廖若宇,孫 悅,劉新保,張春娥

(寧夏回族自治區(qū)糧油產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)中心,寧夏銀川 750001)

不同的物質(zhì)具有不同的顏色,顏色對(duì)于萬(wàn)事萬(wàn)物來(lái)說(shuō)至關(guān)重要,在食品中,顏色也是人們對(duì)食物最直觀的評(píng)價(jià)指標(biāo)之一。食品中著色劑按照其來(lái)源可劃分為天然著色劑和合成著色劑。天然著色劑存在于植物、動(dòng)物和微生物中[1],目前植物性著色劑的提取及研究較為廣泛,在我國(guó)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中約40種左右的天然著色劑被允許用于食品加工[2]。一些天然著色劑因具有高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健功能而受到關(guān)注,但基質(zhì)成分較為復(fù)雜——前期需要對(duì)植物油脂及果膠等大分子雜質(zhì)進(jìn)行脫除處理[3],因而增加了提取難度及提取步驟,同時(shí)由于其不穩(wěn)定性——易受pH、光、熱等[4]影響而發(fā)生褪色、變色,提取過(guò)程中環(huán)境因素和經(jīng)濟(jì)因素的制約,都限制了天然著色劑的應(yīng)用發(fā)展?；谔烊簧氐闹T多不穩(wěn)定性,人們?cè)谥谱魇称窌r(shí)會(huì)人為添加一些食品添加劑——食用合成著色劑,來(lái)保持食物鮮艷的外觀色澤。合成著色劑因合成的顏色更加鮮艷、不易褪色及價(jià)格低廉的特性而被廣泛應(yīng)用。按照化學(xué)結(jié)構(gòu)來(lái)分,人工合成著色劑可分為偶氮類和非偶氮類著色劑。偶氮類著色劑是具有一個(gè)或多個(gè)—N=N—基團(tuán)的芳香族化合物。在食品工業(yè)中,偶氮類著色劑約占普通著色劑市場(chǎng)的65%[5]。食品中常見(jiàn)的偶氮類合成著色劑有檸檬黃、日落黃、新紅、胭脂紅、誘惑紅等。研究者測(cè)定了葡萄酒中檸檬黃、赤蘚紅、亮藍(lán)等7種合成著色劑[6],酸奶中酸性紅、亮藍(lán)、日落黃等10種合成著色劑[7],火鍋中新紅、胭脂紅、莧菜紅、誘惑紅、赤蘚紅等16種合成著色劑[8]等。食品中常見(jiàn)合成著色劑信息見(jiàn)表1。

表1 食品中常見(jiàn)著色劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)及屬性

續(xù)表

1 食品中合成著色劑的提取方式

目前食品加工中應(yīng)用最為廣泛的當(dāng)屬合成著色劑,而合成著色劑又多為偶氮類。在對(duì)不同類別的著色劑測(cè)定前應(yīng)先選取合適的預(yù)處理方式,從而使食品基質(zhì)中的著色劑充分提取并去除其他干擾物質(zhì),保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。在食品類別中,因天然著色劑和合成著色劑存在溶解性差異,無(wú)論是水溶性還是脂溶性著色劑,均可使用有機(jī)試劑進(jìn)行提取,如甲醇、石油醚、丙酮等,但水溶性著色劑在提取時(shí)還會(huì)輔助使用水、氨水、草酸、鹽酸等,以便著色劑被充分提取[12-14]。GB 5009.35-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測(cè)定》[15]中規(guī)定前處理方法為聚酰胺吸附法及液-液分配法,但這兩種方法操作繁瑣、使用不便且費(fèi)時(shí)。目前有關(guān)合成著色劑的提取方式有很多研究,如表2。

表2 食品中合成著色劑不同提取方式的比較

1.1 膜過(guò)濾

膜過(guò)濾是一種精密的分離技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)分子級(jí)過(guò)濾。在壓力差存在的前提下,利用膜孔隙的選擇透過(guò)性進(jìn)行兩相分離,使溶劑、無(wú)機(jī)離子等小分子透過(guò)膜,而截留住大分子的一種提取方式[16]。史曉博[17]對(duì)番茄皮色素和葡萄皮色素提取濃縮,研究結(jié)果表明:在壓力為0.60 MPa,料液溫度為40 ℃,流速為53.50 m/s時(shí),500 Da的RC膜,適用于番茄皮色素提取液濃縮,并且此條件下濃縮最佳倍數(shù)為30;而0.80 MPa的壓力,料液溫度50 ℃,流速71.34 m/s條件下300 Da的PTFE膜,適合于葡萄皮色素的提取,該條件下濃縮最佳倍數(shù)為25。Gosetti等[18]將待測(cè)市面上購(gòu)買的開胃酒樣品過(guò)0.2 μm聚丙烯膜后,利用高效液相色譜-二極管陣列-串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)其進(jìn)行測(cè)定,最終得出的樣品經(jīng)太陽(yáng)光照射后存在一定程度的脫色效應(yīng),這可能涉及到葡萄糖-果糖的參與,并且在脫色樣品中檢測(cè)出的降解產(chǎn)物可能具有毒性,由此推斷出市面上購(gòu)買的開胃酒存在一些含有萘基結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)。

1.2 固相萃取(SPE)

固相萃取于20世紀(jì)70年代中期引入,是基于液-液萃取和液-固萃取而延伸出的一種新型萃取技術(shù)。它是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的色譜分離原理,使液體樣品通過(guò)吸附劑吸附而保留分析物,再用合適的溶劑清洗去除雜質(zhì),最后用洗脫劑洗脫分析物的方法,通常包括活化、上樣、淋洗和收集四個(gè)步驟。該方法因保證回收率的同時(shí)縮短了提取時(shí)間,避免發(fā)生乳化現(xiàn)象,減少有機(jī)試劑的用量,對(duì)樣品的凈化、富集有著重要作用,適合實(shí)驗(yàn)室大批量前處理工作而被廣泛應(yīng)用于各項(xiàng)研究[19-21]。通常情況下選用甲醇、甲酸、乙腈等有機(jī)溶劑作為萃取溶劑提取食品中的各種著色劑。馬桂娟等[22]研究通過(guò)利用PWAX-SPE固相萃取小柱,在V無(wú)水乙醇∶V氨水∶V水(7∶2∶1)的組合條件下,7種合成著色劑的回收率較高。李素媛等[23]研究通過(guò)利用PWAX混合型弱陰離子交換柱測(cè)定碳酸飲料、果酒、肉制品、巧克力等食品中檸檬黃、新紅、莧菜紅等9種合成著色劑,依次用甲醇、水活化小柱后,再用6 mL水(pH=4)、6 mL甲醇-甲酸、6 mL水(pH=6)淋洗,經(jīng)液相測(cè)定各著色劑標(biāo)準(zhǔn)液濃度與峰面積相關(guān)系數(shù)均在0.999以上,具有良好的線性關(guān)系。趙俊等[24]選用聚酰胺SPE凈化小柱,經(jīng)甲醇和水依次活化后,選取氨化甲醇洗脫,收集樣品過(guò)0.45 μm濾膜后待測(cè),最終得到檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅及亮藍(lán)6種合成著色劑加標(biāo)回收范圍在86.2%～97.5%之間。

1.3 液-液萃取(LLE)

液-液萃取法又稱溶劑萃取法或抽提,是在液體混合物中加入與其不相混溶(或稍相混溶)的特定溶劑而達(dá)到分離或提取目的的分離方法[25]。提取食品中著色劑的常用試劑有水、乙醇、甲醇、異丙醇、氨乙醇、氨水、環(huán)己烷和四正丁基銨磷酸鹽等[10]。郭京波等[26]研究通過(guò)利用[C8MIM][BF4]作為萃取劑,離子液體為350 μL,pH=6.0的醋酸-醋酸鈉作為緩沖液,保溫10 min,離心5 min后,對(duì)檸檬黃和亮藍(lán)具有較好的加標(biāo)回收。Lidia等[27]首次利用乙醇和水加壓液液萃取法進(jìn)行前處理,搭配高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜、二極管陣列檢測(cè)器、APCI離子源,從衣藻中提取類胡蘿卜素和葉綠素并進(jìn)行測(cè)定,得到在不同提取條件下衣藻提取物均具有抗氧化活性,并且推斷了從邏輯關(guān)系上看,不同活性取決于相關(guān)色素的性質(zhì)。汪芳芳等[28]利用5%的氨水甲醇混合溶液作為萃取劑,再用冰乙酸將濾液調(diào)至中性,旋蒸濃縮后用甲醇/水(1∶1,V/V)溶解殘?jiān)⒍ㄈ?上高效液相色譜測(cè)定摻假玉米饅頭中的檸檬黃含量,測(cè)得回收率在93%～110%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于9.1%。

1.4 其他提取方式

盡管固相萃取和液-液萃取在實(shí)際操作中已達(dá)到提取目的,但有時(shí)還會(huì)用到微波輔助提取(MAE)、超聲輔助提取(UAE)及熱輔助提取(HAE)等作為綠色輔助提取方式,來(lái)縮短合成著色劑的提取進(jìn)程,以達(dá)到快速、高效的目的。周良芹等[29]通過(guò)超純水和甲醇溶液溶解樣品,超聲提取20 min后離心,分離出上層清液過(guò)膜后待測(cè)。Hanwen等[30]研究通過(guò)利用甲醇和乙酸的混合溶液(V甲醇∶V乙酸=95∶5)作為提取劑,微波輔助提取肉中21種合成色素的方法。Pinela等[31]研究了一種在密閉容器水浴加熱輔助提取芙蓉花粉中天然食用花青素的方法,取0.6 g樣品與20 mL乙醇與水混合溶劑,在一定溫度和時(shí)間內(nèi)進(jìn)行提取,提取后將混合物在設(shè)定的轉(zhuǎn)速下離心,最終上清液過(guò)濾紙備用。

無(wú)論天然著色劑還是合成著色劑在前處理過(guò)程中都會(huì)用到有機(jī)試劑,具體依據(jù)著色劑溶解度性質(zhì)而定,但天然著色劑往往還需要先使用乙醇或酸堿溶液破壞植物結(jié)構(gòu),并且在提取過(guò)程中需要嚴(yán)格控制其pH、溫度等條件,因此多用膜過(guò)濾輔助超聲波方式對(duì)植物色素進(jìn)行提取。相反,合成著色劑穩(wěn)定性好,多數(shù)易溶于有機(jī)試劑,故提取方式多為固相萃取及液-液萃取等方式。

2 食品中著色劑的常用測(cè)定方法

基于食品樣品的多樣性與復(fù)雜性,現(xiàn)用于測(cè)定食品中合成著色劑的方法也呈多樣性(表3)。

表3 食品中合成著色劑不同測(cè)定方法的比較

2.1 色譜法

2.1.1 薄層色譜法(TLC) 薄層色譜是色譜法的一種基本類型,利用兩種物質(zhì)間的吸附力差異,使被測(cè)物質(zhì)與固定相之間發(fā)生吸附與解吸附作用,從而達(dá)到樣品分離效果并形成系列斑點(diǎn),最終參與定性和定量分析的分析方法[35]。其特點(diǎn)是操作成本低廉,操作方便,樣品用量少,但對(duì)操作者技術(shù)要求較高,并且檢測(cè)準(zhǔn)確度低[36]。Florin等[37]研究了一種可結(jié)合掃描色譜圖像處理的高效薄層色譜法,將帶有3-氨基丙基官能團(tuán)的多孔硅膠固定在基質(zhì)上,按比例將流動(dòng)相異丙醇、乙醚和氨混勻,最終通過(guò)軟件進(jìn)行定量評(píng)估。張倩茹等[12]通過(guò)自制薄層色譜,嘗試以石油醚、乙酸乙酯、正己烷及丙酮為展開劑,發(fā)現(xiàn)在110 ℃、30 min時(shí),8∶2的石油醚-丙酮作為展開劑,或者6∶4的石油醚-乙酸乙酯、正己烷-丙酮和正己烷-乙酸乙酯作為展開劑時(shí),分離菠菜中的天然色素效果較好。Muhammad等[38]研究發(fā)現(xiàn)在植物色譜分析方面,像PVC/PVA這類共混聚合物薄膜制作的薄層色譜板非常有效,當(dāng)PVA含量高達(dá)8%時(shí),以乙醚和丙酮混合物作為展開劑分離植物色素效果更好。

2.1.2 高效液相色譜法(HPLC) 高效液相色譜法是目前為止應(yīng)用最為普遍的一種方法,因?yàn)槠潇`敏度高、線性范圍廣、重現(xiàn)性好且實(shí)驗(yàn)過(guò)程中引入的不確定度小而被廣泛使用[39-41]。在食品樣品著色劑檢測(cè)中多與二極管陣列檢測(cè)器、紫外檢測(cè)器配合來(lái)進(jìn)行測(cè)定[42]。高效液相色譜法是一種利用壓力(高壓泵)將樣品送入填充過(guò)固定相的色譜柱中,使待測(cè)組分經(jīng)過(guò)一系列分配、吸附或離子交換等過(guò)程而實(shí)現(xiàn)分離,最終經(jīng)檢測(cè)器對(duì)分離的物質(zhì)采樣進(jìn)行分析的分離技術(shù)[43-45]。李丹梅[46]利用Ecllpse Plus C18色譜柱分離,二極管陣列檢測(cè)器,柱溫30 ℃,254 nm波長(zhǎng),5.5 min變更波長(zhǎng)為628 nm,柱流量1.00 mL/min,甲醇及0.02 mol/L乙酸銨溶液的流動(dòng)相條件下,進(jìn)樣10 uL,能在7 min分離完成且得到分離度較好的5種著色劑。呂志勇等[47]采用C18色譜柱分離,紫外檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm,柱溫30 ℃,流速0.8 mL/min,進(jìn)樣2 uL,以乙酸銨溶液(0.02 mol/L)和甲醇作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,19 min使發(fā)酵乳中的8種著色劑得到分離。Harp等[48]研究了通過(guò)使用液相色譜法配合光電二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定44種食品中的七種合法著色劑,該方法測(cè)定了不同種食品中著色劑的線性、精密度、各種基質(zhì)的回收率、檢測(cè)限、定量限和每種著色劑的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等,發(fā)現(xiàn)食品著色劑總添加含量從1.9到1221 mg/kg不等,并以此作為兒童飲食評(píng)估。

2.1.3 反向高效液相色譜法(RP-HPLC) 反向高效液相色譜是由極性流動(dòng)相和弱極性固定相所組成的液相色譜體系,它正好與正相色譜(由極性固定相和弱極性流動(dòng)相所組成的液相色譜體系)相反,多用于測(cè)定非極性、極性或離子型化合物[49]。Mathiyalagan等[50]研究了利用反向高效液相色譜儀配合紫外可見(jiàn)檢測(cè)器測(cè)定食品基質(zhì)中的半合成葉綠素(Cu-Chl)和合成食品著色劑,在400 nm處測(cè)量,提取得到不同食品基質(zhì)中Cu-Chl和合成著色劑的回收率為90%～97%,RSD為1%～9%。鄒建宏等[51]研究建立了一種反向高效液相色譜儀配合紫外檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定進(jìn)口果汁中8種添加劑含量的方法,在230 nm波長(zhǎng)處,用HypersiI BDS C18色譜柱,甲醇和乙酸銨混合溶液作為流動(dòng)相,梯度洗脫,流速為1.0 mL/min,柱溫40 ℃下測(cè)定,在10 min內(nèi)8種組分均得到良好的分離,此方法平均回收率可達(dá)到90%～114%,RSD為1.3%～8.0%。Minioti等[52]研究了利用反向高效液相色譜儀配合二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定水溶性食品中的13種合成食品著色劑,在350～800 nm之間利用梯度洗脫,在29 min內(nèi)成功分離所有化合物,該方法適用于各種只需簡(jiǎn)單預(yù)處理(稀釋或加水)的水溶性色素食品的測(cè)定。

2.1.4 液相色譜-質(zhì)譜法 液相色譜-質(zhì)譜法定性能力較強(qiáng),在多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)下,通過(guò)兩級(jí)離子的選擇而排除大量干擾離子,降低了質(zhì)譜的化學(xué)背景,使相應(yīng)的目標(biāo)檢測(cè)物信噪比提高,從而實(shí)現(xiàn)高靈敏度及準(zhǔn)確性的檢測(cè)[53]。液質(zhì)聯(lián)用法前處理較為簡(jiǎn)單,不用離子對(duì)試劑做流動(dòng)相,無(wú)需衍生化,但單檢測(cè)少數(shù)幾種合成著色劑時(shí),檢測(cè)成本較高[54]。Arrizabalaga-Larraaga等[55]利用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法,對(duì)比電噴霧電離(ESI)、大氣壓化學(xué)電離(APCI)和大氣壓光電離(APPI)三種離子源對(duì)橄欖油中類胡蘿卜素和葉綠素及其相關(guān)化合物進(jìn)行測(cè)定和比較,最終發(fā)現(xiàn)在APCI和APPI下,以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式進(jìn)行測(cè)定,得到結(jié)果具有低檢測(cè)限(0.004～0.9 mg/L)、低基質(zhì)效應(yīng)(<25%)和高提取效率(62%～95%)。曾凱等[56]利用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法,在多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)(MRM)模式下,對(duì)紅酒、葵花籽油等不同基質(zhì)樣品中堿性橙、羅丹明、蘇丹紅等六種非食用性色素進(jìn)行測(cè)定,得到方法檢出限為1.0～20.0 μg/kg,回收率在72.4%～114.7%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.4%～11.3%。

2.2 分光光度法

分光光度法是在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi),依據(jù)溶液物質(zhì)的離子及分子對(duì)入射光吸收度的不同,對(duì)被測(cè)物進(jìn)行定性及定量測(cè)定的方法。由于儀器成本低廉,操作簡(jiǎn)單而成為常見(jiàn)分析技術(shù)之一,多用于食品添加劑檢測(cè)[57-58]。郭群等[59]研究發(fā)現(xiàn)日落黃和檸檬黃的最大吸收波長(zhǎng)分別為482和426 nm,建立濃度與吸光度的線性擬合預(yù)測(cè)模型,得到相關(guān)系數(shù)分別為0.9948和0.9973,說(shuō)明該模型能較好的預(yù)測(cè)出兩者之間的關(guān)系。吳文君等[60]利用雙波長(zhǎng)比值法測(cè)得誘惑紅、日落黃和檸檬黃分別在0.8～30、0.7～33和0.6～30 mg/L的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系較好。Adil[61]應(yīng)用超聲輔助濁點(diǎn)萃取技術(shù),以聚氧乙烯單月桂酸酯為萃取劑,優(yōu)化溶液pH、金屬量、溫度、超聲效果、溶劑類型及溶劑濃度等變量后,用分光光度法對(duì)食品中胭脂紅進(jìn)行測(cè)定,得到兩種不同水平下加標(biāo)回收率為94.8%～104.7%,證明了分光光度法測(cè)定合成著色劑準(zhǔn)確性和精確性均較好。

2.3 毛細(xì)管電泳(CE)

在通過(guò)分離技術(shù)來(lái)檢測(cè)食品中合成著色劑的方法中,毛細(xì)管電泳(CE)是一種20世紀(jì)80年代興起的液相微分離技術(shù)。在毛細(xì)管通道里,因樣品中各組分電泳遷移率及分配系數(shù)存在差異,當(dāng)直流高壓電場(chǎng)作用時(shí),被測(cè)組分得以分離。該方法分離效率高,消耗試劑少,分離速度快,分析樣品范圍廣泛,也被應(yīng)用于食品中著色劑的檢測(cè),但其靈敏度和選擇性低以及基質(zhì)干擾作用限制了該方法在分析中的進(jìn)一步使用[62-63]。Richard等[64]研究了一種毛細(xì)管電泳法,通過(guò)采用膠束電動(dòng)色譜模式,15 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)了軟飲料中人造甜味劑、防腐劑及色素的分離,利用二極管陣列檢測(cè)器監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品譜圖,從而實(shí)現(xiàn)樣品組分匹配。Prado等[65]開發(fā)了一種在酒精飲料中使用毛細(xì)管電泳分析合成著色劑的方法,在35 ℃下使用73 cm的熔融石英毛細(xì)管,10 mmol/L磷酸鹽緩沖液和10 mmol/L十二烷基硫酸鈉,pH11,25 kV電壓下進(jìn)行測(cè)定。在兩個(gè)濃度水平下,合成著色劑平均回收率分別為92.6%和104.0%,重復(fù)性較好,證明了方法準(zhǔn)確性。

2.4 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定是一種應(yīng)用抗原抗體特異性結(jié)合原理而分析和測(cè)定的技術(shù),它要求被測(cè)物必須能夠作為抗原或者抗體存在。該方法通常被用于食品行業(yè)中各種添加劑的檢測(cè),以監(jiān)測(cè)過(guò)敏性成分對(duì)食品的污染。其主要特點(diǎn)是應(yīng)用范圍廣、特異性強(qiáng)、高靈敏度、低檢測(cè)限和低成本[66-67]。Xing等[68]開發(fā)了一種基于多克隆抗體的間接酶聯(lián)競(jìng)爭(zhēng)免疫吸附方法,通過(guò)合成的日落黃半抗原與載體蛋白偶聯(lián),以合成免疫原和包被抗原,將具有特異性的抗原抗體結(jié)合,最終測(cè)得食品和血清樣品的回收率為94%～106%,證實(shí)了該方法的可操作性。

2.5 電化學(xué)傳感器

食品添加劑、生物分子的電化學(xué)行為以及電化學(xué)測(cè)量系統(tǒng)的發(fā)展促使在食品、農(nóng)業(yè)及環(huán)境監(jiān)測(cè)中均可以利用化學(xué)傳感器來(lái)分析特定的化合物。電化學(xué)傳感器因其高靈敏度、高選擇性、響應(yīng)時(shí)間短、快速簡(jiǎn)單、易于小型化而在蛋白質(zhì)組學(xué)、生物化學(xué)等多方面應(yīng)用[69-72]。Meiling等[73]采用一種多孔石墨烯材料——石墨烯納米網(wǎng)作為電極修飾材料,通過(guò)改進(jìn)使莧菜紅分子吸附到了工作電極的表面,有利于電子的快速擴(kuò)散。電化學(xué)信號(hào)的增強(qiáng)表現(xiàn)出了更寬的線性響應(yīng)。Wensheng等[74]通過(guò)在N-甲基-2-吡咯烷酮中超聲剝落石墨粉制備出一種石墨烯納米片(GS),分別研究了pH、GS修飾量、累積電勢(shì)和時(shí)間對(duì)莧菜紅氧化峰電流的影響。線性范圍2.5～15 nmol/L,檢測(cè)限0.75 nmol/L,表明方法具有可靠性。

2.6 表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)

拉曼光譜是一種散射光譜,可以反映分子的特征結(jié)構(gòu)。表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)是一種將待測(cè)物質(zhì)分子置于粗糙金屬表面,通過(guò)等離子體共振的方式,從而增強(qiáng)拉曼光譜信號(hào)強(qiáng)度的現(xiàn)象。因其操作過(guò)程簡(jiǎn)單快捷,不需要大型的儀器參與,被廣泛應(yīng)用于材料分析,環(huán)境監(jiān)測(cè),醫(yī)藥管理,農(nóng)藥殘留及食品等領(lǐng)域[75-78]。王樂(lè)等[79]采用25 mV/s掃速制備的多孔銀絲作為表面增強(qiáng)拉曼基底,對(duì)新紅進(jìn)行定性及定量分析,結(jié)果表明:測(cè)試時(shí)間2 min,回收率為87.8%～93.8%,RSD小于6.5%,該方法可應(yīng)用于食品中新紅的快速檢測(cè)。Xie等[80]利用SERS對(duì)黃魚、紅辣椒、紅酒等食品樣品進(jìn)行檢測(cè)篩選,試驗(yàn)結(jié)果與高效液相色譜法進(jìn)行比對(duì),驗(yàn)證了核殼納米粒子能夠檢測(cè)食品中的色素,并且其在快速檢測(cè)方面表現(xiàn)出了良好的性能。Ai等[81]通過(guò)分析了4種不同食用著色劑的SERS光譜,鑒定特征譜帶,獲得了具有高SERS活性底物的花狀銀納米結(jié)構(gòu),并利用主成分分析改進(jìn)其檢測(cè)方法。

2.7 示波極譜法

食品工業(yè)中合成著色劑的示波極譜法測(cè)定,是一種高靈敏度的單掃描極譜法。同薄層色譜法相比較,該檢測(cè)法操作簡(jiǎn)單,速度快且成本低廉[82-84]。宋新等[85]利用示波極譜法對(duì)莧菜紅、胭脂紅、檸檬黃等5種合成著色劑的最低檢出限、檢出濃度、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍及加標(biāo)回收率等多項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,同時(shí)將檢測(cè)結(jié)果與高效液相色譜法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比對(duì),發(fā)現(xiàn)示波極譜法和HPLC測(cè)定結(jié)果的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。劉紅等[86]采用單掃描示波極譜法對(duì)飲料中的3種混合著色劑(檸檬黃、莧菜紅和胭脂紅)進(jìn)行測(cè)定,選取NaH2PO4-Na2HPO4作為底液,pH=8.10時(shí),得到峰電流Ip與三種著色劑濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,該方法測(cè)得回收率為98.5%～107.7%。

雖然合成著色劑的測(cè)定方法有很多種,但是高效液相色譜法因其靈敏度高、分離度好而被廣泛應(yīng)用。既可以檢測(cè)天然著色劑,也可以檢測(cè)合成著色劑。天然著色劑由于其見(jiàn)光易分解特性,不適宜采用分光光度法測(cè)定,推薦使用成本較低的薄層色譜法進(jìn)行測(cè)定。

3 總結(jié)

任何食品樣品在分析測(cè)試前,都需要經(jīng)過(guò)前處理排除干擾物。目前,食品合成著色劑的前處理方式主要有固相萃取法、液-液萃取法、濁點(diǎn)萃取、超聲輔助溶劑提取和其他一些提取方法。食品合成著色劑的檢測(cè)方法主要包括毛細(xì)管電泳法、分光光度法、色譜法、MIPs和ELISA試劑盒法,最近,基于電化學(xué)法改進(jìn)的傳感器由于其操作簡(jiǎn)單、速度快、靈敏度高、選擇性好、成本低及重現(xiàn)性好的特性,在食品安全分析領(lǐng)域引起了廣泛關(guān)注。食品樣品基質(zhì)較為復(fù)雜,合成著色劑又多為水溶性色素,快速、簡(jiǎn)單、高效及環(huán)境友好的提取方法將越來(lái)越受到推崇。目前QuEChERS法多用于農(nóng)藥及獸藥殘留的前處理,而濁點(diǎn)萃取技術(shù)在食品、藥業(yè)、日用品、土壤、水質(zhì)和環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,如果能將這些新興技術(shù)應(yīng)用于著色劑的提取,不僅減少了對(duì)人體有害的有機(jī)溶劑的使用,也避免了揮發(fā)性有機(jī)溶劑對(duì)環(huán)境的影響,同時(shí)降低前處理成本。本文綜述食品合成著色劑現(xiàn)有的提取方式和測(cè)定方法,建議在開發(fā)食品合成著色劑新型檢測(cè)方法時(shí),應(yīng)考慮新方法的應(yīng)用前景和推廣成本。