的氧化，從而增加外周細(xì)胞膽固醇的流出，達(dá)到維持血漿膽固醇總體內(nèi)穩(wěn)態(tài)的作用；ApoE可抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞的遷移、增殖活動(dòng)；ApoE可以調(diào)節(jié)血小板功能，通過激活一氧化氮合酶，促使血小板產(chǎn)生足夠的一氧化氮達(dá)到抑制血小板聚集的作用；ApoE亦可通過減少T淋巴細(xì)胞活化，達(dá)到抑制白細(xì)胞介素-2的產(chǎn)生及淋巴細(xì)胞增殖的作用[8-9]。本研究結(jié)果也進(jìn)一步支持ApoE可參與到動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展過程中。

本研究的不足之處：(1)未能通過大樣本數(shù)據(jù)獲取資料；(2)本研究為橫斷面研究，無法確定ApoE與頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊發(fā)生之間的因果關(guān)系。因此，若要進(jìn)一步確定ApoE在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的臨床應(yīng)用價(jià)值,需要更深入的研究。