周霞，張浩，尚丹，何麗

中國醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，沈陽110032

呼吸道感染性疾病是全世界最常見的疾病之一。引起呼吸道疾病的病原體種類繁多，主要有細(xì)菌、真菌、病毒、支原體、衣原體等。準(zhǔn)確、快速鑒別導(dǎo)致呼吸道感染的病原體，對于后續(xù)臨床治療藥物的選擇，避免抗生素的濫用具有重要臨床意義。呼吸道病毒是全世界各年齡組癥狀性呼吸道感染的主要原因之一［1］。目前，臨床常見的呼吸道病毒有流感病毒（Influenza virus）、呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）、人類巨細(xì)胞病毒（Human cytomegalovirus，HCMV）、腺病毒（Adenovirus，ADV）、EB 病毒（EB virus）和柯薩奇病毒（Coxsackie virus，COX）等，其中流感病毒又分為A 型流感病毒（Influenza A virus，AIV）、B 型流感病毒（Influenza B virus，BIV）、副型流感病毒（Parainfluenza virus，PIV）。病毒感染會(huì)因地理區(qū)域的氣候、環(huán)境、季節(jié)變化、生活習(xí)慣等不同而存在差異，因此調(diào)查特定地區(qū)病毒感染的變化特點(diǎn)，對呼吸道疾病的防治非常重要。目前臨床呼吸道病毒的檢測方法主要有培養(yǎng)法、血清學(xué)檢測法、核酸檢測法等。血清呼吸道病毒IgM 抗體檢測具有靈敏度高、操作簡便、成本低等優(yōu)點(diǎn)，可快速且相對準(zhǔn)確地檢測多種呼吸道病原體，目前已在臨床廣泛應(yīng)用［2-3］。本研究于2017年1月1日—2020年12月31日間采集了23 490例門診/住院疑似呼吸道感染患者的外周血，檢測8 種常見呼吸道病毒IgM 抗體，現(xiàn)對檢測結(jié)果進(jìn)行分析，探討導(dǎo)致呼吸道感染呼吸道病毒的流行病學(xué)特征，旨在為沈陽地區(qū)呼吸系統(tǒng)疾病的診療工作提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2017 年1 月1 日—2020 年12月31 日間在中國醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院就診的疑似呼吸道感染患者23 490 例?；颊咧心?2 570 例（53.51%）、女10 920例（46.49%），年齡1個(gè)月～105歲；來自于兒科、呼吸科、耳鼻喉科的門診及住院患者。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2 患者外周血呼吸道病毒IgM 抗體檢測 納入者均早晨空腹采集靜脈血3 mL，室溫下靜置20 min，3 500 r/min 離心5 min，采用ELISA 法檢測血清A型流感病毒IgM抗體（AIV IgM），B型流感病毒IgM抗體（BIV IgM），副型流感病毒IgM 抗體（PIV IgM），腺病毒IgM 抗體（ADV IgM），柯薩奇病毒IgM 抗體（COX IgM），人類巨細(xì)胞病毒IgM 抗體（HCMV IgM），呼吸道合胞病毒IgM 抗體（RSV IgM），EB 病毒殼抗原IgM 抗體（VCA IgM）。試劑為北京貝爾生物工程股份有限公司的體外診斷試劑盒，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 呼吸道病毒流行病學(xué)特征分析 本研究收集患者在本院第1 次檢測呼吸道病毒IgM 抗體的結(jié)果，排除第1 次檢測后的半年內(nèi)的檢測結(jié)果。收集納入者的臨床資料將患者分別按年份（2017 年、2018 年、2019 年、2020 年）、年齡（0～≤3 歲、4～≤6歲、6～≤18 歲、19～≤65 歲及65～≤105 歲）、性別（男性、女性）、季節(jié)（春季、夏季、秋季、冬季）等進(jìn)行分組，統(tǒng)計(jì)并比較各組常見8 種呼吸道病毒IgM 抗體陽性率，分析不同年份、季節(jié)、年齡和性別的患者呼吸道病毒的流行病學(xué)特征。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料以%表示，兩組間陽性率的比較采用χ2檢驗(yàn)，多組間兩兩比較采用χ2檢驗(yàn)分割法。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2017 年—2020 年沈陽地區(qū)患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性情況 23 490 例患者中檢出呼吸道病毒IgM 抗體陽性5 750 例（24.49%，5 750／23 490）。其中PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM 抗體陽性率分別為7.26%（1 706/23 490）、4.01%（942/23 490）、3.90%（916/23 490）、3.52%（826/23 490）、2.93%（688/23 490）、1.76%（413/23 490）、1.03%（241/23 490）、0%（18/23 490）。

2.2 2017 年—2020 年沈陽地區(qū)不同年份患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性率比較 2017、2018、2019、2020 年患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性率分別為24.16%（1 495/6 189）、29.09%（1 909/6 563）、22.98%（1 663/7 238）及19.51%（683/3 500）。兩兩比較，P 均＜0.05。

2017 年患者PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM 抗體陽性率分別為7.46%（462/6 189）、4.41%（273/6 189）、3.46%（214/6 189）、2.91%（180/6 189）、3.96%（245/6 189）、1.01%（63/6 189）、0.73%（45/6 189）、0.2%（13/6 189）。2018年患者PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM 抗體陽性率分別為5.61%（368/6 563）、4.77%（313/6 563）、9.58%（629/6 563）、3.78%（248/6 563）、3.35%（220/6 563）、0.69%（45/6 563）、1.31%（86/6 563）、0%（0/6 563）。2019 年患者PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM 抗體陽性率分別為9.08%（657/7 238）、3.59%（260/7 238）、0.86%（62/7 238）、3.58%（259/7 238）、2.06%（149/7 238）、2.79%（202/7 238）、1%（72/7 238）、0%（2/7 238）。2020 年患者PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM 抗體陽性率分別為6.26%（219/3 500）、2.74%（96/3 500）、0.31%（11/3 500）、3.97%（139/3 500）、2.11%（74/3 500）、2.94%（103/3 500）、1.09%（38/3 500）、0%（3/3 500）。不同年份間PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM 抗體陽性率比較差異具有有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2分別為67.71、30.29、868.03、10.29、54.67、136.46、10.87，P均＜0.05）。

2.3 2017 年—2020 年沈陽地區(qū)男、女患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性率比較 男、女患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性率分別為24.14%（3 035/12 570）、25.3%（2763/10 920），二者比較，P＜0.05。男性患者PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM抗體陽性率分別為7.08%（890/12 570）、3.86%（485/12 570）、4.03%（507/12 570）、3.70%（465/12 570）、2.78%（349/12 570）、1.71%（215/12 570）、0.93%（117/12 570）、0%（7/12 570）。女性患者PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM 抗體陽性率分別為7.47%（816/10 920）、4.12%（457/10 920）、3.83%（418/10 920）、3.66%（400/10 920）、3.10%（339/10 920）、1.81%（198/10 920）、1.14%（124/10 920）、0%（11/10 920）。男、女患者8 種病毒IgM抗體陽性率間比較，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.4 2017 年—2020 年沈陽地區(qū)不同年齡層患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性率比較 0～≤3 歲、4～≤6歲、7～≤18 歲、19～≤65 歲及66～≤105 歲患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性率分別為16.36%（552/3 375）、17.33%（346/1 997）、18.08%（234/1 296）、25.74%（2 370/9 209）、29.53%（2 248/7 613）。兩兩比較，P均＜0.05。

0～≤3 歲患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSV IgM 抗體陽性率分別為0.06%（2/3 375）、0.74%（25/3 375）、0.86%（29/3 375）、3.56%（120/3 375）、2.9%（101/3 375）、5.07%（171/3 375）、1.45%（49/3 375）、1.63%（55/3 375）。4～≤6 歲患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSVIgM 抗體陽性率分別為0.1%（2/1 997）、0.65%（13/1 997）、3.15%（63/1 997）、3.51%（70/1 997）、2.1%（42/1 997）、4.06%（81/1 997）、0.25%（5/1 997）、3.51%（70/1 997）。7～≤18 歲患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSV IgM 抗體陽性率分別為0.15%（2/1 296）、0.69%（9/1 296）、4.17%（54/1 296）、2.70%（35/1 296）、2.47%（32/1 296）、3.63%（47/1 296）、0.39%（5/1 296）、3.86%（50/1 296）。19～≤65 歲患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSV IgM 抗體陽性率分別為0.06%（6/9 209）、3.78%（348/9 209）、10.59%（975/9 209）、1.15%（106/9 209）、2.62%（241/9 209）、3.53%（325/9 209）、0.89%（82/9 209）、3.12%（287/9 209）。66～≤105 歲患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSV IgM 抗體陽性率分別為0.07%（6/7 613）、5.66%（431/7 613）、7.68%（585/7 613）、1.08%（82/7 613）、3.57%（272/7 613）、4.18%（318/7 613）、1.31%（100/7 613）、5.96%（454/7 613）。不同年齡組間BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSVIgM 抗體陽性率比較差異具有有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2分別為381.44、473.56、20.06、54.67、17.24、30.96、148.84，P均＜0.05）。

2.5 2017 年—2020 年沈陽地區(qū)不同季節(jié)患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性率比較 春、夏、秋、冬季患者呼吸道病毒IgM 抗體陽性率分別為25.78%（1 448/5 617）、26.2%（1 335/5 096）、22.4%（1 289/5 821）、24.2%（1 676/6 926）。

春季患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSVIgM 抗體陽性率分別為0%（3/5 617）、3.56%（200/5 617）、7.82%（439/5 617）、1.66%（93/5 617）、2.55%（143/5 617）、3.99%（224/5 617）、0.94%（53/5 617）、5.22%（293/5 617）。夏季患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSVIgM 抗體陽性率分別為0%（1/5 096）、3.89%（198/5 096）、7.01%（357/5 096）、1.55%（79/5 096）、2.94%（150/5 096）、3.96%（202/5 096）、1.12%（57/5 096）、5.71%（291/5 096）。秋季患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSVIgM抗體陽性率分別為0.1%（7/5 821）、2.97%（173/5 821）、5.94%（346/5 821）、1.77%（104/5 821）、3.08%（179/5 821）、4.35%（253/5 821）、0.94%（55/5 821）、2.95%（172/5 821）。冬季患者AIV、BIV、PIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSVIgM抗體陽性率分別為0.1%（7/6 926）、3.67%（254/6 926）、8.14%（564/6 926）、1.98%（137/6 926）、3.12%（216/6 926）、3.80%（263/6 926）、1.08%（75/6 926）、2.31%（60/6 926）。不同季節(jié)患者BIV、PIV、HCMV、RSVIgM 抗體陽性率比較差異具有有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2分別為7.95、26.02、9.15、131.17，P均＜0.05）。

3 討論

呼吸道病毒是全世界各年齡組癥狀性呼吸道感染的主要原因，在5歲以下兒童中，全球每年僅因流感和RSV 死亡的總?cè)藬?shù)達(dá)到30 萬［4］。呼吸道病毒通過三種不同的傳播途徑傳播：接觸傳播、飛沫傳播和氣溶膠傳播，宿主群體的大小、免疫狀況、年齡結(jié)構(gòu)和接觸率影響病毒的傳播模式，導(dǎo)致急性自限性感染［5-6］。呼吸道病毒感染人體后，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，其中IgM 抗體可作為呼吸道病毒感染的重要指標(biāo)。本研究回顧分析了2017—2020 年我院住院/門診患者外周血8 種常見呼吸道病毒IgM 檢測結(jié)果，其中AIV、BIV、PIV、ADV、COX、HCMV、RSV、VCAIgM陽性率分別為0%、3.52%、7.26%、2.93%、4.01%、1.03%、3.90%、1.76%，這說明BIV、PIV、ADV、COX、RSV 是我院附近區(qū)域病毒引起的呼吸道感染的主要病原體，其中PIV 陽性率最高，可能是遼寧地區(qū)最流行的呼吸道病毒，而AIV基本不流行。呼吸道病毒的流行存在地域差異，比如我國廣東惠東地區(qū)主要是B型流感病毒和呼吸道合胞病毒［7］，廣西地區(qū)主要是副型流感病毒［8］，開封和蘇州地區(qū)主要是呼吸道合胞病毒［9-10］，北京地區(qū)主要是B 型流感病毒［11］。而且國外也有報(bào)道［12-13］顯示，不同地區(qū)呼吸道病毒感染的陽性率不同。這與不同地區(qū)氣候、生活習(xí)慣、遺傳差異等因素密切相關(guān)。但本研究結(jié)果顯示每年流行的主要病毒不同，其中PIV、RSV、EB 病毒變化最明顯，RSV 是2018 年主要流行的呼吸道病毒；EB 病毒主要在2019 和2020 年流行；PIV 是本地區(qū)主要流行病毒，2018年感染率最低，2019 年最高。這提示病毒流行有地域差異及年份差異，但由于標(biāo)本量及統(tǒng)計(jì)年限問題，可能對分析結(jié)果有影響，所以為了明確是否有地域差異后續(xù)應(yīng)進(jìn)一步擴(kuò)大時(shí)間范圍，并且收集多地區(qū)數(shù)據(jù)同時(shí)進(jìn)行比較。

本研究對患者基本情況和病毒感染情況進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，男、女患者的總感染陽性率分別為24.14%和25.3%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明可能女性比男性更容易感染呼吸道疾??；但男、女患者在8種病毒抗體的陽性率之間無明顯區(qū)別，說明呼吸道病毒感染無性別差異，這與我國其他地區(qū)的報(bào)道一致［14］。同時(shí)，分析年齡對病毒感染的影響，結(jié)果顯示8 各種病毒感染陽性率在不同年齡組間比較有差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，成年人的陽性率明顯高于未成年人。其中BIV 主要是成年人感染，年齡越大的組感染率越高；PIV 在0～3 歲患者中最低，18～65歲患者中最高；EB 病毒在未成年人中感染率比成年人高；ADV、COX、HCMV 隨年齡變化的差異不明顯，ADV 在66～≤105歲患者中最高，COX、HCMV 在0～3 歲患者中最高；RSV 在0～3 歲患者中最低，66～≤105 歲患者最高。不同年齡組感染病毒的高峰不同［15］。但有報(bào)道［8］顯示，呼吸道合胞病毒未成年人比成年人高，而且呼吸道合胞病毒分型不同易感性也不同。本研究未對病毒進(jìn)行分型，所以結(jié)果可能存在一定差異。兒童及老年人抵抗力比較弱，所以一般感染的幾率比中青年要高，本研究結(jié)果顯示成年人感染率高于未成年人，可能是成年人活動(dòng)范圍廣泛，接觸的人群多，感染病毒的機(jī)率大造成的，也可能是由于本實(shí)驗(yàn)中未成年患者比成年人少，而且未成年免疫系統(tǒng)不完善，可能產(chǎn)生抗體的能力比成年人差，IgM 抗體檢出率低，所以導(dǎo)致成年人陽性率較高。

呼吸道病毒的流行不但有地域差異，與季節(jié)也有密切關(guān)系［6］。南方流感病毒主要在春季流行；HCMV 的流行主要發(fā)生在春季；PIV 疫情主要發(fā)生在春季和秋季；RSV 主要流行于冬春季節(jié)［16］。本研究結(jié)果顯示，BIV、PIV、HCMV、RSV 在不同季節(jié)間陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中PIV 陽性率冬季（12～2月）最高，秋季（9～11月）最低；BIV感染秋季最低；HCMV 感染春（3～5 月）、秋季較少發(fā)生；RSV病毒的感染陽性率主要發(fā)生在夏季（6～8 月）和春季，秋冬季感染率下降。地理區(qū)域的氣候、環(huán)境、季節(jié)變化造成南北兩地呼吸道病毒流行特征的差異。

綜上所述，沈陽地區(qū)門診/住院患者的呼吸道病毒感染以PIV、COX、RSV、BIV、ADV 感染為主。2018 年門診/住院患者呼吸道病毒感染以RSV 病毒感染為主，2019、2020 年以EB 病毒感染為主。沈陽地區(qū)呼吸道病毒種類分布在呼吸道感染患者中不受性別影響。未成年患者中EB病毒感染較多，成年患者中BIV、PIV、RSV 感染多見。BIV、PIV、RSV 感染具有季節(jié)性，不同季節(jié)主要流行的呼吸道病毒感染不同，PIV 感染主要集中在冬季，夏季較少發(fā)生；BIV感染秋季最低；HCMV 感染春、秋季較少發(fā)生；RSV感染主要發(fā)生在春、夏。臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)患者的臨床癥狀，結(jié)合呼吸道病毒的流行特征合理用藥。但本研究存在一定局限性，采用ELISA 法檢測IgM 抗體來進(jìn)行病毒感染鑒定，檢測的靈敏度、準(zhǔn)確性要低于病毒DNA 或RNA 檢測。另外，本研究收集的病例范圍有一定局限性，未成年患者樣本比成年患者樣本例數(shù)少，應(yīng)擴(kuò)大樣本范圍，使研究結(jié)果更準(zhǔn)確。