梁涯 衛(wèi)麗 李秋明 周偉青 劉道利 高東華 曾亭亭 陳柯藝

支原體是一類形態(tài)上呈高度多態(tài)性的原核細(xì)胞型微生物，是支原體科和柔膜菌綱（Mollicutes）類的成員［1］。支原體的特點(diǎn)是缺乏細(xì)胞壁，基因組極小，生物合成能力有限［2］。近5～10年以來，支原體感染，尤其是生殖道支原體感染被認(rèn)為是新興的性傳播感染性疾病。臨床上常見的致病支原體種類有解脲脲原體（Ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原體（Mycoplasmahominis，Mh），主要可引起尿道炎、陰道炎、宮頸炎、盆腔炎、絨毛膜羊膜炎和產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎等［3］。

許多因素（如年齡、社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況、月經(jīng)周期、懷孕以及避孕藥的使用等）都會(huì)影響女性生殖道支原體的檢出率［4］。有研究顯示，女性生殖道支原體的總體感染率一直在變化，近年來逐步上升。由于支原體缺乏細(xì)胞壁，對(duì)β-內(nèi)酰胺類藥物（如青霉素）具有天然耐藥性。目前只有兩種抗微生物劑細(xì)胞靶標(biāo)可對(duì)抗生殖道支原體感染，其機(jī)制包括抑制核酸復(fù)制和蛋白質(zhì)合成［5］。臨床上常用藥物有四環(huán)素類、喹諾酮類和大環(huán)內(nèi)酯類。但是隨著臨床抗菌藥物的不規(guī)范使用增多，支原體的耐藥率不斷上升，而且隨著時(shí)間變化，支原體對(duì)抗菌藥物的耐藥模式也會(huì)發(fā)生變化。另外，已有研究證實(shí)Uu 可形成生物膜從而產(chǎn)生耐藥性。因此，研究針對(duì)支原體的抗菌藥物對(duì)于目前支原體的治療具有十分重要的意義。本研究通過分析廣州市同德圍地區(qū)女性生殖道感染患者支原體的分布情況并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，為臨床抗菌藥物的合理使用提供參考，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 樣本來源 收集2018年1月—2019年12月在本院同德圍院區(qū)婦科門診就診的泌尿生殖道感染患者生殖道標(biāo)本736 份，患者年齡19～58歲，留取標(biāo)本前1 周需停用抗菌藥物。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 先用窺陰器擴(kuò)張患者陰道，使用無菌棉簽擦拭宮頸表面黏液，然后使用專用拭子插入宮頸1～2 cm 處，旋轉(zhuǎn)數(shù)圈并停留30 s 后，取出拭子送檢。

1.2.2 試劑盒來源 支原體鑒定及藥敏試劑盒由珠海麗珠試劑股份有限公司提供。

1.2.3 檢測(cè)方法 嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。取出所需數(shù)量的冷凍干燥培養(yǎng)基和低價(jià)稀釋液置于培養(yǎng)瓶中，充分搖勻，培養(yǎng)基完全溶解后液面至標(biāo)簽標(biāo)線處；將使用無菌拭子采集的標(biāo)本插入培養(yǎng)基中，擠壓旋轉(zhuǎn)拭子數(shù)次，使拭子標(biāo)本滲入；充分混勻接種了標(biāo)本的液體培養(yǎng)基，使用加樣器分別加入50 μL接種到試劑條各孔（除陰性對(duì)照）；每孔滴入1 滴石蠟油并加蓋；于35～37 ℃培養(yǎng)箱中孵育培養(yǎng)，分別于24、48h 觀察結(jié)果。

1.2.4 結(jié)果判讀 空白孔不變色，陽性對(duì)照孔由黃色變成紅色判定為陽性；兩者都不變色為陰性。藥敏試驗(yàn)中同一種藥物上下兩孔不變色為敏感；上孔不變色，下孔紅色為中介；上下兩孔紅色為耐藥。

1.2.5 治療方法 ① 西醫(yī)治療：采用一種或多種抗菌藥物治療，臨床上常用的抗菌藥物有四環(huán)素類、喹諾酮類和大環(huán)內(nèi)酯類。② 中醫(yī)治療：從中醫(yī)學(xué)角度來說，感染支原體常因?yàn)榉渴虏粷?，機(jī)體正氣不足，感受濕熱蟲毒邪氣后使氣血瘀阻而發(fā)為脾腎虧虛［6］，主要由脾氣之虛，肝氣之郁，濕氣之浸和熱氣之逼導(dǎo)致。本院針對(duì)支原體感染的病因，采用清熱解毒、健脾祛濕、補(bǔ)腎等方法治療，脾虛患者多給予湯劑完帶湯。

1.3 倫理學(xué) 本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)本院倫理批準(zhǔn)（審批號(hào)：20200702），所有對(duì)患者的檢測(cè)均獲得過患者或家屬的知情同意。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入和分析，計(jì)數(shù)資料以株或百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 736例生殖道感染患者支原體檢測(cè)結(jié)果 共檢出支原體陽性77例（占10.46%），其中Uu 陽性檢出率明顯高于Mh 陽性檢出率及Uu+Mh 混合陽性檢出率，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1。

表1 2018年1月—2019年12月廣州市同德圍地區(qū)736例患者生殖道支原體感染類型

2.2 不同年齡段生殖道支原體感染女性患者感染類型比較 21～40歲年齡段中，單純Uu感染患者所占比例最高〔67.53%（52/77）〕，Uu+Mh 混合感染在31～40歲年齡段所占比例最高（6.49%）。總體陽性率在31～40歲年齡段最高（44.16%）。見表2。

表2 77例生殖道支原體感染女性患者不同年齡段感染類型比較

2.3 藥敏試驗(yàn) 對(duì)77 份支原體陽性樣本進(jìn)行9 種抗菌藥物藥敏試驗(yàn)測(cè)定。其中67 份Uu 陽性樣本對(duì)強(qiáng)力霉素（92.54%）、美滿霉素（95.52%）、交沙霉素（98.51%）敏感率均較高；對(duì)氧氟沙星（26.87%）、左旋氧氟沙星（7.46%）、司帕沙星（11.94%）耐藥率均較高。9 份Uu+Mh 混合感染樣本則對(duì)強(qiáng)力霉素（100%）、美滿霉素（100%）、交沙霉素（100%）全敏感，對(duì)克拉霉素（88.89%）、羅紅霉素（88.89%）、阿奇霉素（88.89%）和氧氟沙星（88.89%）耐藥率較高。見表3～5。

表3 67 份Uu 感染樣本的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

表4 1 份Mh 感染樣本的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

表5 9 份Uu 和Mh 合并感染樣本的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.4 同德圍地區(qū)女性支原體感染患者治療后復(fù)發(fā)情況 采取中西醫(yī)結(jié)合治療后，2018年1月—2019年12月廣州市同德圍地區(qū)77例支原體感染女性患者的陰道局部癥狀均完全消失，宮頸分泌物支原體培養(yǎng)結(jié)果均為陰性，無患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)。

3 討論

近年來，隨著人們生活水平的提高，生殖道支原體感染的發(fā)病率逐年上升，加上抗菌藥物的不規(guī)范使用，導(dǎo)致其治療效果也隨之下降。支原體是一類介于細(xì)菌和病毒之間，能在無活性培養(yǎng)基中繁殖的最小微生物，它也是一類細(xì)胞膜表面寄生物，對(duì)女性泌尿生殖道黏膜上皮細(xì)胞具有特殊的親和力［7］。對(duì)人致病的支原體主要為肺炎支原體、穿通支原體、生殖支原體等［1］。

支原體感染早期癥狀較輕，但發(fā)展到后期可引起尿道和生殖道感染，也容易引起女性不孕。如果發(fā)生在妊娠期，可能會(huì)造成早產(chǎn)、流產(chǎn)［8］。程路平［9］研究表明，孕早期婦女生殖道Uu 和Mh 感染與先兆流產(chǎn)有關(guān)。因此，對(duì)支原體感染的早發(fā)現(xiàn)和及早采取有效治療措施非常重要。

本研究主要分析2018年1月—2019年12月廣州市同德圍地區(qū)736例生殖道感染女性患者的支原體感染率、耐藥性以及預(yù)后情況，結(jié)果顯示，支原體總體陽性檢出率為10.46%，其中單純Uu 感染67例，占陽性總數(shù)的87.01%；單純Mh 感染1例，占陽性總數(shù)的1.30%；Uu+Mh 混合感染9例，占陽性總數(shù)的11.69%。單純Uu 感染所占比例明顯高于單純Mh 感染和Uu+Mh 混合感染。

本研究對(duì)不同年齡段女性泌尿生殖道支原體陽性檢出率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示31～40歲年齡段女性生殖道感染率最高，這可能與已婚婦女性生活有關(guān)。支原體感染與陰道菌群的改變有關(guān)，而已婚婦女的細(xì)菌性陰道病、盆腔炎和宮頸炎等婦科炎癥會(huì)引起陰道菌群改變，從而提高支原體的感染率。

四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類和喹諾酮類是治療泌尿生殖道支原體感染的常用抗菌藥物。本研究顯示，泌尿生殖道支原體的耐藥問題日益嚴(yán)重，尤其對(duì)喹諾酮類抗菌藥物如氧氟沙星、左氧氟沙星和司帕沙星的敏感性均較低。無論是單純Uu 感染還是Uu+Mh 混合感染，對(duì)氧氟沙星、左氧氟沙星和司帕沙星的敏感率都低于35%，可能由于喹諾酮類藥物的廣泛使用引起支原體染色體DNA 促旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ突變，從而誘導(dǎo)了支原體對(duì)喹諾酮類的耐藥性增加［10］，同時(shí)對(duì)強(qiáng)力霉素、美滿霉素、交沙霉素敏感率均較高，都在95%以上。Uu+Mh 混合感染時(shí)，由于存在交叉耐藥，耐藥率更高［11］，對(duì)目前臨床常用的抗菌藥物均存在較高的耐藥率，因此臨床醫(yī)師采用抗菌藥物治療一定要根據(jù)藥敏結(jié)果選擇合適的抗菌藥物，切勿經(jīng)驗(yàn)用藥造成耐藥菌株的擴(kuò)散。本地區(qū)Uu 和Mh 對(duì)藥物的敏感性與郭景玉等［11］的報(bào)告有所區(qū)別，說明不同地區(qū)的泌尿生殖道支原體感染對(duì)抗菌藥物的敏感性有所差異。

目前中西醫(yī)結(jié)合治療支原體感染越來越受到臨床關(guān)注。梅淑芬等［12］早期應(yīng)用大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物及中藥定喘湯聯(lián)合治療兒童難治性支原體肺炎，經(jīng)治療患兒病情好轉(zhuǎn)，出院后隨訪情況良好。本院針對(duì)目前抗菌藥物的耐藥性和不良反應(yīng)增多現(xiàn)象，采用中西醫(yī)結(jié)合治療。中醫(yī)治療是本院的一大特色，從整體觀念出發(fā)，在辨證論治的基礎(chǔ)上，針對(duì)同德圍地區(qū)人群的特定“濕熱”體質(zhì)辨證選藥，配合敏感抗菌藥物，不僅能抑制或殺死病原體，還可扶正祛邪，調(diào)節(jié)全身氣血陰陽平衡［13］。經(jīng)治療后，77例支原體陽性患者無一復(fù)發(fā)，臨床癥狀消失率為100%，除歸功于選擇了合適的抗菌藥物，更是由于醫(yī)師根據(jù)患者體質(zhì)從根本上給予治療。完帶湯藥物組成以白術(shù)、蒼術(shù)、山藥、黨參、陳皮、甘草為主，有健脾化濕、補(bǔ)益脾氣、祛濕止帶、疏肝解郁、肝脾同治的功效。因此，發(fā)揚(yáng)中醫(yī)特色，中西醫(yī)結(jié)合治療可縮短對(duì)泌尿生殖道支原體感染的治療時(shí)間，也大大提高了治療的成功率。

綜上所述，同德圍地區(qū)最常見的女性生殖道支原體感染類型為Uu 感染。Uu 對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥率較高。Uu、Mh 以及兩者合并感染均對(duì)美滿霉素、交沙霉素和克拉霉素有較高的敏感性，上述藥物可作為同德圍地區(qū)治療女性生殖道感染的經(jīng)驗(yàn)用藥，但醫(yī)師仍應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)的結(jié)果選擇合適的抗菌藥物，規(guī)范用藥。另外，馮文棟等［14］研究也表明了中西醫(yī)結(jié)合治療方案療效顯著，能有效改善患者癥狀和體征，在提高機(jī)體免疫力的同時(shí)殺滅支原體。由此可見，中西醫(yī)結(jié)合治療生殖道支原體感染有望成為今后的主要治療方式。

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