胡 曉 徐海青

(1 湖北省宜昌市婦幼保健院兒童保健科，宜昌市 443000，電子郵箱：1428779593@qq.com；2 湖北省婦幼保健院兒童保健科，武漢市 430000)

自閉癥譜系障礙(autism spectrum disorder，ASD)是一組嚴(yán)重的神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病，是指由于神經(jīng)發(fā)育不健全而導(dǎo)致的狹隘興趣、刻板行為、言語發(fā)育障礙及人際交往障礙[1-2]，發(fā)病一般起始于嬰幼兒期，全球的發(fā)病率為1%～2%。同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是一種具有細(xì)胞毒性的含硫氨基酸，為蛋氨酸和半胱氨酸的代謝中間產(chǎn)物，而維生素B12和葉酸是Hcy代謝過程中必需的輔助因子[3]，兩者可直接影響Hcy水平。研究顯示，維生素B12與機(jī)體的神經(jīng)發(fā)育具有一定的關(guān)聯(lián)性[4]，因此推測其可能與ASD有關(guān)。本研究旨在探討ASD患兒血清維生素B12、Hcy水平及其與病情嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年1月至2019年12月在宜昌市婦幼保健院診治的60例ASD患兒作為觀察組，其中男性41例、女性19例，年齡3～12(6.93±2.04)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)參照《精神疾病診斷和統(tǒng)計(jì)手冊:第5版》[5]中的標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)孤獨(dú)癥診斷訪談量表修訂版和孤獨(dú)癥診斷觀察量表明確診斷；(2)年齡≤12歲；(3)初次確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)遺傳性疾病家族史患兒；(2)癲癇發(fā)作史患兒；(3)惡性腫瘤患兒；(4)頭部外傷史患兒；(5)嚴(yán)重心腦功能障礙患兒；(6)免疫系統(tǒng)疾病患兒；(7)近期服用過甲氨蝶呤、磺胺類等影響結(jié)果的藥物。另外選取同期在宜昌市婦幼保健院進(jìn)行體檢的60例健康兒童作為對照組，其中男性37例、女性23例，年齡3～11(6.78±2.11)歲。兩組兒童的年齡、性別分布差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過；納入兒童的家長對本研究知情并同意。

1.2 維生素B12和Hcy的檢測 對照組兒童于體檢時，觀察組患兒于入院后治療前，采集空腹靜脈血液3 mL，靜置20 min，3000 r/min離心15 min，獲取血清，-80℃保存待測，采用全自動免疫發(fā)光分析儀(雅培公司，型號：ARCHITECTI 2000SR)及配套試劑盒(批號：20171023、201810819)測定血清Hcy和維生素B12水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.3 ASD嚴(yán)重程度的評估標(biāo)準(zhǔn) 采用兒童期孤獨(dú)癥評定量表(Childhood Autism Rating Scale，CARS)[6]評估ASD患兒的嚴(yán)重程度。CARS共分為15個項(xiàng)目，分別是總體印象、活動水平、言語交流、視覺反應(yīng)、智力活動水平和一致性、聽覺反應(yīng)、情緒反應(yīng)、模仿、非言語交流、害怕或緊張、與他人的關(guān)系、味嗅覺和觸覺反應(yīng)、肢體動作、對變化的適應(yīng)、使用物體。每個項(xiàng)目得分分為1、2、3、4分，總分為60分，分?jǐn)?shù)越高，提示患兒的孤獨(dú)癥越嚴(yán)重，其中分?jǐn)?shù)>36分提示為重度孤獨(dú)癥，分?jǐn)?shù)為30～36分提示為輕中度孤獨(dú)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)(百分比)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以(x±s)表示，組間比較采用兩樣本t檢驗(yàn)或t＇檢驗(yàn)；采用Pearson檢驗(yàn)分析血清維生素B12、Hcy水平與ASD患兒CARS評分的相關(guān)性。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患兒血清維生素B12及Hcy水平的比較 相較于對照組，觀察組患兒的血清Hcy水平升高，維生素B12水平降低(均P<0.05)，見表1。

表1 兩組患兒血清維生素B12及Hcy水平的比較(x±s)

2.2 不同嚴(yán)重程度的ASD患兒血清維生素B12及Hcy水平的比較 60例ASD患兒中，重度24例，輕中度36例。相較于輕中度ASD患兒，重度ASD患兒的血清Hcy水平升高，維生素B12水平降低(均P<0.05)，見表2。

表2 不同嚴(yán)重程度的AD患兒血清維生素B12及Hcy水平的比較(x±s)

2.3 ASD患兒血清維生素B12、Hcy水平與CARS評分的相關(guān)性 ASD患兒CARS評分與血清維生素B12水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.592，P<0.001)，與血清Hcy水平呈正相關(guān)(r=0.724，P<0.001)。

3 討 論

ASD是一種神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病，臨床特征主要包括重復(fù)刻板的行為方式、語言溝通能力損傷、社會交往能力缺陷等[7]，其分為3個亞型，包括阿斯伯格綜合征、孤獨(dú)癥和未分類的廣泛性發(fā)育障礙。流行病學(xué)研究顯示，ASD的發(fā)病率逐年升高，男性患者多于女性患者，男女性患者比例為4 ∶1至5 ∶1[8]。ASD是一種由遺傳因素、環(huán)境因素等多因素共同作用的神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病[9]，異卵雙生子的同病率約為10%，同卵雙生子的同病率可高達(dá)60%～90%，孕期環(huán)境危險(xiǎn)因素主要包括暴露于農(nóng)藥、職業(yè)化學(xué)品、空氣污染、致畸劑等[10-11]。

Hcy是一種含有細(xì)胞毒性的含硫氨基酸，其可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并干擾胚胎細(xì)胞正常的生命周期[12]。正常生理狀態(tài)下機(jī)體中的Hcy處于動態(tài)平衡，但若其代謝途徑出現(xiàn)障礙，則會導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)的Hcy蓄積，誘發(fā)高同型半胱氨酸血癥。Hcy主要通過甲基化途徑和轉(zhuǎn)硫途徑這兩種途徑進(jìn)行代謝，其中甲基化途徑是以維生素B12作為輔酶，在S-腺苷甲硫氨酸合成酶的作用下，形成S-腺苷蛋氨酸；轉(zhuǎn)硫途徑是在胱硫醚合成酶的催化作用下，絲氨酸與Hcy縮合獲得胱硫醚，然后進(jìn)一步生成α-酮丁酸和半胱氨酸。Hcy自身能夠產(chǎn)生氧自由基和過氧化氫，還能抑制其他抗氧化酶的活性，加重脂質(zhì)過氧化反應(yīng)[13-14]。B族維生素如維生素B6、維生素B12及葉酸均對機(jī)體的神經(jīng)發(fā)育起著重要作用[15-16]。研究表明，B族維生素缺乏可增加機(jī)體罹患神經(jīng)疾病、神經(jīng)發(fā)育障礙及老年癡呆癥等疾病的風(fēng)險(xiǎn)性[17]。維生素B12又稱為鈷胺素，人體不能夠自身合成，主要依賴于動物食品的攝入，其作為輔酶能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)和核酸的生物合成，提高葉酸的利用率，進(jìn)而發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)的作用。本研究結(jié)果顯示，相較于對照組，觀察組患兒的血清Hcy水平升高，而血清維生素B12水平降低(均P<0.05)，提示血清Hcy水平升高以及維生素B12水平降低可能參與ASD的發(fā)病。

CARS于20世紀(jì)80年代由Schopler編制，被廣泛應(yīng)用于孤獨(dú)癥的篩查和診斷。根據(jù)該量表，本研究納入的60例ASD患兒中重度24例、輕中度36例。相較于輕中度ASD患兒，重度ASD患兒的血清Hcy水平升高，維生素B12水平降低(均P<0.05)；進(jìn)一步行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示ASD患兒CARS評分與血清維生素B12水平呈負(fù)相關(guān)，與血清Hcy水平呈正相關(guān)(均P<0.05)。這提示血清Hcy和維生素B12水平可能還與ASD患兒的嚴(yán)重程度相關(guān)。

綜上所述，ASD患兒的血清維生素B12水平降低而Hcy水平升高，兩者可能與ASD的發(fā)病及病情嚴(yán)重程度相關(guān)。