王小兵 王海潮 汪曉麗 陳悅 程通 付寬寬

摘要：本研究旨在篩選廚余垃圾高效腐熟降解菌。采用秸稈平板培養(yǎng)基、剛果紅培養(yǎng)基進(jìn)行菌株的初篩，利用秸稈降解試驗(yàn)、濾紙崩解試驗(yàn)以及酶活性的指標(biāo)進(jìn)行復(fù)篩。結(jié)果表明，通過(guò)初篩獲得了5株降解菌，其中菌株Y1、Y3的水解圈直徑（H）與菌落直徑（D）的比值（H/D）較大，分別為4.4、3.8，秸稈降解率分別達(dá)到42.50%、40.94%，而且2株菌株纖維素酶活性協(xié)同性較高。通過(guò)形態(tài)學(xué)和16S rDNA序列分析進(jìn)行菌株種屬的鑒定，菌株Y1、Y3均屬于芽孢桿菌菌屬（Bacillus），其中菌株Y1為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis），菌株Y3為貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis）。

關(guān)鍵詞：腐熟降解菌;纖維素酶活性;序列分析;芽孢桿菌

中圖分類號(hào)：S182;S141.4?? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2021）23-0213-06

收稿日期：2021-07-02

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（編號(hào)：41471236）;江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號(hào)：CX（20）3082、CX（17）3043];蘇州市科技計(jì)劃（編號(hào)：SNG2018088）。

作者簡(jiǎn)介：王小兵（1976—），男，江蘇東臺(tái)人，博士，副教授，主要從事有機(jī)固廢廢棄物資源化利用等研究。E-mail：xbwang@yzu.edu.cn。

廚余垃圾是指家庭、飯店以及各種餐飲機(jī)構(gòu)拋棄的剩菜剩飯的統(tǒng)稱[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)在“十三五”末廚余垃圾產(chǎn)生量達(dá)到1.5×105 t/d，預(yù)計(jì)“十四五”期間將達(dá)到2.0×105 t/d[2]。目前，廚余垃圾的處理方式主要有焚燒、填埋、粉碎直排、肥料制作[3]。其中，肥料制作是廚余垃圾資源化利用的主要方式之一。而好氧堆肥又是肥料化處理廚余垃圾的主要方法[4]。由于廚余垃圾含有大量纖維素，而纖維素具有復(fù)雜的分子結(jié)構(gòu)，很難被自然降解[5-6]，制約了堆肥腐熟的周期。相關(guān)研究結(jié)果表明，通過(guò)在堆肥中添加纖維素降解菌可以有效縮短堆肥腐熟的周期[7-8]。李雯等通過(guò)在玉米秸稈中加入纖維素降解菌使堆肥腐熟時(shí)間縮短3～5 d[7]。吳慶珊從羊糞中篩選出纖維素降解菌，將其加入羊糞中，縮短了堆肥腐熟周期[8]。目前，關(guān)于篩選廚余垃圾腐熟降解菌的報(bào)道較少。

本研究旨在篩選廚余垃圾腐熟降解菌，以提高廚余垃圾腐熟效率，為廚余垃圾資源化利用提供技術(shù)支持和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

菌株來(lái)源：樣品取自蘇州市傲龍環(huán)保有限公司廚余垃圾處理廠，取回的樣品放置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 主要培養(yǎng)基

赫奇遜氏無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液[9]：KH2PO4 0.5 g，NaCl 0.05 g，MgSO4·7H2O 0.15 g，NaNO3 1.25 g，F(xiàn)eCl3 0.005 g，CaCl2 0.05 g，蒸餾水500 mL，pH值7.2左右。

秸稈平板粉培養(yǎng)基：瓊脂粉9 g，小麥秸稈粉 5 g，赫奇遜氏無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液500 mL。

秸稈產(chǎn)酶培養(yǎng)基：水稻秸稈粉10 g，赫奇遜氏無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液500 mL。

濾紙崩解培養(yǎng)基[10]：1 cm×6 cm的濾紙條3條，KH2PO4 0.1 g，MgSO4·7H2O 0.04 g，（NH4）2SO4 0.3 g，酵母粉0.01 g，蒸餾水100 mL。

LB培養(yǎng)基：胰蛋白胨5 g，NaCl 5 g，酵母浸膏2.5 g，蒸餾水500 mL，pH值7.2。

以上培養(yǎng)基都在120 ℃下高溫滅菌30 min。

1.3 菌株初篩

取10 g低溫保存的堆肥于90 mL的無(wú)菌水中，放在（30 ℃，200 r/min）的恒溫振蕩箱中振蕩 30 min，取下后靜置10 min，取懸浮液1 mL，用無(wú)菌水稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5 5個(gè)梯度濃度，吸取100 μL 10-5梯度的稀釋液，均勻涂布于以秸稈為唯一碳源的秸稈平板培養(yǎng)基中。將培養(yǎng)基放在30 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d，選取菌落直徑較大的5株菌株進(jìn)行分離與純化，采用劃線法純化單菌落。將純化好的菌株涂布在斜面培養(yǎng)基中，置于30 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1 d，放于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

將純化好的菌株分別接種于羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基，放置于恒溫培養(yǎng)箱（30 ℃）中培養(yǎng)5 d，用 1 g/L 的剛果紅溶液染色20 min后棄去染液，再用1 mol/L的氯化鈉溶液洗滌30 min，根據(jù)透明圈直徑與菌落直徑的比值（H/D）初篩出產(chǎn)纖維素酶能力較強(qiáng)的菌株。

1.4 秸稈降解試驗(yàn)

將篩選出的產(chǎn)纖維素酶較強(qiáng)的菌株制成菌懸液，分別取10 mL菌懸液轉(zhuǎn)接至秸稈降解培養(yǎng)基中，在恒溫振蕩培養(yǎng)箱（30 ℃、160 r/min）中培養(yǎng)12 d后取出秸稈。用蒸餾水反復(fù)沖洗5次，80 ℃烘至恒質(zhì)量，每個(gè)處理做3個(gè)平行。秸稈的降解率按照減質(zhì)量法計(jì)算[11]：秸稈降解率=[原秸稈質(zhì)量（g）-烘干秸稈質(zhì)量（g）]/原秸稈質(zhì)量（g）×100%。

1.5 濾紙條崩解試驗(yàn)

將篩選得到的菌株制成菌懸液，分別將5 mL菌懸液轉(zhuǎn)接至濾紙條崩解培養(yǎng)基中，置于恒溫培養(yǎng)箱中（40 ℃，160 r/min）培養(yǎng)10 d，以未接種菌株的培養(yǎng)液做空白對(duì)照，觀察濾紙的崩解情況。

1.6 纖維素酶活性測(cè)定

1.6.1 粗酶液制備 選取秸稈降解能力較強(qiáng)的幾株菌株制成菌懸液，分別取10 mL菌懸液轉(zhuǎn)接至液體產(chǎn)酶培養(yǎng)液中，在恒溫培養(yǎng)箱（30 ℃，120 r/min）中連續(xù)培養(yǎng)15 d，每隔24 h取培養(yǎng)液8～10 mL，取出的培養(yǎng)液用0.45 μm的水系濾頭過(guò)濾，過(guò)濾液即為粗酶液。

1.6.2 酶活力測(cè)定 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線參照張冬雪等的方法[12]進(jìn)行繪制。

纖維素酶是多酶復(fù)合物，包含3種主要成分，即內(nèi)切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶，這3種酶活性的測(cè)定方法參考于慧娟等方法[13]。酶活力定義為1 mL原酶液每分鐘催化底物產(chǎn)生1 μg對(duì)硝基苯酚所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（μmol/mL）[14]。

1.7 菌株種屬鑒定

參照《伯杰氏菌株鑒定手冊(cè)（第8版）》《常見(jiàn)細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》和革蘭氏染色法，對(duì)菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定[15-16]。

參考Yu等的方法[17-18]提取細(xì)菌總DNA。正向引物為27F：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′，反向引物為1492R：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′。PCR反應(yīng)體系為20 μL，反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性5 min;95 ℃變性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸45 s，共28個(gè)循環(huán)。PCR產(chǎn)物經(jīng)純化后送至上海凌恩生物科技有限公司進(jìn)行測(cè)序。將測(cè)序得到的菌株DNA序列在NCBI中進(jìn)行Blast序列比較分析。用MEGA 7.0構(gòu)建菌株16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 堆肥中纖維素降解菌的初篩

從秸稈培養(yǎng)基中篩選出菌落直徑較大的5株菌株，分別命名為Y1、Y2、Y3、S1、C1。5株菌株在羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基中的透明圈直徑與菌落直徑的比值（H/D）見(jiàn)圖1、表1。其中菌株Y1的透明圈直徑與菌落直徑的比值（H/D）最大，二者之比達(dá)到了4.4，菌株Y2的透明圈直徑與菌落直徑的比值（H/D）最小，僅為1.8。通過(guò)對(duì)比選取透明圈直徑與菌落直徑比值（H/D）較大的4株菌株Y1、Y3、S1、C1進(jìn)行下一步研究。

2.2 秸稈降解試驗(yàn)

將初篩選出的4株菌株制成菌懸液，分別取 5 mL 的菌懸液接種到秸稈降解培養(yǎng)基中，培養(yǎng) 10 d，通過(guò)降解前后秸稈的質(zhì)量比，比較不同菌株對(duì)秸稈的降解效果。結(jié)果顯示，接種過(guò)菌株Y1、Y3的秸稈培養(yǎng)基中秸稈的降解效果最好，秸稈降解率分別達(dá)42.50%、40.94%。秸稈降解率較低的是菌株S1、C1，秸稈降解率分別為19.69%、16.31%（圖2）。

2.3 濾紙崩解試驗(yàn)

濾紙的降解情況可以體現(xiàn)出菌株產(chǎn)酶能力的強(qiáng)弱。從表2可以看出，培養(yǎng)10 d后，在接種了菌株Y1的培養(yǎng)基中，濾紙基本上被完全分解形成糊狀（++++），在接種了菌株Y3的培養(yǎng)基中濾紙崩解形成近似糊狀（+++），而接種了菌株S1、C1的培養(yǎng)基中，濾紙的崩解效果稍差，形成了若干不同大小的塊狀（++），作為對(duì)照的培養(yǎng)基中，濾紙基本上無(wú)任何變化（+）。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，篩選出的4株菌株都具有使濾紙崩解的能力，其中菌株Y1對(duì)濾紙的崩解效果最好，菌株Y3對(duì)濾紙的崩解效果次之，菌株S1、C1對(duì)濾紙的崩解效果較差。該結(jié)果與秸稈降解試驗(yàn)的結(jié)果完全符合，驗(yàn)證了秸稈降解結(jié)果的可靠性。

2.4 不同菌株纖維素酶活性測(cè)定

纖維素酶是多酶復(fù)合物，包含3種主要成分，即內(nèi)切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶[13]。將菌株Y1、Y3 、S1、C1制成菌懸液，分別接種至液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，培養(yǎng)15 d。分別測(cè)量4株菌株每天的外切葡聚糖酶活性、內(nèi)切葡聚糖酶活性和 β-葡萄糖苷酶活性。

從圖3可以看出，在連續(xù)15 d的培養(yǎng)過(guò)程中，4株菌株的外切葡聚糖酶活性在整體上都呈現(xiàn)出先增后降的趨勢(shì)， 在6 d時(shí)達(dá)到最大， 其中菌株Y1的

最大外切葡聚糖酶活性強(qiáng)于其他3株菌株，達(dá)到了21.54 μmol/mL，菌株Y3的最大外切葡聚糖酶活性僅低于菌株Y1，為 20.53 μmol/mL，較差的是菌株C1、菌株S1，它們的最大外切葡聚糖酶活性分別為13.31、10.80 μmol/mL。

從圖4可以看出，菌株Y1、菌株Y3的內(nèi)切葡聚糖酶活性在前6 d呈現(xiàn)不斷增加的趨勢(shì)，在6 d時(shí)達(dá)到峰值，分別為25.63、23.69 μmol/mL，隨后出現(xiàn)下降趨勢(shì)，這與它們的內(nèi)切葡聚糖酶活的變化趨勢(shì)相似。菌株S1在前13 d內(nèi)外切葡聚糖酶活呈現(xiàn)緩慢上升的趨勢(shì)，在13 d時(shí)達(dá)到最大，為33.41 μmol/mL，隨后快速下降，在達(dá)到最大值的2 d內(nèi)切葡聚糖酶活降為10.99 μmol/mL。菌株C1的內(nèi)切葡聚糖酶活在3 d達(dá)到最大，最大值為26.36 μmol/mL，隨后出現(xiàn)緩慢下降的趨勢(shì)。

從圖5可以看出，菌株Y1的β-葡萄糖苷酶活性的變化趨勢(shì)與它的內(nèi)、外葡聚糖酶活性的變化趨勢(shì)相似，即先增后降。在6 d時(shí)菌株Y1的β-葡萄糖苷酶活性達(dá)到最大，最大值為18.41 μmol/mL。菌株S1的β-葡萄糖苷酶活性在前6 d呈現(xiàn)緩慢上升趨勢(shì)，7 d 時(shí)達(dá)到最大值，最大值為10.70 μmol/mL，隨后開(kāi)始下降。在1～5 d，菌株C1的β-葡萄糖苷酶活性呈現(xiàn)緩慢上升的趨勢(shì)，6 d時(shí)酶活性相較于 5 d 時(shí)有了大幅度提高，在7 d時(shí)達(dá)到最大，最大值為 16.67 μmol/mL。相較于其他3株菌株，菌株Y3在整個(gè)試驗(yàn)周期中β-葡萄糖苷酶活性一直處于較低水平，但它的整個(gè)變化趨勢(shì)與它的內(nèi)、外葡聚糖酶活性相似，即先增后降，在6 d時(shí)達(dá)到最大，最大值為8.84 μmol/mL。

2.5 菌株形態(tài)學(xué)鑒定

通過(guò)秸稈降解試驗(yàn)、濾紙崩解試驗(yàn)和菌株酶活性的測(cè)定最終選出菌株Y1、菌株Y3進(jìn)行下一步形態(tài)學(xué)的鑒定。

對(duì)2種菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定，鑒定結(jié)果：菌株Y1為白色、表面粗糙不規(guī)則、邊緣不平整、不透明、難以挑取;菌株Y3近似圓形，白色、不透明、邊緣較平整、表面光滑、中間凸起、易挑取。革蘭氏染色結(jié)果全呈藍(lán)紫色，為革蘭氏陽(yáng)性菌。

2.6 菌株種屬鑒定

為了確定菌株Y1、Y3的分類學(xué)地位，將2株菌株測(cè)序得到的16S rDNA序列提交到NCBI進(jìn)行Blast比對(duì)，利用MEGA 7.O軟件中的鄰接法構(gòu)建2株菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。進(jìn)化樹(shù)構(gòu)建時(shí)使用嗜堿甲烷桿菌（Methanobacterium alcaliphilum，AB496639.1）作為外類群，其他近源物種的選擇通過(guò)Blast以及NCBI Taxonomy數(shù)據(jù)庫(kù)確定。從進(jìn)化樹(shù)來(lái)看，菌株Y1、Y3均屬于芽孢桿菌（Bacillus），其中菌株Y1與枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis strain YEBN5，MT372156.1）聚在同一支（圖6），菌株Y3 與貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis strain FZB42，NR_075005.2）進(jìn)化距離最近，聚在同一支（圖7）。在NCBI上提交菌株序列后獲得2株菌株的登錄號(hào)，分別為MW767002和MW757344。

3 討論與結(jié)論

目前，大部分纖維素降解菌在初篩過(guò)程中使用剛果紅染色法進(jìn)行初篩，這樣會(huì)造成菌落間的混雜以及假陽(yáng)性現(xiàn)象。本研究先用秸稈培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，再用剛果紅染色法進(jìn)一步篩選可以避免這一情況[13]。秸稈培養(yǎng)基初篩出的3株菌株透明圈直徑（H）與菌落直徑（D）的比值（H/D）都大于3，高于高雙喜等的研究結(jié)果[19-20]，表明腐熟的廚余垃圾有機(jī)肥中存在纖維素降解能力強(qiáng)的菌株。

通過(guò)初篩選出的4株菌株對(duì)秸稈的降解結(jié)果與對(duì)濾紙的崩解結(jié)果一致，說(shuō)明各菌株對(duì)濾紙的崩解效果可以反應(yīng)出各菌株的纖維素降解能力，其中效果較好的是菌株Y1、Y3。在纖維素酶活性測(cè)定中，菌株Y1的內(nèi)、外葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶活峰值均處于較高水平，分別為25.63、21.54、18.41 μmol/mL，本結(jié)果高于眾多已有報(bào)道[5，9]，王洪媛等篩選出2株纖維素降解菌W3和98MJ，它們的纖維素酶活性分別在4.17～9.46、 2.95～5.78 μmol/mL之間[9]。 張海艷等從土壤中篩選出2株菌株WL1、WL2，它們的纖維素酶活力分別為0.005 3、0.005 9 μmol/mL[5]。

在連續(xù)15 d的產(chǎn)酶試驗(yàn)周期中，可以發(fā)現(xiàn)4株菌株都具有內(nèi)切葡聚糖酶活性、外切葡聚糖酶活性和 β-葡萄糖苷酶活性，且4株菌株纖維素酶活性的變化趨勢(shì)相同，即先增后降。菌株Y1、菌株Y3的3種酶活性都在6 d時(shí)達(dá)到最大，而菌株S1、C1的3種酶活性峰值出現(xiàn)在不同的時(shí)間。菌株Y3的外切葡聚糖酶活性和β-葡萄糖苷酶活性小于菌株S1和C1，但它的秸稈降解結(jié)果和濾紙崩解結(jié)果都要強(qiáng)于菌株S1和C1，可能的原因是菌株Y3的3種酶活性峰值都出現(xiàn)在同一天，表明3種纖維素酶具有很強(qiáng)的協(xié)同作用，協(xié)同性越高菌株的纖維素降解能力越強(qiáng)[21]。

經(jīng)鑒定，菌株Y1、Y3都屬于芽孢桿菌屬（Bacillus）。其中，菌株Y1屬于枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis），具有較好的降解效果，這與周東興等的研究結(jié)果[22-23]一致;菌株Y3屬于貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis），該菌株是芽孢桿菌中的一個(gè)新種，屬于革蘭氏陽(yáng)性好氧細(xì)菌，菌體成桿狀，內(nèi)生孢子，具有廣普抗菌活性[24-25]。目前關(guān)于貝萊斯芽孢桿菌的研究主要集中在誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性、抑菌物質(zhì)及其基因簇鑒定、拮抗機(jī)制等方面[25-27]，在纖維素降解能力方面的研究報(bào)道較少。Chen等采用基因組學(xué)分析了24株貝萊斯芽孢桿菌，表明其對(duì)纖維素具有潛在的降解能力[28]。本次試驗(yàn)的研究結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)貝萊斯芽孢桿菌與其他降解菌株相比較具有較強(qiáng)的纖維素降解效果。

本研究篩選出的菌株Y1、菌株Y3均具有較強(qiáng)的纖維素降解能力，后期將研制以菌株Y1、菌株Y3為主的廚余垃圾腐熟降解復(fù)合菌劑，以提高廚余垃圾腐熟降解效率，為廚余垃圾無(wú)害化、資源化利用提供技術(shù)支持和理論依據(jù)。

本研究從腐熟的廚余垃圾堆肥中初篩選出5株纖維素降解菌，經(jīng)過(guò)秸稈降解試驗(yàn)、濾紙崩解試驗(yàn)以及3種酶活性的測(cè)定，確定菌株Y1、菌株Y3在篩選出的5株菌株中具有較強(qiáng)的纖維素降解能力。通過(guò)對(duì)菌株Y1、菌株Y3進(jìn)行形態(tài)學(xué)以及菌株種屬的鑒定，鑒定結(jié)果表明，2株菌株均屬于芽孢桿菌（Bacillus），其中菌株Y1屬于枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）、菌株Y3屬于貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis） 。

參考文獻(xiàn)：

[1]徐 棟，沈東升，馮華軍.廚余垃圾的特性及處理技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 科技通報(bào)，2011，27（1）：130-135.

[2]常燕青，黃慧敏，趙振振，等. 餐廚垃圾資源化處理與高值化利用技術(shù)發(fā)展展望[J]. 環(huán)境衛(wèi)生工程，2021，29（1）：44-51.

[3]魯 帥，張 紅，梁淑霞，等. 廚余垃圾處理現(xiàn)狀及建議[J]. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2017，23（16）：87-88.

[4]劉曉飛，鄭志輝，宋 潔，等. 纖維素的降解制備及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 食品工業(yè)，2020，41（2）：249-253.

[5]張海艷，王文磊，韓 錳.纖維素分解菌的篩選與鑒定[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2020，48（15）：1-3，8.

[6]李冠杰，劉瑩瑩，甄 靜，等. 一株降解纖維素細(xì)菌的分離、鑒定及酶學(xué)性質(zhì)分析[J]. 河南科學(xué)，2015，33（4）：530-534.

[7]李 雯，劉艷薇，李停鋒，等. 不同纖維素降解菌對(duì)玉米秸稈的降解效果[J]. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2020，29（2）：402-410.

[8]吳慶珊.纖維素降解菌篩選及其在羊糞堆肥發(fā)酵中的應(yīng)用[D]. 貴陽(yáng)：貴州師范大學(xué)，2018.

[9]王洪媛，范丙全.三株高效秸稈纖維素降解真菌的篩選及其降解效果[J]. 微生物學(xué)報(bào)，2010，50（7）：870-875.

[10]毛 婷，魏亞琴，張苗苗，等. 產(chǎn)纖維素酶混合菌發(fā)酵優(yōu)化及秸稈降解研究[J]. 飼料研究，2020，43（6）：56-62.

[11]耿麗平，薛培英，劉會(huì)玲，等. 促腐菌劑對(duì)還田小麥秸稈腐解及土壤生物學(xué)性狀的影響[J]. 水土保持學(xué)報(bào)，2015，29（4）：305-310.

[12]張冬雪，文亞雄，羅志威，等. 纖維素降解菌的分離篩選及其對(duì)水稻秸稈的降解效果分析[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2020，32（1）：72-76.

[13]于慧娟，郭夏麗.秸稈降解菌的篩選及其纖維素降解性能的研究[J]. 生物技術(shù)通報(bào)，2019，35（2）：58-63.

[14]李鵬飛，廖 奇，陶 楊，等. 一株纖維素降解菌的篩選、鑒定及對(duì)飼料粗纖維降解效果的研究[J]. 飼料工業(yè)，2020，41（12）：31-37.