阿不拉江·托合提 程秀琴 阿布利克木·依明 卡衣賽爾·卡哈爾
(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院耳鼻咽喉科 新疆 烏魯木齊 830001)
慢性化膿性中耳炎、中耳膽脂瘤屬于常見慢性炎性疾病,與病毒、細菌等感染具有密切聯(lián)系,對患者生活質(zhì)量造成一定影響[1]。研究表示,中耳黏膜具有一定免疫系統(tǒng),可引起炎癥反應(yīng),且中耳炎的發(fā)生與機體免疫調(diào)節(jié)不平衡相關(guān)。Toll 樣受體2(TLR2)及Toll 樣受體4(TLR4)與中耳免疫調(diào)節(jié)具有一定關(guān)系,其可維持中耳正常功能,當基因突變可能加重中耳炎癥狀[2]。研究表示,明確TLR2、TLR4 在中耳炎及中耳膽脂瘤中的表達,可為臨床診治提供重要基礎(chǔ),但目前臨床對其研究并不多見。本研究旨在探討TLR2 及TLR4 在慢性化膿性中耳炎與中耳膽脂瘤中的表達差異。
回顧性收集2018 年1 月—2019 年6 月本院接收的45 例慢性化膿性中耳炎患者、37 例中耳膽脂瘤患者,分為將其設(shè)為中耳炎組、中耳膽脂瘤組;另收集同期本院體檢中心接收的43 例健康體檢者,將其設(shè)為對照組?;颊吲R床資料均完整。3 組一般資料,差異無顯著意義(P>0.05)。
同一醫(yī)師鉗取所有受檢者肉芽組織,將所取標本液氮冷凍,手術(shù)結(jié)束后放入冰箱中備用。取標本組織進行固定,常規(guī)石蠟包埋及切片,進行常規(guī)脫蠟及水化,采用枸櫞酸鈉緩沖液修復(fù)抗原,用0.01mol/L PBS 漂洗3 次,3min/次;滴加一抗,30~40uL/片,孵育過夜;取出濕盒,于室溫放置30min;滴加二抗,30 ~40uL/片,維持30min,吸去封閉液。陰性對照加同種型抗人酶結(jié)合物(IgG),檢測切片分別滴加兔抗人TLR2抗體、兔抗人TLR4 抗體,孵育過夜,PBS 漂洗3 次。免疫組化試劑盒均由武漢博士德公司提供;任選5 個200 倍視野,計數(shù)TLR2 與TLR4 陽性細胞數(shù)。對比TLR2、TLR4 在三組受檢者中耳肉芽組織中的表達差異。
采用SPSS20.0 統(tǒng)計學軟件,三組間比較采用單因素方差分析檢驗,兩兩比較采用LSD-t 檢驗,以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。
三組標本中TLR2、TLR4 陽性細胞數(shù)對比 三組中中耳膽脂瘤組TLR2、TLR4 陽性細胞數(shù)最高,其次是中耳炎組,對照組最低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。
表1 三組標本中TLR2、TLR4 陽性細胞數(shù)(±s,個/200 倍視野)
表1 三組標本中TLR2、TLR4 陽性細胞數(shù)(±s,個/200 倍視野)
注:與對照組比,aP <0.05;與中耳炎組比,bP <0.05。
組別 例數(shù) TLR2 TLR4中耳炎組 45 110.12±11.32a 98.14±11.01a中耳膽脂瘤組 37 158.64±18.65ab 116.01±7.42ab對照組 43 22.31±7.13 16.29±3.50 P 0.000 0.000
中耳膽脂瘤及肉芽組織是慢性化膿性中耳炎的兩種病理變化,具有較高致殘率及致死率[3-4],可能會發(fā)生顳骨溶骨性破壞等嚴重并發(fā)癥;膽脂瘤主要病理特征為中耳腔存在大量鱗狀上皮及程序性角化細胞凋亡等,其發(fā)病機制尚不明確[5]。研究表明,分析TLR2 與TLR4 在膽脂瘤及慢性化膿性中耳炎肉芽組織中的表達,可為臨床診治提供參考,但目前對其研究甚少。
T o l l 樣受體主要分布在免疫細胞以及與外界相通的上皮細胞,且在巨噬細胞等專職抗原細胞表面十分豐富,其通過識別病原體相關(guān)分子模式,將相應(yīng)信號轉(zhuǎn)至細胞內(nèi),進而促進炎性細胞的合成及釋放,最終引起免疫反應(yīng)。中耳炎及中耳膽脂瘤均屬于慢性炎癥疾病,肉芽組織的形成是其最為顯著特征,研究表示,在這兩種疾病肉芽組織中TLR2、TLR4表達均顯著高于健康人群,相關(guān)學者分析其原因可能為,TLR2、TLR4 信號通路處于一種過度活化的狀態(tài),進而易導致過度炎性反應(yīng),產(chǎn)生炎性損害。研究表明,TLR4 在啟動機體炎性反應(yīng)中起到至關(guān)重要作用;TLR2 在促進慢性炎癥的炎性細胞消除中起到一定作用。本研究結(jié)果顯示,三組中中耳膽脂瘤組T L R2、T L R4 陽性細胞數(shù)最高,其次是中耳炎組,對照組最低,分析其原因在于,慢性化膿性中耳炎及中耳膽脂瘤均屬于慢性炎癥疾病,且中耳膽脂瘤肉芽組織存在更多的炎性細胞浸潤,具有較強炎癥反應(yīng),故T L R2、T L R4 具有較高表達。
綜上所述,TLR2 與TLR4 在慢性化膿性中耳炎與中耳膽脂瘤中均有較高表達,且在中耳膽脂瘤中表達更高,可為臨床診治提供參考。