張家瑞 阿麗亞·買買提依明 屈勇剛* 谷思穎 魏 其 吳圓圓 李 靜 常軍帥 李 巖

（1石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832003；2新疆石河子市石河子鎮(zhèn)農(nóng)林牧辦，新疆石河子 832000；3新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)工作總站，新疆烏魯木齊 830063）

豬圓環(huán)病毒（PCV）于1974年首次被確定為豬腎細(xì)胞系PK-15的一種非致病性的病毒[1]。直至1991年，在加拿大首次從患斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的豬中分離出一種PCV變異株，該變異株被確定為一種新的多因素綜合征病原，并被命名為PCV-2。該變異株在系統(tǒng)發(fā)育和血清學(xué)上不同于PK-15細(xì)胞培養(yǎng)污染物，后者被稱為PCV-1。PCV1和PCV2現(xiàn)被國(guó)際病毒分類委員會(huì)確認(rèn)為圓環(huán)病毒屬內(nèi)的2個(gè)不同物種[2]。自2001年我國(guó)首次報(bào)道PCV-2感染后，該病在我國(guó)的流行呈逐年上升趨勢(shì)[3]。由于該病除了自身帶來(lái)的仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰弱綜合征、皮炎和腎病綜合征、增生性壞死間質(zhì)肺炎和繁殖障礙等疾病外，還導(dǎo)致豬群產(chǎn)生嚴(yán)重的免疫抑制，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重困擾和巨大經(jīng)濟(jì)損失[4]。疫苗免疫被認(rèn)為是預(yù)防豬圓環(huán)病毒病的重要手段之一，抗體檢測(cè)可以為控制當(dāng)?shù)匾卟×餍刑峁﹨⒖?。使豬群長(zhǎng)期保持較高的群體免疫水平，是規(guī)模化豬場(chǎng)有效防控豬圓環(huán)病毒病的有效措施之一[5]。為了解2019年新疆部分地區(qū)豬群的PCV-2的免疫抗體水平，本試驗(yàn)選擇伊犁、昌吉、阿克蘇、奎屯、石河子等5個(gè)地區(qū)的5個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)進(jìn)行分析，以期在一定程度上為新疆地區(qū)養(yǎng)豬企業(yè)防控PCV2工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源

血液樣品采自新疆伊犁、昌吉、阿克蘇、奎屯、石河子等5個(gè)地區(qū)的5個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)，共338份血清樣品。其中，哺乳仔豬血清50份、保育豬血清64份、經(jīng)產(chǎn)母豬血清129份、后備豬血清39份、育肥豬血清44份、種公豬血清12份。

1.2 診斷試劑盒和儀器

豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（北京金諾百泰生物技術(shù)有限公司，JN60315），自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國(guó)BioTek公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 采集樣品

選擇有代表性的規(guī)模化豬場(chǎng)，按照3～5 mL/頭的標(biāo)準(zhǔn)，一次性從豬前腔靜脈進(jìn)行血液采集，經(jīng)過(guò)30 min左右的室溫靜置，待血清析出后，逐管吸取1 mL血清于滅菌的1.5 mL EP管中，分組編碼標(biāo)記，以4 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min，離心后直接進(jìn)行ELISA檢測(cè)，也可保存于-20℃條件下備用。

1.3.2 間接ELISA檢測(cè)法

按照豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，用酶標(biāo)儀以450 nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的OD450值，據(jù)OD450值對(duì)抗體水平進(jìn)行判定。

1.3.3 結(jié)果判定

試驗(yàn)有效判定為NCx（陰性對(duì)照的OD450值）＞0.4，PCx（陽(yáng)性對(duì)照的OD450值）＜0.3；樣品S/P＝（樣品 A450－NCxA450） /（PCxA450－NCxA450）。若被檢樣品的S/P＜0.4，該樣品為陰性；若被檢樣品的S/P≥0.4，該樣品為陽(yáng)性。

1.3.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析

使用SPSS 20、Excel等軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)結(jié)果

5家規(guī)?；i場(chǎng)共338份豬血清，豬圓環(huán)病毒2型抗體平均陽(yáng)性率為70.71%，平均S/P值為1.69。5家規(guī)模化豬場(chǎng)（A、B、C、D、E）的抗體陽(yáng)性率分別為48.57%、100.00%、58.49%、95.92%和39.29%。B場(chǎng)和D場(chǎng)的豬圓環(huán)病毒2型抗體陽(yáng)性率均高于國(guó)家規(guī)定水平（＞70%），且上述豬場(chǎng)的平均S/P值較大。A、C、E場(chǎng)的豬圓環(huán)病毒2型抗體平均陽(yáng)性率（48.57%、58.49%和39.29%）低于國(guó)家規(guī)定水平。使用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析顯示B場(chǎng)和A、C、D、E 4個(gè)場(chǎng)豬圓環(huán)病毒2型抗體水平差異顯著（＜0.05）；D場(chǎng)和A、B、C、E 4個(gè)場(chǎng)豬圓環(huán)病毒2型抗體水平差異顯著（＜0.05），結(jié)果見表1。

表1 新疆部分地區(qū)5個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同類別豬群的豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)結(jié)果

哺乳仔豬、保育豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備豬、育肥豬、種公豬的豬圓環(huán)病毒2型抗體平均陽(yáng)性率分別為44.00%、26.56%、90.70%、92.31%、88.63%和66.67%。不同類別豬群之間的豬圓環(huán)病毒2型抗體水平存在較大差異。其中，經(jīng)產(chǎn)母豬和后備豬的抗體陽(yáng)性率達(dá)90%以上，保育豬的抗體陽(yáng)性率最低為26.56%。哺乳仔豬、保育豬、后備豬、育肥豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、種公豬的豬圓環(huán)病毒2型抗體平均S/P值分別為0.46、0.62、2.02、1.94、1.65和0.74。結(jié)果見表2。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，2019年新疆伊犁、昌吉、阿克蘇、奎屯、石河子5個(gè)地區(qū)的5個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)中只有2個(gè)豬場(chǎng)的豬圓環(huán)病毒2型抗體陽(yáng)性率在國(guó)家規(guī)定水平（70%）以上，其余3個(gè)豬場(chǎng)的豬圓環(huán)病毒2型抗體陽(yáng)性率均低于70%，造成這3個(gè)豬場(chǎng)抗體水平較低的原因有很多，如豬場(chǎng)飼養(yǎng)環(huán)境、免疫實(shí)施情況都會(huì)影響豬圓環(huán)病毒2型的免疫效果，應(yīng)結(jié)合豬場(chǎng)的實(shí)際生產(chǎn)情況來(lái)調(diào)整免疫程序。相對(duì)于河南等地區(qū)免疫抗體的平均水平而言，本試驗(yàn)的豬場(chǎng)圓環(huán)病毒抗體水平總體水平較高[6]。但是，依然存在大量豬圓環(huán)病毒抗體水平低的豬場(chǎng)，情況不容樂(lè)觀，應(yīng)當(dāng)引起相關(guān)豬場(chǎng)從業(yè)人員的高度重視，并鑒于該病嚴(yán)重的危害性，未達(dá)到國(guó)家規(guī)定水平的豬場(chǎng)應(yīng)該加強(qiáng)控制力度，及時(shí)做好預(yù)防措施，對(duì)不合理的免疫程序進(jìn)行調(diào)整[7]。

不同類別豬圓環(huán)病毒2型免疫抗體檢測(cè)結(jié)果表明，不同類別豬群中豬圓環(huán)病毒2型免疫抗體水平存在差異，后備豬陽(yáng)性率最高，為92.31%；保育豬的抗體水平最低，為26.56%，表明該類別的豬群免疫效果欠佳，需要調(diào)整為更合理的免疫程序。經(jīng)產(chǎn)母豬、后備豬、育肥豬的陽(yáng)性率分別是90.70%、92.31%和88.63%，原因可能是多次免疫的結(jié)果，也可能是野毒感染所致。結(jié)合劉鴿等[8]研究報(bào)道，建議哺乳期仔豬適時(shí)免疫豬圓環(huán)病毒2型疫苗，斷奶后進(jìn)行加強(qiáng)免疫，以確保仔豬進(jìn)入保育階段后可保持較高的豬圓環(huán)病毒2型抗體水平。

表2 不同類別豬群豬圓環(huán)病毒2型免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)于PCV2這類免疫抑制性疾病，目前尚無(wú)特效藥物，規(guī)模化豬場(chǎng)在防控中，只有采取綜合防控措施（如加強(qiáng)野毒感染的檢測(cè)、使用有效的疫苗、疫苗免疫水平的監(jiān)測(cè)等），才能取得良好控制疫病的效果[9]。免疫抗體的監(jiān)測(cè)在調(diào)整完善免疫程序中起著關(guān)鍵作用[10]。建議根據(jù)抗體水平波動(dòng)情況對(duì)免疫接種方案及時(shí)做出正確判斷，并采取有效的措施來(lái)提高疫苗免疫效果，及時(shí)做好疫苗補(bǔ)免與淘汰工作，做到防微杜漸，以確保新疆地區(qū)的生豬養(yǎng)殖事業(yè)長(zhǎng)久穩(wěn)定發(fā)展。