劉芮吟，張睿，吳夢鴿，孟艷飛，吳華杰，費繼敏

650118昆明，昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院/云南省腫瘤醫(yī)院 頭頸外二科(劉芮吟、吳夢鴿、孟艷飛、吳華杰、費繼敏)，頭頸外一科(張睿)

甲狀腺癌作為人體最常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)實體惡性腫瘤，近年來在全球范圍內(nèi)的發(fā)病率呈逐年攀升態(tài)勢[1-2]。甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid cancer,PTC)在甲狀腺癌中最為常見，其惡性程度較低、病程發(fā)展緩慢、預(yù)后相對較好，但早期易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，尤以中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移常見[3]。隨著分子生物標記物的不斷發(fā)展完善，炎性微環(huán)境在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的影響得到醫(yī)學(xué)界普遍共識，許多研究表明中性粒細胞-淋巴細胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio，NLR) 、系統(tǒng)性免疫性炎癥指數(shù)(systemic immune-inflammation index,SII)和血小板-淋巴細胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio，PLR)[4-11]等炎癥反應(yīng)指標是影響多種惡性腫瘤的獨立預(yù)后因素，并且NLR還可作為實體惡性腫瘤的輔助鑒別手段[12-13]，在甲狀腺腫瘤鑒別中有一定優(yōu)勢。SII計算方式的特殊性使其更為科學(xué)和穩(wěn)定，有較好的研究前景，但其對腫瘤良惡性的鑒別作用卻鮮有提及。本研究通過探討NLR聯(lián)合SII在甲狀腺結(jié)節(jié)中的診斷價值及其與病理特征的關(guān)聯(lián)性，旨在將簡單易得的炎性指標科學(xué)地應(yīng)用于臨床實踐，為甲狀腺結(jié)節(jié)良、惡性鑒別診斷及風(fēng)險評估提供一定的價值參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性收集2018年5月至2018年7月就診于云南省腫瘤醫(yī)院頭頸外科的甲狀腺結(jié)節(jié)患者的臨床病理資料及健康體檢的臨床體檢資料。惡性組納入標準：1)術(shù)后病理診斷明確證實為PTC；2)就診前未行甲狀腺手術(shù)、放化療等相關(guān)治療；3)病史記錄完整，檢查結(jié)果完善；4)無合并其它惡性腫瘤的病史。良性組納入標準：1)術(shù)后病理診斷明確證實是結(jié)節(jié)性甲狀腺腫；2)就診前未行甲狀腺手術(shù)、放化療等相關(guān)治療；3)病史記錄完整，檢查結(jié)果完善；4)未合并其它惡性腫瘤病史。正常組納入標準：1)體檢前無甲狀腺疾病病史；2)未合并其它惡性腫瘤病史；3)檢查結(jié)果完善。排除標準：1)采血前有感染、輸血史、心肌梗死、高血壓、糖尿病、血液系統(tǒng)疾病等可造成血常規(guī)異常者；2)近期使用抗凝藥物、激素類、白介素等藥物影響血常規(guī)結(jié)果者。所收集的臨床資料均已通過了云南省腫瘤醫(yī)院倫理委員會的醫(yī)學(xué)倫理審查，已獲得所有研究對象的知情同意。

1.2 方法

詳細記錄患者的年齡、性別、腫瘤位置及其與甲狀腺被膜是否靠近、腫瘤大小等臨床病理參數(shù)，收集所有甲狀腺結(jié)節(jié)患者手術(shù)前1周內(nèi)及我院健康體查正常人的血常規(guī)報告單，包括白細胞計數(shù)、中性粒細胞計數(shù)、淋巴細胞計數(shù)和單核細胞計數(shù)絕對值等，并計算得出NLR(NLR=中性粒細胞計數(shù)絕對值/淋巴細胞計數(shù)絕對值)、SII(SII=血小板計數(shù)絕對值×中性粒細胞計數(shù)絕對值/淋巴細胞計數(shù)絕對值)、PLR(PLR=血小板計數(shù)絕對值/淋巴細胞計數(shù)絕對值)和淋巴細胞-單核細胞比值(lymphocyte-to-monocyte ratio,LMR)(LMR=淋巴細胞計數(shù)絕對值/單核細胞計數(shù)絕對值)。利用SPSS 22.0構(gòu)建基于兩個臨床指標NLR和SII的Logistic回歸模型，并計算兩指標聯(lián)合預(yù)測概率，以預(yù)測概率畫受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve，ROC)曲線，并計算曲線下面積(area under the curve,AUC)并得出判別甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的最佳cut-off 值(約登指數(shù)最大時)。利用cut-off值將良、惡性甲狀腺結(jié)節(jié)患者分為兩組，將其與甲狀腺結(jié)節(jié)臨床病理指標進行統(tǒng)計學(xué)分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 入組患者資料

本研究共收集到323例甲狀腺結(jié)節(jié)患者及259例健康體查者的臨床資料。由于既往未檢索到有關(guān)NLR聯(lián)合SII診斷分析文獻，為達嚴謹，初期收集了各69例良、惡性結(jié)節(jié)患者臨床資料進行預(yù)實驗，得AUC1=0.69，設(shè)AUC0=0.50，α=0.05，β=0.10，R=1。利用PASS 11軟件計算得到至少需要納入45例病例及對照。按照納入與排除標準，同時為避免樣本量差異對研究結(jié)果造成干擾，最后有122例PTC患者(惡性組)、122例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者(良性組)、122例健康體查結(jié)果正常者(正常組)納入此次研究。

2.2 正常組與惡性組外周血相關(guān)指標比較

正常組與惡性組，在性別、白細胞、淋巴細胞、中性粒細胞計數(shù)絕對值、血小板、NLR、SII、PLR、LMR、甲狀腺球蛋白抗體(thyroglobulin antibodies,Tg-Ab)、甲狀腺過氧化物酶抗體(antithyroid peroxidase antibody,TPO-Ab)、游離三碘甲狀腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)指標的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)，而在年齡、單核細胞、紅細胞計數(shù)絕對值、促甲狀腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、甲狀腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)、游離甲狀腺激素(free thyroxine,FT4)指標的差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)(表1)。

表1 正常組與惡性組患者外周血指標差異性分析

2.3 良惡性結(jié)節(jié)分組與臨床病理指標比較：

良性組與惡性組在年齡、白細胞、淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞計數(shù)絕對值、NLR、SII、PLR、LMR、Tg、Tg-Ab、原發(fā)腫瘤大小及靠近甲狀腺被膜差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05),在性別、紅細胞、血小板計數(shù)絕對值、TSH、TPO-Ab、FT3、FT4、腫瘤位置方面的差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)(表2)。

表2 甲狀腺良、惡性組患者臨床病理特征差異性分析

2.4 NLR+SII對鑒別甲狀腺良惡性效果的臨床價值分析

利用SPSS構(gòu)建基于兩個臨床指標NLR和SII的Logistic回歸模型，計算兩指標聯(lián)合預(yù)測概率，發(fā)現(xiàn)NLR聯(lián)合SII預(yù)測曲線的β值為-3.965，SE值為0.632，EXP(β)值為0.019，P<0.001。分別繪制NLR、SII、PLR、LMR、NLR+SII鑒別診斷甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的ROC曲線(圖1)，從圖中可以得到本研究中NLR+SII曲線下面積>NLR曲線下面積>SII曲線下面積>PLR曲線下面積>LMR曲線下面積。NLR+SII ROC曲線下面積為0.792,〔95% CI (0.736,0.848)〕(表3),計算得NLR+SII鑒別診斷良惡性結(jié)節(jié)最佳截斷值為0.375，其靈敏度為89.34%，特異度為58.20%，陽性預(yù)測值68.1%，陰性預(yù)測值84.5%，陽性似然比2.14，陰性似然比0.18(表4)。

圖1 NLR、SII、PLR、LMR、NLR+SII診斷甲狀腺良、惡性結(jié)節(jié)的ROC曲線

表3 NLR、SII、PLR、LMR、NLR+SII診斷曲線AUC值

表4 不同 NLR+SII cut-off值鑒別診斷甲狀腺結(jié)節(jié)的效度

2.5 不同NLR+SII分組與甲狀腺結(jié)節(jié)患者的臨床病理特征關(guān)系

將244例甲狀腺結(jié)節(jié)患者通過最佳NLR截斷值分為術(shù)前高NLR+SII組(NLR+SII>0.375)和術(shù)前低NLR+SII組(NLR≤ 0.375)。術(shù)前高NLR+SII組與術(shù)前低NLR+SII組之間良性率(或惡性率)、年齡分組、腫瘤大小分組、是否與甲狀腺被膜靠近及Tg-Ab的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05),而與性別、腫瘤位置、是否合并橋本氏甲狀腺炎、TPO-Ab之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)(表5)。術(shù)前高NLR+SII組患者的惡性組患者、腫瘤大小在小于2 cm區(qū)間內(nèi)占比較多，TG-Ab值明顯更高，年齡偏小。

表5 NLR+SII分組與甲狀腺結(jié)節(jié)患者病理特征差異性分析

3 討 論

甲狀腺癌是全球最常見的實體內(nèi)分泌惡性腫瘤，以乳頭狀癌的病理亞型較為多見。有研究表明，部分結(jié)節(jié)性甲狀腺腫具有向甲狀腺癌發(fā)展的惡性潛能[14]，但因其早期發(fā)展隱匿并且疾病的相關(guān)檢查存在局限，患者常常在早期未能及時得到針對治療，從而增加了后期淋巴結(jié)遠處轉(zhuǎn)移風(fēng)險。為早期及時對結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者進行相對準確的風(fēng)險評估及制定個體化的隨訪方案，實現(xiàn)疾病的早診早治，本文就NLR聯(lián)合SII指標在甲狀腺結(jié)節(jié)中的良惡性鑒別效果及與其臨床病理特征關(guān)系進行探討。

3.1 外周血指標在各組間的差異

腫瘤炎性反應(yīng)微環(huán)境的組成成分與腫瘤細胞之間存在相互刺激作用，在基因?qū)用嫔?內(nèi)途徑)，不同種類的致癌基因的激活干擾了細胞周期的正常調(diào)節(jié)，進一步激活了DNA損傷反應(yīng)，導(dǎo)致炎性相關(guān)程序的表達，指導(dǎo)炎性環(huán)境的構(gòu)建，反過來這樣持續(xù)的炎性環(huán)境又增加了DNA雙鏈斷裂和基因組不穩(wěn)定；在細胞層面上(外途徑)，一方面腫瘤細胞通過自分泌產(chǎn)生大量蛋白水解酶和生長因子影響細胞外基質(zhì)組成，或通過旁分泌產(chǎn)生細胞因子促進血管新生，促進炎性反應(yīng)進程，一方面腫瘤炎性反應(yīng)微環(huán)境內(nèi)的炎性代謝環(huán)境可以協(xié)助腫瘤細胞增殖、遷移、黏附[15-16]。如此這般，腫瘤細胞在慢性炎癥反應(yīng)過程中長期受到激惹，陷入惡性死循環(huán)。腫瘤炎性微環(huán)境伴隨腫瘤發(fā)生發(fā)展的各個階段，外周血指標常能直觀監(jiān)測機體的免疫功能狀態(tài)。

本研究中，惡性組與良性組及正常組的外周血指標相比，惡性組NLR、PLR、SII均值顯著高于良性組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.001)，與正常組的對比差異更佐證了此結(jié)果。這與既往研究[13]結(jié)果一致。究其原因，主要歸結(jié)于中性粒細胞、血小板的升高和淋巴細胞的減低。中性粒細胞在白細胞中占比最高，是應(yīng)對內(nèi)外部刺激，免疫系統(tǒng)打響的第一槍。在腫瘤發(fā)展過程中，中性粒細胞表現(xiàn)出既促腫瘤又抗腫瘤的特性，其在宿主炎癥進程中扮演何種角色，主要取決于炎性微環(huán)境中細胞因子的刺激作用的強弱及持續(xù)時間。眾所周知，在腫瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移階段，中性粒細胞分泌大量的可溶性促炎因子，增加腫瘤細胞的黏附和轉(zhuǎn)移可能[17]。血小板與腫瘤細胞之間的關(guān)系，同樣存在這樣的交互性[18]，在腫瘤炎性反應(yīng)滋生的“溫床”下，腫瘤細胞對血管內(nèi)皮的損傷作用，使得血小板得以迅速增殖，但同時血小板與腫瘤細胞形成癌栓定植，加速了腫瘤細胞的對機體的進一步侵襲。淋巴細胞是白細胞中體積最小的細胞，由淋巴器官產(chǎn)生，是參與機體免疫應(yīng)答功能的重要細胞成分，惡性腫瘤的長期炎性刺激將造成亞群減少失衡，進而引起機體免疫功能紊亂，淋巴細胞減低，導(dǎo)致腫瘤細胞免疫逃逸可能性增加。

3.2 NLR聯(lián)合SII的在良惡性鑒別中的診斷價值及截斷值

單因素分析發(fā)現(xiàn)，本研究正常組與惡性組、良性組與惡性組間的NLR、SII、PLR、LMR差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。根據(jù)ROC曲線下面積比較結(jié)果，NLR診斷效能>SII診斷效能>PLR診斷效能>LMR診斷效能，筆者認為NLR在良惡性腫瘤鑒別作用方面具備一定開發(fā)潛力，值得研究者進一步對其內(nèi)在機理進行深入探索。與其他指標相比，SII的公式原理較為特殊，更具有穩(wěn)定性，在減少測量誤差方面獨具優(yōu)勢。本文創(chuàng)新性地將NLR聯(lián)合SII指標進行檢測，以期達到更穩(wěn)定的理想檢測狀態(tài)，及“1+1>1”的檢測效能。研究結(jié)果顯示，NLR聯(lián)合SII指標檢測ROC曲線下面積達0.792(95%CI0.736～0.848，P<0.001)。NLR聯(lián)合SII指標診斷效能明顯優(yōu)于單項指標。針對目前無特異性診斷甲狀腺癌指標的困局，炎性腫瘤標志物的異軍突起無疑為新的輔助鑒別手段的開發(fā)打開了新的大門，當(dāng)彩超、細針穿刺細胞學(xué)檢查(fine needle aspiration，F(xiàn)NA)等檢測手段無法對甲狀腺結(jié)節(jié)性質(zhì)做出預(yù)判時，聯(lián)合炎性指標輔助檢測未嘗不是一個具有可行性的好辦法。本研究中NLR聯(lián)合SII鑒別甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的最佳截斷值0.375，可以達到較高靈敏度(89.34%)和陰性預(yù)測值(84.5%)的同時特異度并無明顯下降，在臨床篩查中或避免漏診患者。

3.3 NLR+SII高低與甲狀腺結(jié)節(jié)患者臨床病理特征的關(guān)聯(lián)

隨醫(yī)療衛(wèi)生規(guī)范的全面推進，過度診療是目前亟待解決的醫(yī)患難題。甲狀腺結(jié)節(jié)的診療體系主要由甲狀腺癌影像定位-細胞病理-分子靶標構(gòu)成[19]。但就大多數(shù)患者而言，基因檢測價格昂貴，并不普及，所以針對那些彩超難以明確，地域局限無法實施開展FNA的患者，醫(yī)療工作者應(yīng)在早期及時進行良、惡性結(jié)節(jié)甄別，提高疾病診斷效率，有效減輕患者痛苦及經(jīng)濟負擔(dān)。故NLR+SII更加表現(xiàn)出潛在輔助診斷價值。本研究依據(jù)AJCC第八版將55歲作為年齡的分界，分析結(jié)果表明NLR+SII的升高與良惡性組別、年齡、腫瘤大小、是否靠近甲狀腺被膜、TG-Ab均有統(tǒng)計學(xué)意義，高NLR+SII組患者提示結(jié)節(jié)惡性風(fēng)險增大，年齡、腫瘤直徑偏小，TG-Ab偏大，結(jié)節(jié)位置靠近甲狀腺被膜。已有研究發(fā)現(xiàn)年齡、腫瘤大小及甲狀腺特異性抗體均是甲狀腺結(jié)節(jié)向惡性進展過程中的危險因素[20]。NLR+SII升高代表機體的免疫平衡被打破，一定程度上預(yù)示更加侵襲性的臨床生物學(xué)行為，所以NLR+SII升高的甲狀腺結(jié)節(jié)患者應(yīng)加強定期隨訪，不能輕易忽視直徑較小的結(jié)節(jié)，尤其是靠近甲狀腺被膜且呈Tg-Ab陽性的小結(jié)節(jié)。同時針對那些健康人群，若甲狀腺特異性抗體升高，輔助監(jiān)測NLR+SII指標的發(fā)展趨勢顯得意義明顯，若NLR+SII有明顯飆升，機體免疫內(nèi)環(huán)境的平衡可能被打破，可通過加強免疫力等預(yù)防措施降低患病風(fēng)險。

本研究存在一些局限性。首先，本研究是一項對PTC及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者的回顧性分析，難以避免存在一些殘留的混雜因素，研究結(jié)果可能會有一定程度的偏差。其次，研究個體來自同一個醫(yī)院群體，結(jié)果可能不代表其他區(qū)域群體。最后，關(guān)于NLR+SII診斷價值的研究較少，我們需要更大樣本量多中心和前瞻性研究來驗證NLR+SII與甲狀腺癌的關(guān)聯(lián)。組織病理學(xué)評估是診斷甲狀腺疾病的金標準，單獨的NLR+SII并不是決定性因素，應(yīng)結(jié)合其他預(yù)測指標如彩超、CT等綜合考量，本文旨在為PTC的早期發(fā)現(xiàn)和診斷提供了一定價值參考。

作者聲明：本文全部作者對于研究和撰寫的論文出現(xiàn)的不端行為承擔(dān)相應(yīng)責(zé)任；并承諾論文中涉及的原始圖片、數(shù)據(jù)資料等已按照有關(guān)規(guī)定保存，可接受核查。

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