廖丹， 葛頌

遵義醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院，貴州 遵義（563000）

牙周病是中老年人牙齒喪失的最主要原因［1］。目前臨床上牙周病以牙周基礎(chǔ)治療及牙周手術(shù)治療為主，重度、急性、伴有系統(tǒng)病等患者需選擇增加藥物輔助治療。中成藥補(bǔ)腎固齒丸能達(dá)到扶正祛邪、固齒強(qiáng)身的目的，固齒丸治療牙周炎，特別是青少年牙周炎有較好的臨床療效，可減緩牙槽骨的吸收、延遲復(fù)發(fā)［2］。隨著對中藥逐步深入研究，治療骨質(zhì)疏松藥物淫羊藿苷（icariin，ICA）［3］引起了廣泛的關(guān)注。研究表明ICA 有促進(jìn)成骨、提高新骨量，促進(jìn)骨成熟，促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖、牙周膜干細(xì)胞增殖及骨向分化的作用，并且從作用機(jī)制層面探討了ICA 對成骨細(xì)胞的促進(jìn)作用［4?10］及對破骨細(xì)胞的抑制作用［4］。動物實(shí)驗(yàn)表明ICA 作為生物活性因子結(jié)合生物支架在促進(jìn)成骨及骨成熟方面有顯著效果［11］，聯(lián)合抗炎藥物可治療種植體周圍炎細(xì)菌誘導(dǎo)的骨丟失［5］。但是在體內(nèi)慢性牙周炎癥情況下，ICA 作為獨(dú)立影響因素是否仍具有促進(jìn)成骨作用以及對成骨、破骨細(xì)胞的影響尚不明確。為探究臨床慢性牙周炎患者口服ICA 的治療效果及可能機(jī)制，本研究使用不同濃度的ICA 和補(bǔ)腎固齒丸給慢性牙周炎模型SD 大鼠連續(xù)灌胃1、2 個(gè)月，以補(bǔ)腎固齒丸為參照，檢測血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物骨鈣素（osteocalcin，OCN）水平，觀察機(jī)體骨代謝情況；顯微CT（micro computed tomogra?phy，Micro?CT）掃描實(shí)驗(yàn)牙后三維重建，觀察牙周骨立體結(jié)構(gòu)、微結(jié)構(gòu)改變，測量分析牙槽骨高度吸收值；應(yīng)用HE 染色和甲苯胺藍(lán)染色從組織學(xué)角度觀察治療前后牙周組織變化，多角度評價(jià)ICA 改善慢性牙周炎牙周組織的效果，為中藥治療牙周病在臨床獲得更好的牙周組織修復(fù)再生提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物、試劑、器械與設(shè)備

60 只健康普通級雄性SD 大鼠，體質(zhì)量170～190 g，購于第三軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量合格證SCXK（渝）2102?0005。

ICA 由江蘇南通飛宇生物科技有限公司提供（批號：FY17420110），補(bǔ)腎固齒丸藥粉由成都九芝堂金鼎藥業(yè)有限公司提供（批號：Z?51021248）。

牙周探針、齦下潔治器械、手術(shù)剪、持針器、一次性使用口腔器械盒、骨鉗、12 號灌胃針、50 mL 燒杯、Micro?CT（Scanco Medical，瑞士）、硬組織切磨系統(tǒng)（EXAKT Verteriebs，德國）。

1.2 建模方法

60 只大鼠隨機(jī)分成2 組：正常組9 只，牙周炎模型組51 只，正常組不做任何處理，牙周炎模型組予10%水合氯醛按0.3 mL/100 g 腹腔注射麻醉，取仰臥位，固定于鼠板，消毒，鋪巾，用探針銳性分離右側(cè)上頜第二磨牙牙齦，用4?0 無菌醫(yī)用絲線牙周結(jié)扎2 圈，置絲線于齦下，術(shù)后予高糖飲食2 個(gè)月。定期檢查絲線結(jié)扎情況，若有脫落應(yīng)及時(shí)重新結(jié)扎。正常組予普通飲食2 個(gè)月。每2 周測量尾靜脈血血糖，數(shù)值均小于隨機(jī)血糖值16.7 mmol/L。本實(shí)驗(yàn)研究所有動物實(shí)驗(yàn)已通過遵義醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心的動物實(shí)驗(yàn)倫理審查。

1.3 組織學(xué)觀察建模情況

建模結(jié)束后，正常組、牙周炎模型組分別選取3 只處死，迅速分離右側(cè)上頜骨，4%多聚甲醛固定24 h，通過病理組織切片觀察實(shí)驗(yàn)大鼠右側(cè)上頜第二磨牙牙周組織的變化，確定建模是否成功。

1.4 ICA 與補(bǔ)腎固齒丸治療大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎

1.4.1 實(shí)驗(yàn)分組 建模成功后，牙周炎模型組剩余的48 只大鼠去除結(jié)扎絲線，齦下刮治器刮除實(shí)驗(yàn)牙及兩顆鄰牙牙周軟垢及牙石，雙蒸水注射器沖洗，正常飼養(yǎng)1 周后隨機(jī)分為4 組，每組12 只。分別為慢性牙周炎組（periodontitis group，P 組）、ICA低劑量組（ICA low dose group，L 組）、ICA 高劑量組（ICA high dose group，H 組）及補(bǔ)腎固齒丸組（Bu?Shen?Gu?Chi?Wan group，B 組）。剩余6 只正常大鼠為正常組（normal group，N 組），采用相同方法進(jìn)行牙周基礎(chǔ)治療?；A(chǔ)治療后所有大鼠正常飼養(yǎng)1周后開始給藥。給藥方案：①P 組和N 組，雙蒸水10 mL/（kg·d），ig；②L 組，20 mg/（kg·d）［12］，ig；③H組，ICA 40 mg/（kg·d），ig；④B 組，補(bǔ)腎固齒丸0.8 g/（kg·d）［13］，ig；。

1.4.2 血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物測定 血清的收集與保存：分別于灌胃1個(gè)月、2個(gè)月，各組大鼠12 h禁食禁飲，頸總動脈放血收集血漿，4 ℃離心3 000 r/min，10 min，EP 管分裝血清，立即送至遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科通過德國Roche 公司cobas e601 全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測血清OCN水平。

1.5 Micro?CT 三維影像學(xué)分析

1.5.1 設(shè)備及方法 Micro?CT：電壓70 kVp，電流200 μA，功率14 W，分辨率15.0 μm，曝光時(shí)間300 ms。VGstudio Max3.0 軟件重建/分析采集的掃描數(shù)據(jù)。各組大鼠處死后，分離出右側(cè)上頜牙槽骨，置于4%多聚甲醛中保存?zhèn)溆?。固? 周后送至四川大學(xué)華西口腔醫(yī)學(xué)院口腔疾病研究國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室掃描Micro?CT，獲取圖像，每個(gè)樣本掃描80～90 min。圖像采集完成后，選取右側(cè)上頜第二磨牙根分叉區(qū)作為興趣區(qū)（the region of interest，ROI），軟件分析，三維重建，獲取數(shù)據(jù)。

同時(shí)測量右側(cè)上頜第二磨牙牙冠6 個(gè)位點(diǎn)的釉質(zhì)牙骨質(zhì)界到牙槽嵴頂?shù)木嚯x（cement?to?enam?el junction? alveolar bone crest，CEJ?ABC）。VGstu?dio Max3.0 軟件分析斷層圖像，將實(shí)驗(yàn)牙牙體長軸與Y 軸平行，面近遠(yuǎn)中向長軸與X 軸平行，面與Z 軸平行。測量實(shí)驗(yàn)牙6 個(gè)位點(diǎn)分別為：近頰尖（mesio?buccal cusp，MBC）/近 腭 尖（mesio?palatal cusp，MPC）、頰溝（buccal groove，BG）/腭溝（palatal groove，PG）、遠(yuǎn)頰尖（disto?buccal cusp，DBC）/遠(yuǎn)腭尖（disto?palatal cusp，DPC）。測量某位點(diǎn)的CEJ?ABC 時(shí)，使Y 軸通過該位點(diǎn)，并在該面測量該處的CEJ?ABC。計(jì)算6 個(gè)位點(diǎn)的總值作為上頜第二磨牙的牙槽骨吸收值，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。由于本實(shí)驗(yàn)部分實(shí)驗(yàn)牙頰面頸部釉質(zhì)缺損較大，CEJ?ABC 測量誤差較大，因此計(jì)算實(shí)驗(yàn)牙腭側(cè)3 個(gè)位點(diǎn)的總值作為上頜第二磨牙的牙槽骨吸收值。

1.5.2 檢測指標(biāo) ①骨體積分?jǐn)?shù)（bone volume/tis?sue volume，BV/TV）：骨性結(jié)構(gòu)的體積與樣本總體積的比值，即礦化組織的比值（%），該數(shù)值越大，表明骨小梁含量越多。②骨小梁數(shù)目（trabecular number，Tb.N）：用于描述骨量變化（mm?1），在骨小梁厚度一定的前提下，數(shù)量越多，骨量越多。③骨小梁分離度（trabecular separation，Tb.Sp）：指骨小梁之間的平均距離（mm），用于描述骨小梁結(jié)構(gòu)形態(tài)，骨小梁之間的距離越大，分離度越大。④骨小梁厚度（trabecular thickness，Tb.Th）：指骨小梁的平均厚度（mm），當(dāng)發(fā)生骨質(zhì)疏松時(shí)，Tb.Th 數(shù)值變小。⑤牙槽骨吸收值（alveolar bone absorption）：以CEJ?ABC 作為牙槽骨吸收的參考標(biāo)準(zhǔn)，吸收值越大，說明牙槽骨喪失越明顯。

1.6 組織學(xué)觀察

將每組大鼠牙槽骨標(biāo)本掃描micro?CT 后行對半切開，一部分行常規(guī)脫鈣后進(jìn)行HE 染色，另一部分僅酒精梯度脫水后制作硬組織切片，行甲苯胺藍(lán)染色，鏡下觀察實(shí)驗(yàn)牙牙周組織情況。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS18.0 軟件，所有定量資料數(shù)據(jù)用x±s表示，多組間均數(shù)比較，采用單因素方差分析，兩組間均數(shù)比較，采用LSD 法檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠牙周炎模型的建立

病理組織學(xué)觀察顯示（圖1），相較于正常組，牙周炎模型組SD 大鼠上頜第二磨牙牙齦增生，結(jié)合上皮向根方增殖、延伸，附著喪失嚴(yán)重，大量炎性細(xì)胞浸潤，牙槽嵴頂高度降低，牙槽骨吸收明顯。而正常組結(jié)合上皮位于釉牙骨質(zhì)界處，無明顯炎性細(xì)胞浸潤，牙槽嵴頂未見吸收。

2.2 給藥后各組血清骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)的測定

如表1 所示，與N 組相比，P 組的血清OCN 水平明顯升高；與P 組相比，L 組、H 組和B 組OCN 水平明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示ICA 有減緩實(shí)驗(yàn)性大鼠慢性牙周炎牙槽骨吸收的可能性。灌胃2 個(gè)月與1 個(gè)月相比，H 組、B 組血清OCN 水平降低，提示隨著用藥時(shí)間延長，一定濃度的ICA 可能減緩實(shí)驗(yàn)性牙槽骨吸收的作用越明顯。

Figure 1 Pathological observation of normal group and periodontitis model group after modeling圖1 建模結(jié)束后正常組與牙周炎模型組病理學(xué)觀察

表1 給藥1、2 個(gè)月各組血清OCN 濃度Table 1 Serum OCN concentrations in each group 1 month and 2 months after administration ng/mL，x±s

2.3 Micro?CT 掃描結(jié)果

2.3.1 三維重建結(jié)果 給藥1 個(gè)月和2 個(gè)月，各治療組（B、H、L 組）牙槽嵴頂高度均大于P 組（圖2）。2.3.2 ROI 骨參數(shù)定量分析 給藥1 個(gè)月時(shí)，相較于N 組，P 組BV/TV、Tb.Th、Tb.N 值明顯減小，Tb.Sp明顯增大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與P 組相比，H 組、L 組及B 組BV/TV、Tb.N 值明顯增大，H組、B 組Tb.Th 值明顯增大、Tb.Sp 值明顯減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而L 組Tb.Th 值稍增大、Tb.Sp 值稍減小，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖3）。

給藥2 個(gè)月，相較于N 組，P 組各參數(shù)值變化趨勢與1 個(gè)月一致，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；H 組、L 組及B 組BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp值變化趨勢與給藥1 個(gè)月相似，并且BV/TV、Tb.N、Tb.Sp 值變化與P 組相應(yīng)指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。除L 組外，H 組、B 組Tb.Th 與P 組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

各治療組Tb.N、Tb.Sp 給藥2 個(gè)月與給藥1 個(gè)月的差異（圖3）具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

骨參數(shù)定量分析結(jié)果顯示，H 組、L 組及B 組具有不同程度的牙槽骨修復(fù)甚至再生，H 組新生牙槽骨較L 組有所增加，H 組與B 組新生骨量無明顯差異，而給藥2 個(gè)月較1 個(gè)月成骨效果更佳。

2.3.3 各組牙槽骨吸收值比較分析 P 組大鼠牙槽骨吸收值較N 組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；L 組及H 組較P 組牙槽骨吸收值降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），B 組牙槽骨吸收值在給藥1 個(gè)月時(shí)稍降低，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在灌胃2 個(gè)月時(shí)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

2.4 HE 染色

給藥1 個(gè)月（圖4），相較于N 組，P 組牙齦上皮增生明顯，固有層內(nèi)見明顯炎癥細(xì)胞浸潤，但較建模時(shí)有所減少，結(jié)合上皮向根方增殖移位，牙周袋形成；牙槽骨表明見凹坑狀吸收陷窩和破骨細(xì)胞，牙周膜纖維變性，可見纖維斷裂。B 組、H 組、L 組均表現(xiàn)牙齦上皮少量增生，固有層少量中性粒細(xì)胞浸潤；有類骨質(zhì)形成，骨化中心可見成骨細(xì)胞成排排列；成纖維細(xì)胞活躍。

給藥2 個(gè)月（圖5），P 組表現(xiàn)出牙齦增生明顯，固有層內(nèi)見明顯炎癥細(xì)胞浸潤，但較給藥1 個(gè)月時(shí)有所減少，結(jié)合上皮附著向根方移位；牙槽骨表面見凹坑狀吸收陷窩及逐漸凋亡的破骨細(xì)胞。B 組較牙周炎組表現(xiàn)牙齦上皮未見明顯增生，固有層少量中性粒細(xì)胞浸潤；有類骨質(zhì)形成，可見骨化中心成骨細(xì)胞成排排列；可見新生牙周膜纖維束埋入新形成的牙槽骨中；大量活躍的成纖維細(xì)胞。H組、L 組牙齦上皮增生不明顯，固有層內(nèi)少量中性粒細(xì)胞浸潤；有類牙骨質(zhì)形成，可見骨化中心成骨細(xì)胞成排排列；大量活躍的成纖維細(xì)胞。

Figure 2 Three?dimensional reconstruction of Micro?CT in each group 1 and 2 months after treatment圖2 給藥1、2 個(gè)月后各組Micro?CT 三維重建圖像

Figure 3 Quantitative analysis of micro?CT measurement parameters in each group 1 month and 2 months after administration圖3 給藥1、2 個(gè)月各組micro?CT 測量參數(shù)定量分析

2.5 硬組織切片甲苯胺藍(lán)染色

甲苯胺藍(lán)染色（toluidine blue staining，TB）結(jié)果顯示，灌胃1 個(gè)月，P 組多為原有的淡紫色牙槽骨，幾乎看不到類骨質(zhì)及新生牙槽骨，H、L 組及B 組均觀察到類骨質(zhì)形成。與1 個(gè)月相比，灌胃2 個(gè)月時(shí)，H、L、B 組的新生牙槽骨更多，能看到與原礦化骨之間有明顯的分界線，在新生骨邊緣有淺藍(lán)色的類骨質(zhì)，牙周炎組仍未見明顯新牙槽骨形成（圖6、圖7）。

3 討 論

如何改善破壞的牙周組織，促進(jìn)牙槽骨修復(fù)再生是牙周病治療中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。近年來隨著牙周組織工程的發(fā)展，牙周組織再生有了新的希望［14］。大量研究表明，生物活性因子ICA 在牙體牙髓牙周病學(xué)、口腔種植、口腔正畸等多個(gè)口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有一定的作用，如口服給予ICA 對大鼠正畸牙齒移動（orthodontic tooth movement，OTM）有積極的影響［12］。Wu 等［15］使用磷酸鈣骨水泥支架構(gòu)建ICA 遞送系統(tǒng)，并裝載BMSCs，作用于去卵巢大鼠的顱骨缺損，同時(shí)25 mg/（kg·d）ICA 灌胃，局部用藥聯(lián)合全身系統(tǒng)性給藥達(dá)到最佳的骨修復(fù)效果。楊衛(wèi)等［16］使用25 mg/kg ICA 口服給藥觀察ICA 對骨質(zhì)疏松牙周炎小鼠牙槽骨吸收的影響，發(fā)現(xiàn)ICA口服給藥在有效預(yù)防骨質(zhì)疏松發(fā)生的同時(shí)，可減少牙周炎引起的牙槽骨吸收，并認(rèn)為此作用來自或部分來自ICA 對成骨細(xì)胞的分化和礦化作用。本實(shí)驗(yàn)用不同濃度的ICA 和補(bǔ)腎固齒丸給慢性牙周炎模型實(shí)驗(yàn)大鼠連續(xù)灌胃，通過血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物檢測、Micro?CT 掃描、組織學(xué)觀察等多種方法探究其對牙槽骨吸收的作用效果，為中藥防治牙周炎提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

表2 Micro?CT 測量各組牙槽骨吸收值比較Table 2 Micro?CT measurement of alveolar bone absorption in each group

Figure 4 Observation of improvement in periodontal tissue 1 month after treatment by HE staining圖4 HE 染色觀察給藥1 個(gè)月牙周組織改善情況

Figure 5 Observation of improvement in periodontal tissue after 2 months of treatment圖5 HE 染色觀察給藥2 個(gè)月牙周組織改善情況

Figure 6 Observation of improvement in periodontal tissue 1 month after treatment by toluidine blue staining圖6 甲苯胺藍(lán)染色觀察給藥1 個(gè)月牙周組織改善情況

在牙周炎的發(fā)生發(fā)展過程中，牙槽骨不斷的進(jìn)行骨轉(zhuǎn)換，包括了骨吸收與骨形成連續(xù)復(fù)雜的過程，在此過程中骨吸收與骨形成相互偶聯(lián)，OCN則是反映骨轉(zhuǎn)換的標(biāo)志物，當(dāng)牙槽骨吸收活躍時(shí)，牙槽骨骨轉(zhuǎn)換率升高，血清中的OCN 濃度可能升高。Yang 等［17］等觀察補(bǔ)腎固齒丸對大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙槽骨重建的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎固齒丸組的血清OCN 濃度顯著低于牙周炎模型組，認(rèn)為給予補(bǔ)腎固齒丸能夠降低大鼠牙槽骨的骨轉(zhuǎn)換率，減緩牙周炎進(jìn)程中的牙槽骨吸收。本實(shí)驗(yàn)選用OCN 作為骨轉(zhuǎn)換敏感指標(biāo)，探究在ICA 用藥情況下SD 大鼠慢性牙周炎模型牙槽骨骨代謝情況。與N 組大鼠比較，P 組大鼠血清OCN 水平明顯升高；H組、L 組及B 組較P 組血清OCN 水平明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示給予ICA 和補(bǔ)腎固齒丸能降低大鼠牙槽骨的骨轉(zhuǎn)換率，改善牙周骨代謝，減緩牙周炎進(jìn)程中的牙槽骨吸收。

組織病理形態(tài)計(jì)量法為金標(biāo)準(zhǔn)，CT 測量結(jié)果與病理結(jié)果高度一致，是目前評價(jià)骨結(jié)構(gòu)較常用的方法［18］。Micro?CT 可清晰掃描骨小梁立體結(jié)構(gòu)，進(jìn)行3D 重建，并精確計(jì)量骨參數(shù)，分析骨組織的“質(zhì)”與“量”，同時(shí)進(jìn)行各種數(shù)據(jù)測量。本實(shí)驗(yàn)計(jì)量了ROI 的骨小梁的數(shù)目（Tb.N）、骨小梁分離度（Tb.Sp）以及骨小梁厚度（Tb.Th）反映根分叉區(qū)ROI牙槽骨的質(zhì)，以骨體積分?jǐn)?shù)（BV/TV）來反映新生牙槽骨的量，當(dāng)骨質(zhì)疏松時(shí)，Tb.N、Tb.Th、BV/TV 均會減小。同時(shí)測量標(biāo)本腭側(cè)3 個(gè)位點(diǎn)CEJ?ABC 之和反應(yīng)牙槽骨吸收程度，探討用藥前后牙槽骨吸收的變化。在實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型SD 大鼠灌胃1、2 個(gè)月后，對各組BV/TV、Tb.N、Tb.Sp 以及Tb.Th 進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果顯示補(bǔ)腎固齒丸能促進(jìn)實(shí)驗(yàn)性牙周炎的牙槽骨修復(fù)與丁一等［13］的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。而本研究結(jié)果表明，高劑量ICA 同樣可促進(jìn)實(shí)驗(yàn)性牙周炎的修復(fù)改建，促進(jìn)作用與B 組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；L 組與B 組有顯著差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；給藥2 個(gè)月較給藥1 個(gè)月成骨效果更佳。所有骨參數(shù)分析結(jié)果均表明ICA 在減緩牙槽骨吸收的進(jìn)程中發(fā)揮積極作用。形態(tài)學(xué)分析結(jié)果顯示，P 組大鼠牙槽骨吸收值較正常組升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；H 組、L 組牙槽骨吸收值較P 組降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B 組牙槽骨吸收值在給藥1 個(gè)月稍降低，而在給藥2 個(gè)月時(shí)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果同樣顯示ICA 在一定程度上能改善牙周牙槽骨吸收和骨破壞。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，無論在骨參數(shù)方面還是骨吸收值方面，ICA 高劑量組改善牙槽骨吸收效果優(yōu)于低劑量組。

HE 染色結(jié)果顯示，在給藥1、2 個(gè)月，H、L、B 組均觀察到牙齦上皮增生不明顯，上皮及固有層內(nèi)少量炎性細(xì)胞浸潤，有新生牙骨質(zhì)及牙槽骨形成，成骨細(xì)胞成排排列，偶見少量破骨細(xì)胞，而P 組形成深牙周袋，大量炎性細(xì)胞浸潤，牙槽骨形成骨吸收陷凹。硬組織切片顯示H、L、B 組均觀察到淺藍(lán)色的類骨質(zhì)，而P 組不明顯。

本研究以SD 大鼠為實(shí)驗(yàn)對象，“絲線結(jié)扎+高糖飲食”2 個(gè)月成功建立大鼠慢性牙周炎模型，分別給予ICA、補(bǔ)腎固齒丸治療1、2 個(gè)月后，通過檢測大鼠血清骨代謝標(biāo)志物變化，顯微CT 三維重建定量分析各組骨參數(shù)以及釉?牙骨質(zhì)界?牙槽嵴頂（CEJ?ABC）的距離，制作組織切片鏡下觀察牙周組織變化。各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果分析認(rèn)為ICA 具有改善牙槽骨代謝狀況，促進(jìn)牙槽骨改建，延緩牙周組織破壞的作用，一定程度上輔助治療牙周炎，為其應(yīng)用于臨床獲得更好的牙周組織再生提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。