孫 海,馮 鵬,王俊俠,李云龍,李 錦,胡 彬,王 胤,曹金娟,鄭建秋
(1.北京市植物保護(hù)站,北京 100029;2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),北京 100011;3.北京市昌平區(qū)植保植檢站,北京 102200)
辣根素是從辣椒等茄科植物中提取出來(lái)的一類次生代謝產(chǎn)物,其主要成分為異硫氰酸酯類化合物(isothiocyanates,簡(jiǎn)稱ITCs),其中含量較高的為烯丙基異硫氰酸酯(allyl isothiocyanate,簡(jiǎn)稱AITC)。由于辣根素生物活性具有廣譜性,引起了諸多學(xué)者的廣泛關(guān)注[1-2]。在國(guó)外有將紅辣椒和芥末提取的混合物用于防治土傳病蟲(chóng)害的報(bào)道,且有效成分為辣根素、異硫氰酸烯丙酯等。隨著國(guó)內(nèi)保護(hù)地種植年限的增加,根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)生頻率也不斷上升,而且一旦發(fā)生后很難根治,目前有效的防治技術(shù)手段仍是化學(xué)防治,但在綠色和有機(jī)蔬菜種植上缺乏高效防治根結(jié)線蟲(chóng)的產(chǎn)品。辣根素作為一種植物源農(nóng)藥,不僅可以防治根結(jié)線蟲(chóng),還具有廣譜的殺蟲(chóng)和抑菌活性,其推廣和應(yīng)用對(duì)綠色和有機(jī)蔬菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。20%辣根素水乳劑是由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)研發(fā)的植物源土壤熏蒸藥劑,本文將通過(guò)室內(nèi)系統(tǒng)評(píng)價(jià)其對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的毒力效果,為該藥劑田間防治根結(jié)線蟲(chóng)的應(yīng)用提供參考。
1.1.1 試驗(yàn)藥劑
20%辣根素水乳劑由云南聯(lián)創(chuàng)利民生物工程有限公司提供;1.8%阿維菌素乳油由浙江世佳科技有限公司提供。
1.1.2 根結(jié)線蟲(chóng)卵及二齡幼蟲(chóng)的制備
從中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)線蟲(chóng)研究室培養(yǎng)的番茄根部挑取南方根結(jié)線蟲(chóng)(Meloidogyne incognita)新鮮卵塊,一部分卵塊用毛筆在無(wú)菌水中輕輕打散成卵粒,用于室內(nèi)卵孵化率的離體測(cè)定;另一部分卵塊放在小培養(yǎng)皿(直徑3.5 cm)中的紗網(wǎng)上,再向培養(yǎng)皿中加入少許蒸餾水, 保存在4 ℃冰箱中;卵孵化后取出并放在室溫下,24 h 后收集2 齡幼蟲(chóng)(J2), 每天收集1次, 共收集3 d ,配制成幼蟲(chóng)懸浮液,后將幼蟲(chóng)懸浮液稀釋至200條/mL,并用于室內(nèi)對(duì)幼蟲(chóng)致死率的離體測(cè)定。
1.2.1 20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)的致死效果測(cè)定
用無(wú)菌水配制20%辣根素水乳劑1 000、2 000、4 000、8 000、10 000、20 000倍液即6個(gè)稀釋濃度(6個(gè)處理),將稀釋液分別加到24孔板中,每個(gè)孔中加入0.5 mL,每個(gè)稀釋濃度加3個(gè)孔,作為3次重復(fù)。1.8%阿維菌素乳油用無(wú)菌水稀釋10 000倍,加入24孔板中,作為藥劑對(duì)照。在24孔板中設(shè)置無(wú)菌水的空白對(duì)照。將根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)懸浮液加到以上各處理稀釋液中,每個(gè)孔中加入50~80條線蟲(chóng)。24 h后調(diào)查根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)的死亡數(shù)量,計(jì)算矯正致死率。公式為:死亡率=死亡線蟲(chóng)數(shù)/處理線蟲(chóng)數(shù)×100%;矯正致死率=(處理死亡率-空白對(duì)照死亡率)/(1-空白對(duì)照死亡率)×100%。
1.2.2 20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)卵孵化抑制效果測(cè)定
用無(wú)菌水配制20%辣根素水乳劑100、300、500、1 000倍液即4個(gè)稀釋濃度(4個(gè)處理),將稀釋液分別加入到24孔板中,每個(gè)孔中加入0.5 mL,每個(gè)稀釋濃度4個(gè)孔(4次重復(fù))。1.8%阿維菌素乳油用無(wú)菌水稀釋500倍,加入24孔板中,作為藥劑對(duì)照。在24孔板中設(shè)置無(wú)菌水的空白對(duì)照。將根結(jié)線蟲(chóng)卵粒加到以上各處理的稀釋液中,每孔60~80粒。72 h后調(diào)查卵的孵化率,計(jì)算孵化抑制率。公式為:孵化率=孵化卵數(shù)/處理卵數(shù)×100%;孵化抑制率=(對(duì)照孵化率–處理孵化率)/對(duì)照孵化率×100%。
采用SPSS 軟件做DMRT 分析。
室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果顯示(表1),20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的致死效果;其中,20%辣根素1 000、2 000、4 000倍液處理的矯正致死率均為100%;20%辣根素8 000倍液處理的矯正致死率仍能達(dá)到96.5%,20%辣根素10 000倍液處理時(shí)矯正致死率下降到66.6%,且二者致死效果均低于1.8%阿維菌素乳油10 000倍液處理的100.0%。說(shuō)明20%辣根素水乳劑稀釋8 000倍以下時(shí)對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)有較高的致死效果。
表1 20%辣根素水乳劑對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)致死效果
室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果顯示(表2),20%辣根素水乳劑對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)卵的孵化抑制效果較弱。20%辣根素100倍液處理對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)卵的孵化抑制率達(dá)69.5%,20%辣根素300倍液處理對(duì)卵的孵化抑制率顯著下降到38.7%。藥劑對(duì)照1.8%阿維菌素500倍液處理對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)卵的孵化抑制率為83.7%,抑制效果顯著高于20%辣根素水乳劑的各個(gè)處理。
由試驗(yàn)結(jié)果可以看出,20%辣根素水乳劑稀釋低于8 000倍液時(shí)對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)幼蟲(chóng)都有較高的毒殺活性,致死率能保持在96.5%以上,10 000倍液時(shí)下降到66.6%;因此,在應(yīng)用20%辣根素水乳劑防治根結(jié)線蟲(chóng)時(shí),稀釋倍數(shù)建議不超過(guò)8 000倍。20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)卵的抑制能力很低,100倍液時(shí)對(duì)卵的孵化抑制率為69.5%,500倍液時(shí)僅為26.9%,當(dāng)土壤中根結(jié)線蟲(chóng)卵塊較多時(shí), 20%辣根素水乳劑的防治效果會(huì)受到影響,但可通過(guò)與藥劑復(fù)配或在生長(zhǎng)期配合使用阿維菌素等藥劑聯(lián)合控制線蟲(chóng)來(lái)提高防治效果。
表2 20%辣根素水乳劑對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)卵的抑制效果 %