郭寶鳳，孫麗君，郝美玲*

(1.內蒙古自治區(qū)藥品檢驗研究院，內蒙古自治區(qū)中蒙藥標準研究重點實驗室，呼和浩特市 010010；2.內蒙古醫(yī)科大學(藥學院)，呼和浩特市 010110)

蒙藥材是指來源于廣闊無垠的大草原，沒有任何污染的原生藥材，是中國藥學寶庫中一顆璀璨的明珠。同時我國的蒙藥材主要生長于內蒙古遼闊的大草原上，在那里生長的蒙藥材不會受其他因素破壞和干擾，能夠更好的將其藥效發(fā)揮于臨床治療中。

有相關研究表明，蒙藥材的藥效要更強于中藥，因而蒙藥材在各民族人民心中都扮演了十分重要的角色，針對人們各類疾病的治療和預防，我們多采用以蒙藥材入藥，且其療效甚好。例如蒙藥材巴特日-7對于使用混合菌株注射法建立的患有輸卵管炎大鼠模型有很好的治療效果，能夠明顯降低血清TNF-α、IL-2、IL-6的含量[1]；還有蒙藥材叉分蓼，它的主要成分為黃酮類化合物,其總黃酮(Total flavonoids of Polyonum divaricatum L，TFP)具有很強的體外抗腫瘤活性，對于在女性人群中高發(fā)病率的乳腺癌疾病來說，其總黃酮成分可ERK/MAPK,PI3K/AKT這兩種信號在傳導過程中失去活性,因而能夠有效抑制人乳腺癌擴散。除此之外，蒙藥材叉分蓼也可以降低Bcl-2,Bcl-xl,CDK,PEPCK和MMP2的基因表達，以此促進了細胞凋亡,抑制了細胞周期進程,運動以及糖代謝等生理過程，充分的發(fā)揮了其抗腫瘤作用[2]。

1 蒙藥材的現狀分析

蒙藥材在我國防病治病的艱難旅程中，發(fā)揮著無法磨滅的強大作用。然而在最近幾年的蒙藥材市場上卻出現了一系列重大問題，尤其是對于一些流通于藥材市場的常用蒙藥材，此類問題則表現的更為嚴重。一些藥材雖然在名稱是一致的，但其真?zhèn)挝覀儏s很難辨別，這一問題的出現嚴重的影響了蒙藥材在臨床中的應用效果。

例如近些年來,隨著沉香藥材在臨床上用藥量的增加,蒙藥材市場也出現了很多的偽劣沉香藥材。有些商販以白木香次品代替沉香在市場上售賣，還有一些商販甚至在其它木材表面上涂黑色油性物質以此來冒充沉香進行出售，同時還有人將國產沉香當做進口沉香來欺騙消費者[3]。這一系列問題的出現嚴重影響了沉香藥材的臨床療效，因此沉香的真?zhèn)舞b別對臨床用藥來說顯得十分重要。通過查閱文獻，我了解到可利用性狀鑒別，顯微鑒別，理化鑒別，薄層層析，醇浸物等多種鑒別方法，來進行對于沉香的真?zhèn)舞b別。

同時我們還可以利用種皮柵狀細胞、支持細胞、光輝帶、橢圓形管胞島、淀粉粒為刀豆主要的顯微鑒別特征;蘇氨酸、纈氨酸、亮氨酸為刀豆薄層色譜的鑒別特征等這些特點來鑒別廣泛流通與市場的刀豆的真?zhèn)?，并且以上鑒別方法也為其制定其質量標準提供了更多可靠的依據[4]。

關于蒙藥材的真?zhèn)蔚蔫b別，方法有很多，對于一些經驗豐富的鑒別技術人員來說，他們僅根據藥材的性狀，顯微等特征就可準確鑒別蒙藥材的真?zhèn)危瑫r對于一些很難鑒別的藥材，我們還可以利用其理化性質進行鑒別，例如，利用我們常用的一些分析技術來檢測其化學組成、元素種類及含量等方法都可用于其偽品的鑒別。蒙藥材的真?zhèn)舞b別與臨床療效有著密切的關系，因此充分掌握其鑒別技術也是目前市場的大勢所趨[5]。

2 蒙藥材的鑒別方法研究

2.1 性狀

直接觀察得到藥材的外形、顏色、氣味、質地、斷面等特征，或根據理化反應的結果總結出的與事實相符的結論來準確區(qū)分藥材真、偽、優(yōu)、劣的一種常用方法稱為性狀鑒別。此方法方便快捷，經濟省時，是蒙藥材鑒別方法中應用最廣泛，也是最根本的鑒別方法，但需要注意的是此方法多依靠鑒別人員的主觀判斷，主觀性較強，因此擁有豐富的鑒別經驗的人才能更好的判斷其真?zhèn)巍?/p>

阿給(Agi)是蒙藥學中的一種常用藥材，在蒙醫(yī)醫(yī)學中被譽為“人造圣水組成之一”。在臨床中，在相關文獻的記載發(fā)現阿給為菊科植物冷篙的干燥地上部分，同時對阿給的性狀，顯微等特征進行了基源考證[6]。對于阿給(Agi)的性狀鑒別，也為臨床中對該藥材的正確使用提供了更多的科學依據。

同樣，最近幾年，蒙藥材中漏蘆花[7]、角蒿[8]、石懸鉤子[9]、北紫堇[10]等多種藥材均利用性狀鑒別，進一步推動了蒙藥材研究在中國市場進步與發(fā)展。

2.2 顯微鑒別

顯微鑒別法則是指將藥材、(飲片)橫切片縱切片、粉末、解離組織成分或表皮制作成片，利用顯微鏡觀察飲片、粉末中的軟組織、細胞或內含物等組成的一種極其細微的鑒別方法。顯微鑒別時我們大多選擇極具代表性，顯微特點突出的樣品作為供試品，并依據《中國藥典》2015版(通則2001)項下顯微鑒別法的方法進行制片觀察[11]。

查閱蒙藥材漏蘆花的鑒別的相關文獻，大都對漏蘆花的顯微性狀、花的表面特征、粉末的顯微特征進行了鑒別。同時漏蘆花的這些顯微特征也為鑒別漏蘆花的真?zhèn)魏椭贫ㄆ滟|量標準提供了可靠的依據[7]。

2.3 理化鑒別

理化鑒別法為鑒別蒙藥材常用方法之一。即根據藥材某些化學成分及其性質，利用現代理論、儀器等手段進行分析、鑒別藥材的真?zhèn)闻c質量。包括一般鑒別、色譜及光譜鑒別等方法。理化鑒別法正是利用藥材能發(fā)生某些專屬性反應來鑒別蒙藥材。

2.3.1化學鑒別 化學鑒別又可稱作化學法，主要原理為利用藥物與某種化學試劑在特定條件下發(fā)生化學反應，如產生顏色、氣體、沉淀、熒光等現象的方法，來完成藥物真?zhèn)蔚蔫b別。

例如在檢驗藥物中的黃酮類成分時，則常采用顏色鑒別反應即鹽酸鎂粉反應進行鑒別，利用此鑒別方法對蒙藥紫檀香藥材進行鑒別，成功鑒別出其含有黃酮類成分。目前，從化學研究領域的角度出發(fā)來看，對于鑒別藥物中是否含有某些特定成分，我們最常采用的也是最經典的還是顏色鑒別反應。

據文獻記載，人們常采用生物堿沉淀的方法檢測藥物中是否含有生物堿類成分。藥物中游離的生物堿大多為脂溶性生物堿，它們的數目十分龐大且易溶于苯、乙醚等極性較低的有機溶劑，因此我們能夠利用藥物中大部分生物堿和某些試劑生成沉淀這一方法鑒別不同的生物堿。有人就利用此類鑒別方法將蒙藥材紫檀香中的苯提取物進行了碘化秘鉀試驗，最終成功地檢查出蒙藥材紫檀香中的生物堿類成分，推動了蒙藥材紫檀香的鑒別研究進展[15-16]。

2.3.2色譜法

2.3.2.1薄層色譜鑒別

薄層色譜鑒別是指將合適的固定相涂布于玻璃板上，形成一均勻的薄層，再以合適的溶劑為流動相，根據其對各成分吸附能力的不同，將混合試樣分離，在薄層板上呈現出各成分的不同斑點。這一方法可快速有效的將藥物中的大多數有效成分如生物堿、核苷酸、脂肪酸、類固醇、氨基酸和其他多種物質進行分離和鑒別。

在蒙藥材白花龍膽的鑒別中，選用0.5%甲基纖維素鈉板為吸附劑，以龍膽苦昔為對照品，氯仿∶甲醇∶水∶甲酸(14∶1∶1∶0.5)展開劑，鑒別白花龍膽；薄層色譜鑒別結果的斑點十分清晰、集中，根據薄層板上顯色劑的顯色情況和斑點顏色可以初步認為是龍膽苦昔,最終此方法成功的鑒別了白花龍膽和尖葉假龍膽，同時也為的白花龍膽質量控制提供了一定的依據[12]。

2.3.2.2高效液相色譜法

高效液相色譜法是一種通過分離分析試樣以檢測其中某些化學成分的儀器分析方法，它由于不受分析對象是否具有揮發(fā)性等其他特殊性質的限制，因而被廣泛應用于蒙藥材的日常鑒別分析中。

文獻記載到利用高效液相色譜法對蒙藥材膿瘡草中有效成分鹽酸水蘇堿進行了含量測定，并利用蒸發(fā)光散射檢測器進行檢測。以對數方程的形式進行回歸分析，線性關系良好，最終計算得到它的平均回收率為100.39%。此方法，靈敏，簡便的計算出了膿瘡草中鹽酸水蘇堿的含量，且所得數據十分準確[13]。

同樣當進行不同產地蒙藥材大梔子中梔子苷的含量測定時，高效液相色譜法也是不失為一種很實用的方法。利用高效液相色譜法，最終測出各梔子苷的含量差異顯著。[14]此方法高效、簡便的測定并比較了來源于不同產地的蒙藥材大梔子中梔子苷的含量，為大梔子的質量控制提供了重要依據。

2.3.3光譜鑒別

2.3.3.1紅外光譜法

紅外光譜法是光譜鑒別中最常用的一種分析方法，它通過檢測待測樣品中不同的物質在紅外光區(qū)有不同吸收的電磁波輻射，來對試樣進行結構分析以得出具體的化學成分。

同樣在蒙藥紫檀香藥材的真?zhèn)舞b別上有人便采用了紅外光譜分析的方法，將紫檀香對照藥材置乳缽中研磨成細粉，并以同樣的方法制備出紫檀香市售藥材細粉，以溟化鉀壓片法進行其紅外光譜的測定，最終成功地完成了蒙藥紫檀香藥材的真?zhèn)舞b別操作[15]。

2.3.3.2紫外光譜法

紫外光譜法是利用測定物質分子在紫外光區(qū)吸收光譜這一原理所進行的鑒別分析。在日常蒙藥材的鑒別研究中，紫外光譜法也同樣是一個重要的手段。通常紅外光譜直接用藥材細粉進行檢測，但紫外光譜則需將研究對象進行一定程度的化學處理后才能進行檢測。

如對紫檀香藥材進行紫外光譜鑒別時，先將紫檀香藥材進行研磨，得到紫檀香藥材的粗粉，再用丙醇提取其成分，待用甲醇稀釋后，以蘆丁作為對照品，以硝酸鋁-氫氧化鈉-硝酸鈉混合液為顯色劑，可檢測出紫檀香藥材中是否含有黃酮類成分。紫外光譜鑒別擁有重現性高，結果準確，操作方便等優(yōu)點，因此在鑒別化學成分中紫外光譜得到了廣泛的應用[16]。

2.3.3.3原子吸收光譜法

原子吸收光譜法是指在氣態(tài)基態(tài)狀態(tài)下的原子，其外層電子在紫外光和可見光的條件下，對光輻射進行定量吸收，由基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，并以此來進行定量測定的一種分析方法。

例如在蒙藥材冷篙微量元素的分析中，La(N03)3,和CsCl消除相應干擾，利用標準曲線法和標準加入法，在同一溶液中采用火焰原子吸收光譜法去測定冷篙中Zn、Ca、Mg、Fe、Cu、Na元素，最終測定出冷篙中元素Zn、Ca、Mg、Fe、Cu、Na含量都很高,預示冷篙具有較高藥用價值[17]。

2.3.3.4近紅外光譜法

近紅外光譜法是集現代電子技術、光譜分析技術、計算機技術和化學計量學為一體的現代光譜技術，該技術具有分析速度快，分析效率高，分析成本低，測量重復性好，樣品測量一般無需預處理，分析過程不破壞樣品，便于實現在線分析等特點。而樣品一般無需預處理及分析過程不破壞樣品的特點尤為突出，屬典型的無損分析技術[18]。

呂麗娟等[19]采用近紅外光譜分析對4種龍膽科“地格達”類蒙藥材進行譜學特征研究，并對其一維圖譜和二階導數圖譜進行系統(tǒng)分析，可以成功鑒別4種藥材。結果表明，采用譜學技術可實現龍膽科4種“地格達”類蒙藥材的高效、準確鑒別。這種方法不但實現了傳統(tǒng)蒙醫(yī)藥與現代科學技術的有機結合，也為蒙藥的現代化研究提供了新方法和新思路。

2.3.4液質聯(lián)用技術 液質聯(lián)用(HPLC-ESI-MS/MS)技術將高效液相色譜的分離能力與質譜的高靈敏度及高選擇性的檢測能力相結合，具有高效準確、重復性好、操作方便和使用范圍廣等特點，非常適合組成復雜、含量低微的天然藥物化學成分的研究。

王琰等[20]采用HPLC-ESI-MS/MS技術首次對蒙藥撲勒蒙的化學成分進行分離鑒定，與傳統(tǒng)的先通過色譜分離，再進行核磁共振波譜鑒定的研究方法比較，具有花費時間短、耗材用量少等顯著優(yōu)勢。

2.3.5DNA條形碼技術 DNA條形碼技術(DNA barcoding)利用通用引物對所研究物種的多個DNA序列進行擴增和測序,通過比較分析挑選出合適的DNA條形碼序列,并構建DNA序列條形碼數據庫,再通過特定軟件進行生物信息學分析,從而實現物種的鑒定[21]。DNA條形碼技術具有不依賴于藥材形態(tài)，排除了鑒定者個人主觀因素，具有鑒定結果重復性好、方法通用性好，易于推廣和標準化等優(yōu)點[22]。

崔占虎等[23]對蒙藥地格達類藥用植物進行通用引物PCR擴增，PCR擴增產物直接測序，并對序列進行分析。測得4種“地格達”的rbcL，ITS，trnH-psbA和matK全長序列，4種序列長度的范圍為388～940bp。結果，rbcL，ITS，matK序列都可以將其鑒別出來。通過DNA條形碼鑒別方法可對4種龍膽科“地格達”進行準確﹑可靠﹑有效的分子鑒別。長期以來，蒙藥材品種繁多、基原復雜等原因嚴重制約著蒙藥的應用和發(fā)展，DNA barcoding這種實用性強、準確度高的工具將在蒙藥的鑒定和替代品等方面發(fā)揮重要的作用，為蒙藥的正本清源提供有力的技術保障。而將DNA分子技術引進蒙藥品種鑒定和質量標準研究也將是今后蒙藥鑒定的一個新的發(fā)展方向。

3 結語與展望

近年來，蒙藥材市場較為混亂，蒙藥材真?zhèn)舞b別的結果將直接影響到患者的健康狀況以及其臨床用藥的安全。由此可見我們必須采取一切行動去鑒別應用于臨床治療的各類蒙藥材。在我國蒙藥材市場上存在著各式各樣的偽品，他們所采用的仿偽技術更是各有千秋，因此要想在如此混亂的商品中成功辨別出正品，鑒定者第一步要做的就是努力用肉眼觀察出偽品與正品所存在的性狀方面的明顯差異，當肉眼很難鑒別出性狀差異的情況下，可以使用顯微鏡來進行細微觀察，同時也可采用一些我們常用的色譜法、光譜法、液質聯(lián)用技術、DNA條形碼技術等理化鑒別方法來將正品與偽品成功區(qū)分開[24]。

隨著蒙醫(yī)藥分析技術手段的推進，蒙藥材的鑒別方法研究已逐步向符合蒙醫(yī)藥質量標準體系靠近。一方面我們通過深入研究蒙藥材影響藥物療效的基礎，完善已經記錄在冊的蒙藥材相關鑒別方法，最終建立屬于蒙藥材的獨立資料庫;另一方面我們通過充分使用現代分析技術以及其聯(lián)用技術，以此來構建出多組分多指標的質量控制體系，例如可利用高效液相色譜法、液質聯(lián)用技術、DNA條形碼技術等鑒定方法，以獲取其化學、物理信號，也可以利用藥材的性狀顯微特點，以鑒別流通于市場藥材的真?zhèn)?。通過以上鑒別分析技術，全面、準確地控制蒙藥材的質量，逐步建立起各種分析技術的指紋圖譜,使蒙藥鑒別方法更加全面、科學、規(guī)范，更具有可控性和可行性[25]。