李晗 張廣平 陳騰飛 高云航 宋玲 侯紅平 葉祖光

摘要 訶子與草烏均為傳統(tǒng)的常用蒙藥，在蒙醫(yī)藥諸多經(jīng)典著作中均有記載。訶子因在蒙藥中使用率最高，而被譽(yù)為“蒙藥之王”。草烏在蒙藥中也有更為悠久的用藥歷史和廣泛的用途。蒙醫(yī)在臨床治療過程中用草烏必配合訶子，多以訶子湯炮制草烏入丸散劑，或多以配伍藥對(duì)形式入煎劑?，F(xiàn)就蒙藥中訶子與草烏的概況及訶子與草烏配伍減毒增效的機(jī)制進(jìn)行綜述，為蒙藥的毒性研究與用藥安全提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞 蒙藥;訶子;草烏;成分;炮制減毒;配伍減毒;減毒增效

Abstract Terminalia chebula and Aconitum kusnezoffii are both traditional Mongolian medicinal materials，recorded in many classic works of Mongolian medicine.Terminalia chebula is known as “the king of Mongolian medicinal material” because of its highest usage rate in Mongolian medicine.At the same time，Aconitum kusnezoffii also has a long history and it is versatile in Mongolian medicine.Mongolian medicine practitioners use Aconitum kusnezoffii together with Terminalia chebula：mostly prepare the later with the soup of the former to make it into pills or powder，or prescripted in pairs in certain decoctions.In this paper，the current research of Terminalia chebula and Aconitum kusnezoffii in Mongolian medicine and the mechanism of reducing toxicity and increasing efficiency of compatibility were reviewed to provide theoretical basis for the toxicity research and drug safety of Mongolian medicine.

Keywords Mongolian medicinal material; Terminalia chebula; Aconitum kusnezoffii; ingredients; Processed to decrease toxicity; Compatibility reducing toxicity; Reducing toxicity and increasing efficiency

中圖分類號(hào)：R282文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.24.025

蒙醫(yī)藥學(xué)作為我國(guó)四大民族醫(yī)藥之一，是蒙古族人民在長(zhǎng)期日常生活與疾病斗爭(zhēng)過程中積累的特色醫(yī)藥學(xué)理論與用藥方法?，F(xiàn)階段，不僅只在蒙古族內(nèi)部，蒙藥也逐漸應(yīng)用于全國(guó)各地。與此同時(shí)，有關(guān)蒙藥安全性問題是廣大醫(yī)患共同關(guān)注的焦點(diǎn)，相關(guān)蒙藥安全用藥的研究也呈現(xiàn)逐年遞增的趨勢(shì)。在蒙藥中，訶子與草烏這兩味藥材使用率極高，據(jù)現(xiàn)有資料記載，訶子這味藥材出現(xiàn)在近半數(shù)蒙藥中，譽(yù)有“蒙藥之王”;同時(shí)具有祛風(fēng)、除濕、散寒、止痛功效，用于治療心“赫如虎”“赫依”“陶賴”和游痛癥等疾病的草烏類蒙藥也是蒙醫(yī)臨床常用藥。

1 訶子藥理研究

訶子（Terminalia chebula），又名訶黎勒，蒙醫(yī)學(xué)上稱為阿如拉（Arura），為使君子科植物訶子（Terminalia chebula Retz.），或絨毛訶子（Terminalia chebula Retz.Var.tomentella Kurt.）的干燥成熟果實(shí)。顏色多為暗棕色或黃棕色，形狀多為卵圓形或長(zhǎng)圓形，味道酸澀后甘甜。訶子因在蒙藥中使用率最高，而被譽(yù)為“蒙藥之王”，內(nèi)蒙古藥材標(biāo)準(zhǔn)有70個(gè)（48.3%）蒙藥含有訶子[1]。蒙醫(yī)理論認(rèn)為，訶子具有強(qiáng)壯補(bǔ)命脈、助消化、健胃等作用，可祛三弊引起的諸疾，調(diào)理體素，解毒，適用于治療赤巴病、培根病等。

1.1 訶子化學(xué)成分

1.1.1 鞣質(zhì)和酚酸類化合物 訶子化學(xué)成分豐富，從中能分離到多種化學(xué)成分，按結(jié)構(gòu)分類主要分為鞣質(zhì)類、酚酸類和三萜等化合物。其中鞣質(zhì)類成分占訶子干重的23.6%～37.36%[2]，其鞣質(zhì)結(jié)構(gòu)單元為沒食子酸與葡萄糖。主要成分為訶子酸（Chebulinic Acid）、訶黎勒酸（Chebulagic Acid）、1，2，3，4，6-五沒食子酰葡萄糖（1，2，3，4，6-pentagalloyl-β-glucose）、鞣云實(shí)素（Corilagin）、1，3，6-三沒食子酰葡萄糖（1，3，6-trigalloyl-β-glucose）、原訶子酸（Terchebin）、并沒食子酸即鞣花酸（Ellagic acid）和沒食子酸（Gallic acid）。

三萜類化合物：訶子中的三萜類多以五環(huán)三萜及其苷類成分為代表。主要有阿江欖仁素（Arjungenin）、阿江欖仁酸（Arjunic acid）、馬斯里酸（Maslinic acid）、訶子醇（Chebuloside）、2α-羥基馬可莫酸（2α-Hydroxymicromeri acid）和粉蕊黃楊醇酸（Terminoic acid）等[3]。

1.2 訶子藥理作用

訶子為我國(guó)民間用藥中的常用藥，能治療多種疾病。在蒙藥中，素有“蒙藥之王”的稱號(hào)，同時(shí)，在藏藥中也冠有“藥中之王”的美譽(yù)。現(xiàn)代研究表明，訶子具有抗菌、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤和保肝等多種藥理作用。

1.2.1 抗菌作用 訶子對(duì)常見的革蘭陰性菌和革蘭陽性菌均有明顯抑制作用，為廣譜抗菌藥。訶子水提液最小抑菌濃度（Minimal Inhibit Concentration，MIC）為125 mg/L，最小殺菌濃度（Minimum Bactericidal Concentration，MBC）為150 mg/L[4]。并且訶子水提液對(duì)各種痢疾桿菌具有良好的抗菌作用，除此之外訶子水提液對(duì)綠膿桿菌、白喉?xiàng)U菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、溶血性鏈球菌、鼠傷寒桿菌和變形桿菌也具有較強(qiáng)的抑菌效果。王雙等[5]利用微波法提取訶子中抗菌物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)訶子的微波提取物對(duì)白色念珠菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有抑制作用，但對(duì)黑曲霉無影響，其抑菌作用大小依次為白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、黑曲霉。李永慧等[6]利用生物被膜誘導(dǎo)模型技術(shù)研究訶子對(duì)生物被膜態(tài)金葡菌的抑制作用機(jī)制，結(jié)果顯示訶子能對(duì)生物被膜態(tài)的金葡菌實(shí)現(xiàn)有效殺傷，表明訶子水提物能夠滲透金葡菌生物被膜從而發(fā)揮作用，并且這種抑制作用具有劑量依賴性。

1.2.2 抗氧化作用 現(xiàn)代藥理研究表明，訶子具有強(qiáng)抗氧化活性，能夠通過脂質(zhì)過氧化過程、清除自由基等多個(gè)途徑發(fā)揮抗氧化作用。同時(shí)報(bào)道顯示，訶子水提物、醇提物和乙酸乙酯萃取物均具有較強(qiáng)的抗氧化活性，并且其抗氧化作用也較為全面。吳士云等[7]分別以鐵離子還原/抗氧化能力（Ferric Ion Reducing Antioxidant Power，F(xiàn)RAP）和1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl Radical 2，2-Diphenyl-1-（2，4，6-trinitrophenyl） hydrazyl，DPPH）自由基清除能力為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)訶子粗提物進(jìn)行抗氧化活性的測(cè)定。結(jié)果顯示，訶子提取物抗氧化能力極強(qiáng)，其活性物質(zhì)含量以FeSO4·7H2O當(dāng)量計(jì)達(dá)（4 422.325±123.56）mmol/g，并且訶子提取物也表現(xiàn)出較高DPPH自由基清除能力，清除率達(dá)到（90.12±1.388）%。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)訶子乙酸乙酯相相較于其他組分（正己烷相、正丁醇相和水相）抗氧化能力最強(qiáng)，表明訶子抗氧化活性成分多集中在乙酸乙酯部位，主要由弱極性化合物所貢獻(xiàn)。謝金炎等[8]通過測(cè)定小鼠血清中單胺氧化酶（MAO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、總抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity，T-AOC）的含量，以及小鼠肝臟中MAO、MDA和脂褐素（Lipofuscin，LF）的含量，并進(jìn)行小鼠肝臟組織病理學(xué)檢查。結(jié)果顯示，訶子能夠降低肝臟和血清中MAO、MDA含量和肝臟中LF含量，并且提高小鼠血清中T-AOC和SOD含量。以上結(jié)果表明，訶子對(duì)小鼠有明顯的抗氧化作用。

1.2.3 抗腫瘤作用 現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，訶子中主要含有鞣質(zhì)、酚酸類成分和三萜類成分，如訶子酸、阿江欖仁素和沒食子酸等，可在臨床預(yù)防和治療癌癥過程中發(fā)揮極為重要的作用。其中訶子提取物的主要成分沒食子酸，作為一種天然存在的多酚類化合物，具有減緩細(xì)胞增殖速率的能力，減少永生化及癌細(xì)胞系的細(xì)胞數(shù)量的作用[9]。研究顯示，沒食子酸抑制腫瘤細(xì)胞增殖的主要機(jī)制可能與抑制與腫瘤生長(zhǎng)相關(guān)的核苷酸還原酶與環(huán)氧合酶、DNA聚合酶、鳥氨酸脫氫酶等有關(guān)[10]。

2 草烏藥理與毒理研究

草烏（Aconitum kusnezoffii）為毛茛科植物北烏頭（Aconitum kusnezoffii Reichb.）的干燥塊根，其在中醫(yī)與蒙醫(yī)均有使用。相較于中醫(yī)，草烏在蒙醫(yī)中有著更為悠久的應(yīng)用歷史、更為廣泛的用途和獨(dú)特的用藥特點(diǎn)。蒙醫(yī)認(rèn)為，草烏具有殺“黏”，止痛，燥“協(xié)日烏素”等功效，臨床用于治療慢性疾病，以及治療心“赫如虎”“赫依”、脖頸僵直、“陶賴”、游痛癥等疾病[11]。根據(jù)中華人民共和國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)（蒙藥分冊(cè)）記載[12]，在145個(gè)蒙藥中含草烏成分的有20個(gè)（13.8%）。

2.1 草烏的化學(xué)成分

蒙藥草烏中含有的化學(xué)成分復(fù)雜多樣，主要包括生物堿類成分和非生物堿類成分兩大類型[13]。

2.1.1 生物堿成分 生物堿成分既是藥理成分也是毒性成分，其分為單酯型二萜類生物堿和雙酯型二萜類生物堿[14]。生物堿成分根據(jù)毒性大小排序依次為毒性較強(qiáng)的雙酯型烏頭堿（Aconitine）、新烏頭堿（Mesaconitine）和次烏頭堿（Hypaconitine）;毒性較小的單酯型苯甲酰烏頭堿（Benzoylaconitine），以及幾乎無毒性的烏頭原堿（Aconine）。草烏類藥材通過水煮、加熱等處理，可使雙酯型烏頭堿水解，失去一分子醋酸，轉(zhuǎn)化為毒性較弱的單酯型苯甲酰烏頭堿，隨后苯甲?；M(jìn)一步水解，失去一分子苯甲酸，分解為幾乎無毒性的烏頭原堿[15]。

2.1.2 非生物堿成分 蒙藥草烏中也包含多種非生物堿成分，如糖類，其中包括葡萄糖（Glucose）、木糖（Xylose）、甘露糖（Mannose）和半乳糖（Galactose），其中甘露糖的含量較高，占總糖的78.27%[16-17]。黃酮類成分，如山柰酚（Kaempferol）、槲皮素（Quercetin）、蘆?。≧utin）等[18]。此外還有揮發(fā)性成分，如脂肪酸及其酯類與胺類化合物[19]。同時(shí)研究者也分離得到了甾醇類化合物如豆甾醇、谷甾醇和胡蘿卜苷等[20]。

2.2 草烏的藥理作用

2.2.1 鎮(zhèn)痛作用 當(dāng)代臨床用藥過程中，草烏應(yīng)用范圍廣泛，可用于治療風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、外傷等引起的腰背、四肢、關(guān)節(jié)疼痛。研究發(fā)現(xiàn)，烏頭類生物堿是鎮(zhèn)痛的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，具有鎮(zhèn)痛效果強(qiáng)且無成癮性的特點(diǎn)。當(dāng)前研究者已經(jīng)開發(fā)出草烏甲素（Bulleyaconitine A）、雪上一枝蒿甲素（Bullatine A）、高烏甲素（Lappaconitine）等，并已在臨床中廣泛應(yīng)用[21-22]。草烏甲素作為一種生物堿類現(xiàn)代植物藥，已被《中華人民共和國(guó)藥典》收錄，并作為第3類鎮(zhèn)痛藥用于臨床治療慢性疼痛達(dá)近40年[23]。草烏甲素主要提取自烏頭屬植物，草烏中也含有此類成分。研究發(fā)現(xiàn)該成分鎮(zhèn)痛效果十分顯著，對(duì)于大鼠注射角叉菜膠引起的腳踝腫脹和大鼠后足皮下注射甲醛引起的Ⅱ相疼痛，以及小鼠在醋酸致扭體實(shí)驗(yàn)和熱板實(shí)驗(yàn)中的疼痛反應(yīng)，皮下給予草烏甲素可產(chǎn)生良好的鎮(zhèn)痛或抑制作用，其效果是嗎啡的65倍、阿司匹林的7 200倍，且長(zhǎng)期應(yīng)用不會(huì)產(chǎn)生藥物依賴性[24]。

2.2.2 抗炎作用 研究發(fā)現(xiàn)，蒙藥草烏具有抗炎作用，這也是草烏類最早被發(fā)現(xiàn)且證實(shí)的藥理作用之一[25]。賴珍珍等[26]發(fā)現(xiàn)草烏可顯著降低蛋清致大鼠足跖腫脹的程度，具有顯著的抗炎作用，該作用機(jī)制可能是減少足跖腫脹大鼠血清中前列腺素E2（Prostaglandin E2，PGE2）、白細(xì)胞介素-1（Interleukin-1，IL-1）和腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）含量，降低炎癥部位毛細(xì)血管通透性，從而產(chǎn)生抗炎的作用。張宏等[27]發(fā)現(xiàn)草烏能顯著抑制二甲苯所致小鼠耳郭腫脹程度，并減輕蛋清所致大鼠足跖腫脹程度，且可抑制巴豆油致大鼠炎性肉芽腫的增生程度，同時(shí)減少炎性滲出液。

2.2.3 強(qiáng)心作用 早在20世紀(jì)80年代，我國(guó)學(xué)者劉世芳和楊毓章[28]以心電圖變化為指標(biāo)，通過研究烏頭堿和北烏頭堿對(duì)幾種藥物引起心電圖變化的影響，得出該類成分在小劑量具有增強(qiáng)腎上腺素、對(duì)抗氧化鈣引起的波倒置，對(duì)抗垂體后葉引起的初期ST段上升和繼之發(fā)生的ST段下降等作用。馬增春[29]通過檢測(cè)烏頭堿對(duì)心肌細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)與功能影響，發(fā)現(xiàn)低劑量烏頭堿通過激活沉默信息調(diào)節(jié)蛋白3（Silencing Information Regulator 3，Sirt3），從而降低親環(huán)蛋白（Cyclophilin-D，Cyp-D）乙?；某潭?，并進(jìn)一步減少線粒體腺苷酸轉(zhuǎn)移酶（Adenine Nucleotide Translocase，ANT）和Cyp-D的結(jié)合，縮短線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔（Mitochondrial Permeablity Transition Pore，mPTP）的持續(xù)性開放時(shí)間，從而達(dá)到改善線粒體能量代謝的效果。

2.2.4 抗腫瘤作用 烏頭堿注射液主要用于抑制腫瘤生長(zhǎng)與自發(fā)轉(zhuǎn)移，臨床多用于治療晚期未經(jīng)化療、放療、手術(shù)的患者。該藥物具有增強(qiáng)患者免疫力，抑制腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移，并同時(shí)減輕患者的病痛等作用，且治療過程中產(chǎn)生不良反應(yīng)極少。張茜等[30]采用噻唑藍(lán)法，選取配體草烏多糖為對(duì)照，檢測(cè)4種草烏多糖金屬配合物（草烏多糖鈣RPS-Ca、草烏多糖鋅RPS-Zn、草烏多糖銅RPS-Cu、草烏多糖鐵RPS-Fe）對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞（HT-29）、乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）和肝癌細(xì)胞（HepG2）的抑制作用。結(jié)果表明，草烏多糖銅配合物對(duì)3種癌細(xì)胞表現(xiàn)出最強(qiáng)的抑制作用。

2.2.5 其他藥理作用 除以上藥理作用之外，草烏還具有抗氧化作用、抗衰老作用、增強(qiáng)免疫功能作用，并降低由化療而引起的外周神經(jīng)毒性，以及可能抑制艾滋病病毒作用[31-32]。

2.3 草烏的毒性作用

草烏是臨床常用的藥物之一。蒙醫(yī)認(rèn)為草烏味辛，性溫、輕;有大毒。研究顯示，生草烏水提液的LD50約為4.03 g/kg、草烏花水提液約為121.7 g/kg、草烏葉水提液約為125.3 g/kg和草烏芽水提液約為136.2 g/kg。根據(jù)世界衛(wèi)生組織毒性分級(jí)方法，認(rèn)定生草烏經(jīng)煎煮后仍具有低毒，服用時(shí)應(yīng)慎用。

2.3.1 神經(jīng)毒性作用 蒙藥草烏主要毒性代表成分為烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿。烏頭堿進(jìn)入體內(nèi)后，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)均產(chǎn)生刺激作用，作用顯現(xiàn)為中樞神經(jīng)及周圍神經(jīng)先被興奮隨后被抑制。具體臨床表現(xiàn)為心情煩躁、語言障礙、四肢麻木、頭暈、抽搐、昏迷等[33]。韓屾[34]采用胚胎大鼠海馬神經(jīng)元，研究草烏、川烏和附子這3味代表性的烏頭類中藥的神經(jīng)毒性。實(shí)驗(yàn)選擇不同濃度的草烏、川烏和附子提取物，分別處理胚胎大鼠海馬神經(jīng)元不同時(shí)間后，進(jìn)行細(xì)胞活性檢測(cè)。結(jié)果表明，生草烏IC50約為8.02 μg/μL，生川烏IC50約為17.5 μg/μL和生附子IC50約為22.04 μg/μL，這表明草烏、川烏和附子對(duì)體外海馬神經(jīng)元均有較明顯的細(xì)胞毒性，毒性強(qiáng)度依次為生草烏>生川烏>生附子。

2.3.2 心血管系統(tǒng)毒性作用 蒙藥草烏中毒多引發(fā)各種的心電圖異常改變，具體臨床表現(xiàn)為胸悶氣短、心慌心悸、心律失常、血壓下降等。并且草烏對(duì)心肌亦會(huì)產(chǎn)生影響，口服3 g的生草烏或0.2 mg的烏頭堿即可造成成人的心肌麻痹或者呼吸異常最終導(dǎo)致死亡。郝俊霞等[35]通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology，TCMSP）和毒性與基因比較數(shù)據(jù)庫（Comparative Toxicogenomics Database，CTD）篩選出草烏毒性候選成分，并通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析得出草烏主要通過參與心臟磷代謝，磷酸化等與磷酸相關(guān)的調(diào)節(jié)和代謝，以及通過胰島素受體（Insulin Receptor，INSR），肽脯氨酰順反異構(gòu)酶（Peptidyl-prolyl cis-trans Isomerase，PPIase）和重組人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β2（Transforming Growth Factor Beta-2，TGFB2）等靶點(diǎn)，影響了心臟的代謝，發(fā)育及形態(tài)，造成心臟毒性。溫玉瑩等[36]將黃草烏混懸液注射小鼠十二指腸進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與正常對(duì)照組比較，生黃草烏組心電圖的QRS波異常，心率明顯減慢，而制黃草烏組心電圖的QRS波較正常，心率無明顯變化。同時(shí)研究者選擇不同濃度滇烏堿作用于大鼠心肌細(xì)胞后，進(jìn)行心肌細(xì)胞活力檢測(cè);倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài);通過試劑盒進(jìn)行心肌細(xì)胞中乳酸脫氫酶（Lactic Dehydrogenase，LDH）、MDA和SOD的檢測(cè)。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，滇烏堿濃度的增加，大鼠心肌細(xì)胞的成活率下降;且滇烏堿和烏頭堿組均使心肌細(xì)胞LDH和MDA含量增加，SOD活性降低，提示此時(shí)心肌細(xì)胞出現(xiàn)氧化應(yīng)激損傷，推測(cè)滇烏堿和烏頭堿可能通過影響細(xì)胞通透性，破壞生物膜的穩(wěn)定性，并引發(fā)凋亡。

2.3.3 呼吸系統(tǒng)毒性作用 服用過量草烏可能會(huì)出現(xiàn)咳嗽、呼吸急促似哮喘、急性肺水腫，嚴(yán)重者可因呼吸衰竭而窒息，甚至引發(fā)死亡等一系列呼吸系統(tǒng)毒性癥狀。王金勇[37]選用了體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法，研究了生草烏及其主要毒性成分烏頭堿對(duì)呼吸系統(tǒng)的毒性作用。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在麻醉狀態(tài)下Beagle犬經(jīng)口插入胃管，并給予生草烏2.49 g生藥/kg，給藥后120 min、180 min和240 min，雄性Beagle犬的呼吸頻率增快、呼吸幅度加大，其與給藥前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;雌性Beagle犬在該時(shí)間點(diǎn)均無明顯變化。體外結(jié)果表明，烏頭堿組拖尾細(xì)胞尾長(zhǎng)和細(xì)胞率與陰性對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），并呈現(xiàn)量效關(guān)系，該結(jié)果表明說明烏頭堿對(duì)中國(guó)倉鼠肺成纖維細(xì)胞（CHL）的DNA有損傷作用。

3 蒙藥草烏常用減毒方法

3.1 炮制減毒 炮制，蒙語為“淖莫特哈勒”，意思是“馴服，使其順從也”。作為一項(xiàng)傳統(tǒng)的制藥技術(shù)，蒙藥炮制遵以蒙醫(yī)理論為依據(jù)，按照藥材自身性質(zhì)和用藥目的不同，對(duì)原料藥物所進(jìn)行的加工處理方法。炮制的根本目的在于降低毒性，提高療效，保證用藥安全。蒙藥草烏通過水煮加熱炮制，可極大程度減少草烏中的毒性成分。草烏水煮加熱后可使雙酯型烏頭堿水解，失去一分子醋酸，轉(zhuǎn)化為毒性較弱的單酯型苯甲酰烏頭堿，隨后苯甲?；M(jìn)一步水解，得到幾乎無毒性的烏頭原堿。同時(shí)，采用童尿法、酸奶法、訶子湯法炮制草烏均為蒙藥炮制的一大特色，其中臨床使用過程中訶子湯炮制草烏法較為常見。取訶子肉適量，粉碎后用大量清水浸泡過夜，回流煎煮、冷卻濾過后訶子湯備用。取生草烏，加上述制備訶子湯至沒過液面，浸泡，每日換液，共浸泡3 d，低溫烘干。劉帥等[38]通過小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)比較生草烏與訶子制草烏的粉末或水煎液急性毒性大小，結(jié)果顯示生草烏粉末、訶子制草烏粉末和訶子制草烏煎液的LD50分別為0.700 9、1.169 0和2.560 0 g/kg。表明生草烏毒性強(qiáng)，生草烏經(jīng)炮制后毒性降低。

3.2 用法滯毒 在蒙醫(yī)看來，疾病的產(chǎn)生、發(fā)展與患者個(gè)人作息、時(shí)節(jié)等生理活動(dòng)與生活習(xí)慣緊密相關(guān)。因此，在長(zhǎng)期的臨床治療過程中，蒙醫(yī)依據(jù)病癥特點(diǎn)、病癥發(fā)生部位以及活動(dòng)規(guī)律，遵從“擇時(shí)給藥”的服藥原則，開辟了傳統(tǒng)服藥法。例如，空腹服用、飯前服用、食中服用、飯后服用、兩餐間服用、摻食服用、藥膳交替服用、不定時(shí)反復(fù)服用和睡前服用等服藥方式。該方法希望可以通過調(diào)控服藥時(shí)間規(guī)律從而滯后藥物毒性，同時(shí)該方法也符合現(xiàn)代時(shí)辰藥理學(xué)的原理。例如蒙藥部頒標(biāo)準(zhǔn)服用含草烏這類毒性藥物，多應(yīng)在睡前服用，以便發(fā)揮滯后草烏毒性的作用[9]。

3.3 劑型緩毒 蒙藥也可采用劑型緩毒法，通過控制毒性藥物的攝入量，減緩有毒成分在體內(nèi)的蓄積，減輕毒性或不良反應(yīng)。含有草烏的蒙藥常用劑型多為丸劑，因丸劑吸收分解速度慢，可防止有毒成分過快或過量進(jìn)入機(jī)體，例如治療腫瘤的云香十五味丸;祛風(fēng)通竅，舒筋活血的扎沖十三味丸;以及治療腎寒腎熱諸證，腰膝疼痛的益腎十七味丸等。

3.4 配伍減毒 除了炮制減毒、用法滯毒和劑型緩毒之外，配伍減毒為蒙藥減毒的又一經(jīng)典方法。與中藥七情配伍相似，蒙醫(yī)方劑配伍理論始于《四部醫(yī)典》[39]，經(jīng)過歷代研究與實(shí)踐，形成了一套系統(tǒng)的具有民族特色的理論和方法。蒙藥配伍遵循整體性，關(guān)聯(lián)性等原則，通過藥物之間的相互影響與制約，不僅能降低毒性成分的毒性、銳（烈）性，調(diào)節(jié)藥方之寒熱性[40]，還可以擴(kuò)大藥物治療范圍，減少不良反應(yīng)，提高有毒蒙藥使用的安全性。查閱相關(guān)歷史文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，蒙藥草烏的配伍解毒可以追溯到公元前200多年，并且蒙醫(yī)常用訶子與草烏配伍以緩解草烏之毒性。訶子在蒙藥中的重要作用基本等同于中藥中的甘草，蒙醫(yī)認(rèn)為其有減毒、解毒等作用，不但炮制過程中常常使用訶子，訶子也多存于很多蒙藥經(jīng)典組方中。蒙藥部頒標(biāo)準(zhǔn)含草烏和訶子臨床常用蒙藥見表1，從中可以看出，蒙藥中訶子對(duì)草烏的重要意義[9]。

4 訶子對(duì)草烏“減毒存效”機(jī)制研究

4.1 從物質(zhì)基礎(chǔ)角度研究訶子配伍草烏減毒機(jī)制 ?趙愛娟[41]通過對(duì)蒙藥草烏與不同比例訶子配伍后的3種雙酯型生物堿的含量，以及含量變化規(guī)律進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)草烏與不同比例訶子配伍時(shí)，烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿含量變化趨勢(shì)呈現(xiàn)拋物線形，表明配伍訶子能顯著影響這3種雙酯型生物堿的含量。推測(cè)其機(jī)制為，一方面訶子的加入能夠促進(jìn)草烏中生物堿的溶出;另一方面，隨著訶子配伍比例增加，酸性成分增加，又進(jìn)一步加速毒性成分雙酯型生物堿的水解。楊暢等[42]采用高效液相色譜檢測(cè)生草烏水煎液、訶子制草烏水煎液及訶子草烏共煎液中烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿、苯甲酰烏頭堿、苯甲酰次烏頭堿和苯甲酰新烏頭堿的含量，從而進(jìn)行蒙醫(yī)理論“訶子可解烏頭毒”的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，雙酯型生物堿的含量由大到小依次為訶子草烏共煎液、訶子湯制草烏煎液、生草烏煎液;單酯型生物堿的含量由大到小依次為生草烏煎液、訶子草烏共煎液、訶子湯制草烏煎液。以上結(jié)果表明，蒙醫(yī)里“訶子可解草烏毒”的說法，不能簡(jiǎn)單認(rèn)為在炮制或配伍過程中訶子直接影響毒性成分雙酯型生物堿的含量，也需要把訶子鞣質(zhì)成分與草烏生物堿絡(luò)合生成難溶物質(zhì)，該難溶物質(zhì)在水煎煮的過程中可緩慢釋放并發(fā)生水解，減毒的同時(shí)也發(fā)揮草烏的治療作用，這種“減毒存效”可能性也納入減毒理論之中。

4.2 從吸收與代謝角度研究訶子配伍草烏減毒機(jī)制 在吸收方面，劉帥[43]利用人工胃腸液模型分別孵育生草烏和訶子制草烏粉末，通過檢測(cè)人工胃腸液不同時(shí)間點(diǎn)樣品中苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿等生物堿濃度，分析訶子配伍對(duì)草烏中生物堿動(dòng)態(tài)溶出規(guī)律的影響。結(jié)果顯示，在人工胃腸液模型中孵育30 min時(shí)，酯型生物堿溶出率已經(jīng)達(dá)到60%以上。無論在人工胃液還是人工腸液中，訶子制草烏中單、雙酯型生物堿溶出率均低于生草烏。

在排泄方面，趙璐璐等[44]利用藥物代謝動(dòng)力學(xué)的技術(shù)，研究訶子對(duì)草烏排泄的影響。結(jié)果顯示，草烏中毒性成分烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿這3種雙酯型烏頭堿主要通過腎臟排泄，其中各組中烏頭堿的累積排泄量順序是生草烏組、草烏配伍訶子組、制草烏組，烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的排泄半衰期的順序是草烏配伍訶子組、生草烏組、制草烏組，以上結(jié)果表明訶子能夠影響草烏的藥動(dòng)學(xué)過程中的排泄，使草烏在體內(nèi)的作用時(shí)間延長(zhǎng)，起到增效的作用。在代謝組學(xué)方面，劉丹丹等[45]利用高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的技術(shù)闡明訶子配伍草烏的“減毒存效”機(jī)制。結(jié)果顯示，生草烏主要涉及甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸代謝，丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代謝，甲烷代謝、酰胺tRNA的生物合成、組氨酸代謝和乙醛酸和二羧酸代謝這6條毒性代謝通路;同時(shí)訶子可下調(diào)由草烏引起的大鼠血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、肌紅蛋白和肌鈣蛋白的含量升高等指標(biāo)。

4.3 從心肌電生理角度研究訶子配伍草烏減毒機(jī)制 在心臟毒性方面，梁慧等[46]利用Langendorff離體心臟灌流方法，探討訶子對(duì)草烏中的烏頭堿的心臟毒性是否具有干預(yù)作用。結(jié)果顯示，烏頭堿模型造模引起大鼠心律失常后，訶子組和陽性對(duì)照組可降低大鼠心電圖中HR、QRS，升高RR-I、PRQ，并可恢復(fù)至正常值，且HR可以恢復(fù)正常。該實(shí)驗(yàn)表明訶子能夠緩解由烏頭堿所致的心律失常，具有配伍減毒保護(hù)心臟的作用。張曉菲等[47]通過灌胃的方式，選擇草烏長(zhǎng)期毒性劑量，用于研究訶子配伍草烏后大鼠血清磷酸激酶（CK）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、MDA的含量以及心肌組織Ca2+的含量和Na+-K+-ATP酶的活性的變化。結(jié)果顯示與生草烏組比較，訶子配伍草烏組中大鼠血清CK、GOT和MDA含量顯著降低，心肌組織中Ca2+含量降低而Na+-K+-ATP酶活性升高。以上結(jié)果表明訶子對(duì)草烏引發(fā)的大鼠心臟毒性具有一定的保護(hù)作用。

5 討論

蒙醫(yī)藥學(xué)是蒙古族人民在長(zhǎng)期日常生活與疾病斗爭(zhēng)過程中逐漸積累形成，并具有獨(dú)特的醫(yī)藥學(xué)理論、應(yīng)用方法與用藥特點(diǎn)的一門民族醫(yī)學(xué)，同時(shí)也是中醫(yī)學(xué)的重要組成。近些年，有關(guān)蒙藥安全用藥的研究呈逐年遞增的趨勢(shì)，并且臨床治療過程中使用毒性蒙藥的情況并不少見。草烏作為蒙醫(yī)臨床常用藥，具有祛風(fēng)、除濕、散寒、止痛之功效，并且蒙醫(yī)用草烏與中醫(yī)用藥比較，有著更為廣泛的用途和獨(dú)特的用藥特點(diǎn)。訶子作為蒙藥之王，具有解毒、減毒的良好功效，常在草烏炮制過程中或配伍時(shí)使用。訶子與草烏配伍，通過藥物相互間的作用，不僅能夠擴(kuò)大適應(yīng)證用藥范圍，還能緩和有毒藥物的毒性，減少不良反應(yīng)，提高含毒蒙藥使用的安全性。我們對(duì)訶子與草烏的化學(xué)成分、生理作用、毒性作用以及減毒的機(jī)制等方面進(jìn)行了綜述。通過本綜述，對(duì)訶子配伍草烏的減毒增效機(jī)制已經(jīng)取得了一定程度的認(rèn)識(shí)，但其二者配伍研究角度較為單一，大多停留在物質(zhì)基礎(chǔ)分析或藥理毒理作用層面，并且研究多集中于烏頭堿、新烏頭堿與次烏頭堿這種單一成分，研究對(duì)象重復(fù)性較大。將來訶子配伍草烏減毒作用機(jī)制研究可以聚焦在以下幾方面。1）可從訶子配伍草烏對(duì)肝臟細(xì)胞色素P450酶（CYP450）和心臟細(xì)胞色素P450酶的改變等角度設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞色素P450酶是血紅蛋白家族基因編碼的蛋白，作為重要的Ⅰ相代謝酶系，涉及體內(nèi)眾多內(nèi)源性與外源性物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化[48];2）可針對(duì)草烏對(duì)心肌細(xì)胞線粒體毒性作用進(jìn)行深入研究，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可包含線粒體的氧化應(yīng)激、ATP合成、線粒體膜電位、細(xì)胞內(nèi)鈣超載和線粒體生物合成相關(guān)因子的調(diào)控等。

綜上所述，蒙藥合理配伍能夠使藥物的安全性提高并擴(kuò)大藥物的應(yīng)用范圍，同時(shí)與時(shí)俱進(jìn)的科學(xué)技術(shù)為配伍減毒增效的機(jī)制研究提供了保障。有關(guān)蒙藥訶子配伍草烏的相關(guān)科學(xué)研究會(huì)伴隨先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)不斷發(fā)展，為蒙藥的臨床應(yīng)用和現(xiàn)代研究提供理論依據(jù)。

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（2020-06-01收稿 責(zé)任編輯：張雄杰）