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研究不同梅毒血清學(xué)檢驗法聯(lián)合運用價值

2020-09-07 12:42:46
中國社區(qū)醫(yī)師 2020年6期
關(guān)鍵詞:檢測法梅毒微量

529200臺山市中醫(yī)院,廣東江門

現(xiàn)階段,梅毒檢驗方式主要有兩種,梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(Trust)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(TPPA),而不同方式在臨床應(yīng)用過程中會存在程度不一的假陰性或假陽性,延誤患者治療時機[1]。本文分別以Trust、TPPA對血清標(biāo)本進(jìn)行檢測,并聯(lián)合應(yīng)用兩種方式,對比梅毒檢出準(zhǔn)確率,現(xiàn)報告如下。

資料與方法

2016年2月-2018年1月收治梅毒患者53 例,男31 例,女22 例;年齡21~70 歲,平均(45.5±2.5)歲;潛伏期5 例,Ⅰ期13 例,Ⅱ期27 例,Ⅲ期8 例,血液標(biāo)本離心處理之后去血清置于-70℃環(huán)境中保存。

儀器及試劑:試劑盒:Trust 試劑盒--上海榮盛生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn);TPPA 試劑盒--富士瑞必歐株式會社生產(chǎn);振蕩器:XK968 型振蕩器;酶標(biāo)儀: MK3 型酶標(biāo)儀;洗板機:KHBsT96W洗板機。

方法:對患者血清標(biāo)本分別行Trust、TPPA 檢測。①TPPA:取血清稀釋液,通過微量滴管將其置入微量反應(yīng)板的第1個孔內(nèi),滴入4滴即可,容量控制在100 μL左右,然后選擇微量反應(yīng)板第2 個孔至第4 個孔,每個孔內(nèi)滴入1 血清稀釋液,容量控制在25 μL 左右。通過微量移液管取25 μL 左右的樣品,置入微量反應(yīng)板的第1 個孔內(nèi),借助微量加樣器遵從2 n 法,由第一個孔開始稀釋,直至4 個孔全部完成稀釋。通過滴管取1滴未致敏粒子,容量控制在25 μL左右,將其滴入第3個孔內(nèi),再取1滴致敏粒子,容量控制在25 μL 左右,將其滴入第4 個孔內(nèi)。以平板混合器進(jìn)行混合,混合周期約為30 s,靜置于室溫環(huán)境中,持續(xù)周期為2 h。②Trust:取生理鹽水對血清稀釋,促使其由原始比例的1:2 轉(zhuǎn)變?yōu)?:64,然后取微量反應(yīng)板,將適量心磷脂抗原滴加在各個孔內(nèi),取振蕩器對其進(jìn)行水平震蕩,震蕩強度控制在100 次/min 左右,震蕩周期控制在8 min左右。

表1 兩種檢測方式梅毒檢出率比較[n(%)]

表2 兩種方式與聯(lián)合檢驗的價值對比[n(%)]

觀察指標(biāo):比較兩種檢查方式梅毒檢出率及聯(lián)合應(yīng)用的檢出率。

統(tǒng)計學(xué)處理:數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0 軟件處理;計數(shù)資料以[n(%)]表示,采用χ2檢驗;P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

兩種檢測方式梅毒檢出率比較:TPPA檢測法在潛伏期梅毒方面檢測率更為顯著;Trust 在Ⅰ期、Ⅱ期梅毒方面檢出率偏高,且二者在Ⅲ期梅毒方面的檢出率均為100%。見表1。

兩種檢測方式與聯(lián)合檢驗價值比較:聯(lián)合應(yīng)用Trust、TPPA檢測方法對梅毒敏感性和檢出率均顯著高于兩種方法單獨使用,可見聯(lián)合法可以在極大程度上提高梅毒敏感性,從而改善檢出率,見表2。

討 論

本次試驗結(jié)果顯示,兩種檢測方法在潛伏期、Ⅰ期、Ⅱ期以及Ⅲ期梅毒方面均具有較好檢出率,但相對來說,TPPA檢測法在潛伏期梅毒方面檢測率更為顯著;Trust 在Ⅰ期、Ⅱ期梅毒方面檢出率偏高,且二者在Ⅲ期梅毒方面檢出率均為100%。而聯(lián)合應(yīng)用兩種檢測方法,可以在極大程度上提高梅毒敏感性,從而改善檢出率。

由于生活方式的改變,現(xiàn)階段每年梅毒暴發(fā)率均呈現(xiàn)不斷攀升態(tài)勢,且其中所占比較高的為潛伏期梅毒攜帶者[2],如果僅僅通過Trust法對血液中的梅毒進(jìn)行篩查,會帶來很大漏診可能,導(dǎo)致一些潛伏期梅毒攜帶者的病毒傳播途徑無法得到及時有效的切斷,不僅會影響潛伏期梅毒患者生理健康、心理健康,還會威脅患者家人生理健康。除此之外,因為Trust法歸屬于非特異性行列,在臨床應(yīng)用過程中,受到干擾可能性較大,這種干擾可以是兩方面的:①傳染性疾??;②自身免疫性疾病。本次試驗過程中,以TPPA 為初篩法,然后以Trust 及其滴度進(jìn)行檢驗,所以在很大程度上減少了Trust 檢測結(jié)果的假陽性。TPPA 檢測法通過梅毒螺旋抗體致敏明膠顆粒的應(yīng)用[3],在血清抗體、抗原發(fā)生特異性反應(yīng)時會有凝集反應(yīng)出現(xiàn),由此可見該種檢測方法敏感度更高,特異性更強,對梅毒檢驗效果更好。但是該種檢驗方式同樣存在一定不足之處,即TPPA檢測法操作步驟較多、流程繁瑣、周期長,需要操作者具有較高檢測操作水平和技能,標(biāo)本保存難度大,并且其與RPR 一樣需要以肉眼觀察對檢驗結(jié)果進(jìn)行判定[4-5]。

綜上所述,兩種檢測方法聯(lián)合應(yīng)用對梅毒診斷效果最佳,但在實際臨床中為保證工作效率,可通過TPPA 初篩樣本,對疑似梅毒樣本進(jìn)行Trust及其滴度檢測,以保證診斷率。

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